研究背景多發(fā)性骨髓瘤（multiple myeloma,MM）是惡性漿細(xì)胞疾病,需要不斷探索新的治療方法。免疫治療是其中一種治療方法,其作用機制與化療藥物不同。嵌合抗原受體（chimeric antigen receptor,CAR）是將抗原識別結(jié)構(gòu)域和T細(xì)胞信號傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域等蛋白融合起來。CAR-T細(xì)胞在白血病和淋巴瘤的成功應(yīng)用,促使人們將CAR-T應(yīng)用于治療MM。CAR-T的設(shè)計需要合適的靶抗原,理想的靶抗原是骨髓瘤細(xì)胞表達(dá)較多,而正常細(xì)胞不表達(dá),這樣的CAR-T細(xì)胞能更好的殺傷腫瘤細(xì)胞,而副作用較少。根據(jù)以上情況,我們選擇了人BCMA抗原和人CD138抗原作為靶抗原。選擇兩個靶抗原的目的是為后續(xù)設(shè)計能同時識別兩個靶抗原的CAR奠定基礎(chǔ)。隨著CAR-T臨床研究的開展,研究發(fā)現(xiàn)在治療過程中腫瘤靶抗原表達(dá)下調(diào)甚至不表達(dá),進而導(dǎo)致腫瘤復(fù)發(fā),但具體機制尚不完全清楚。目前已有成熟的自發(fā)性小鼠骨髓瘤模型,非常貼近人MM的發(fā)生機制,是研究CAR-T治療過程中腫瘤逃逸機制和制定治療新策略的良好模型,但目前尚未有針對骨髓瘤（鼠源）的CAR-T細(xì)胞,因此我們設(shè)計了一個可以針對鼠CD138的CAR-T,為... 

【文章來源】：中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】：91 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖５．?ＣＡＲ結(jié)構(gòu)和原理（引自：Ｋｉｔｅ?Ｐｈａｒｍａ，?Ｉｎｃ．Ｓａｎｔａ?Ｍｏｎｉｃａ參考文獻）??

?解放軍醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位論文???持續(xù)時間較短４７。第三代ＣＡＲ包含２個或２個以上的共刺激分子，不僅增強了??ＣＡＲ－Ｔ細(xì)胞的增殖能力、細(xì)胞因子分泌能力，而且存活時間延長，在臨床應(yīng)用中??也得到驗證，但不良反應(yīng)更加明顯，故目前臨床試驗中，多以二代ＣＡＲ－Ｔ為主。??抗ＣＤ１９?ＣＡＲ－Ｔ細(xì)胞在治療ＣＤ１９陽性的白血病和淋巴瘤取得了非常好的結(jié)??果，部分接受治療的患者處于持續(xù)緩解狀態(tài)４８。因為ＭＭ和急性淋巴細(xì)胞白血病??都廣泛累及骨髓，所以我們希望將ＣＡＲ－Ｔ細(xì)胞擴展應(yīng)用到ＭＭ的治療中４９。??Ｆｉｒｓｔ?Ｓｅｃｏｎｄ?Ｔｈｉｒｄ??Ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ?Ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ?Ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ??ＣＡＲ?ＣＡＲ?ＣＡＲ??

圖７?ＭＭ細(xì)胞系均表達(dá)ＢＣＭＡ抗原??通過ＢＣＭＡ流式抗體和同型對照對ＲＰＭＩ－８２２６，?Ｕ２６６，?ＮＣＩ－Ｈ９２９ＭＭ細(xì)胞??系（陽性實驗組）和Ｋ５６２白血病細(xì)胞系（陰性實驗組）進行了染色。ＢＣＭＡ抗??原表達(dá)以平均熒光強度（ＭＦＩ）顯示于結(jié)果圖中。抗體檢測結(jié)果如圖中的藍(lán)色曲??線，以同型非細(xì)胞蛋白同型對照作為對照（紅色曲線）。結(jié)果顯示，ＲＰＭＩ－８２２６，??Ｕ２６６，?ＮＣＩ－Ｈ９２９?均高表達(dá)人?ＢＣＭＡ?抗原，ＭＦＩ?分別?１１５０，?１２００，?５４０。而?Ｋ５６２??細(xì)胞不表達(dá)ＢＣＭＡ抗原，平均熒光強度僅為１７９。??第二部分鼠抗ＢＣＭＡ－ＣＡＲ－Ｔ細(xì)胞制備和功能檢測??３．１抗ＢＣＭＡ－?ＣＡＲ的構(gòu)建??＿?ａｎｔｉ遞，＿ａｉｎ?＇：＞丨ａｄｔｉ－ＢＣ＿ｅａｖｙ．ｃｔｏ?）?Ｃ０３ｚＫａ?＞??■＇?丨―????ｒ?ｒ????


本文編號：3483373