多發(fā)性骨髓瘤（multiple myeloma,MM）是漿細胞惡性增殖性疾病,發(fā)病率在血液系統(tǒng)惡性腫瘤中位居第二位,近年來在我國發(fā)病率呈逐年上升趨勢。MM發(fā)病機制復(fù)雜,研究發(fā)現(xiàn)血液系統(tǒng)腫瘤的生物學行為同實體腫瘤一樣受到血管生成的影響,并且在MM疾病發(fā)展過程中,病理性血管生成對MM起促進作用。骨髓瘤血管生成過程中內(nèi)皮細胞處于核心位置,參與血管腔的改建,新生和穩(wěn)定等全部過程,是骨髓瘤新生血管擴張的關(guān)鍵因素。研究發(fā)現(xiàn),Rho（Ras homologous）家族成員RhoC,通過調(diào)節(jié)細胞骨架參與腫瘤血管的形成,對多發(fā)性骨髓瘤浸潤轉(zhuǎn)移發(fā)揮重要作用。前期研究中發(fā)現(xiàn)RhoC不僅在MM細胞表達,同樣表達于骨髓瘤內(nèi)皮細胞（multiple myeloma vein endothelial cells,MVECs）和正常人臍靜脈內(nèi)皮細胞（normal human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）中,推測下調(diào) RhoC在MVECs中的表達會減少骨髓瘤血管生成,且RhoC可直接參與MM血管內(nèi)皮細胞的形態(tài)或功能調(diào)節(jié)。關(guān)于下調(diào)MM細胞內(nèi)RhoC表達體內(nèi)對血管生成的影... 

【文章來源】：鄭州大學河南省 211工程院校

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１不同濃度上清誘導(dǎo)的內(nèi)皮細胞的增殖率??

?第一部分結(jié)果???１．?４?ＥＬＩＳＡ法檢測ＭＶＥＣｓ內(nèi)ＶＥＧＦＡ的分泌??ＥＬＩＳＡ結(jié)果顯示ＭＶＥＣｓ內(nèi)ＶＥＧＦＡ的表達含量與對照組相比有差異??（尸＜０．０５）（見表?５，圖?２）。??表５各組細胞ＥＬＩＳＡ實驗ＶＥＧＦＡ濃度結(jié)果??組別?無士Ｓ?ｔ值?ｐ值??ＮＣ?９３８．２３?±６５．３９??－３．８９?０．０１＊??Ｓ?１３２１．３８±１８７．３９??（與ＮＣ組相比，＊，戶＜０．０５）??ｔｈｅ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓ?ｏｆ?ＶＥＧＦ－Ａ??２０００－１??氺??１５００－?—Ｉ???＇。１＿?■??ｇｒｏｕｐｓ??圖２各組細胞ＥＬＩＳＡ實驗ＶＥＧＦＡ濃度結(jié)果??２?ＲｈｏＣ?ｓｈＲＮＡ轉(zhuǎn)染ＭＭ血管內(nèi)皮細胞對ＲＰＭＩ８２２６骨髓??瘤細胞生物學行為的影響??２．?１?ＲｈｏＣ?ｓｈＲＮＡ轉(zhuǎn)染細胞??將上述構(gòu)建的質(zhì)粒進行慢病毒載體包裝，將包裝后的慢病毒載體工作液稀??釋為１：?５的濃度進行轉(zhuǎn)染，轉(zhuǎn)染７２?ｈ后，在熒光倒置顯微鏡下觀察各組細胞，??２２??

?第一部分結(jié)果???慢病毒載體對ＭＶＥＣｓ和ＨＵＶＥＣｓ的轉(zhuǎn)染（如附圖３所示）。??２．?２?條件培養(yǎng)ＲＰＭＩ８２２６細胞??收集ＭＶＥＣｓ的上清液作為條件培養(yǎng)基，采用條件培養(yǎng)基培養(yǎng)ＲＰＭＩ８２２６細??胞４８ｈ后，獲得誘導(dǎo)的ＲＰＭＩ８２２６細胞。??２．３?各組ＰＭＩ８２２６細胞中ＲｈｏＣｍＲＮＡ和蛋白表達??Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ檢測條件培養(yǎng)ＲＰＭＩ８２２６細胞和對照組培養(yǎng)ＲｈｏＣ蛋白表達，??發(fā)現(xiàn)ＭＶＥＣｓ－Ｓ組較ＭＶＥＣｓ－ＮＣ組ＲｈｏＣ蛋白表達含量降低（／？?＜?０．０５），??ＨＵＶＥＣｓ－Ｓ組較ＨＵＶＥＣｓ－ＮＣ組ＲｈｏＣ蛋白表達含量降低（ｐ＜０．０５）（見表６，??圖３）。ＰＣＲ檢測條件培養(yǎng)骨髓瘤細胞和正常對照組中ＲｈｏＣ?ｍＲＮＡ表達情況，??結(jié)果發(fā)現(xiàn)經(jīng)過ＭＶＥＣｓ－Ｓ組較ＭＶＥＣｓ－ＮＣ組ＲｈｏＣ?ｍＲＮＡ表達降低（／？?＜?０．０５）??（圖?４）。??表６各組細胞ＲｈｏＣ蛋白相對表達結(jié)果（ｎ?＝３）??組別?ＮＣ組（Ｘ?土Ｓ）?Ｓ組（Ｘ士?Ｓ）?尸值??ＭＶＥＣｓ－ｎｃ?１．３６±０．１５?０．０４±０．０２＊?〇．〇〇??ＨＵＶＥＣｓ－ｎｃ?０．９２±０．０８?０．１０±０．０３＊?〇．〇〇??（與ＮＣ組相比，＊，尸＜０．０５）??１．６－．?＊??Ｉ：：?Ｉ?＊??啪?０．６－??Ｓ?０．４－??”ｄ?＿■廠??，?／??圖３各組ＲＰＭＩ８２２６細胞ＲｈｏＣ蛋白表達??２３??

【參考文獻】：
期刊論文
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