Gefitinib酸性改造增敏其對非小細胞肺癌療效
發(fā)布時間：2021-10-23 16:04
背景:全世界的統(tǒng)計數(shù)據(jù)表明,肺癌仍然是導致癌癥發(fā)生率和癌癥死亡率較高的主要原因（占癌癥死亡總數(shù)的18.4%）和最常被診斷出的癌癥類型（占癌癥總數(shù)的11.6%）[1]。非小細胞肺癌（Non-Small Cell Lung Cancer,NSCLC）是其中最主要的一類,約占所有肺癌的75–80%[2]。表皮生長因子受體（EGFR,epidermal growth factor receptor）及其信號通路的突變激活是NSCLC最常見的驅(qū)動因素。靶向EGFR的小分子酪氨酸激酶受體抑制劑（TKI）在非小細胞肺癌的治療中取得了非常好的療效。然而無論前期治療效果多么顯著,大多數(shù)病人只能維持半年到一年的有效期,就會產(chǎn)生耐受,使病人獲益受限,因此確定EGFR-TKIs對非小細胞肺癌的耐藥的具體作用機制,并據(jù)此設計相應逆轉(zhuǎn)耐藥的策略對NSCLC治療具有十分重要的意義。目前臨床上已根據(jù)研究設計了相應的策略用于逆轉(zhuǎn)NSCLC EGFR-TKIs耐藥,取得了卓越的療效,然而再次耐藥仍然不可避免,這表明存在其他尚未明確的耐藥機制。我們前期研究發(fā)現(xiàn),無論是第一代的EGFR-TKI Gefitinib,還是第三代...
【文章來源】：浙江大學浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】：58 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
Gefi-RB的合成（A）吉非替尼（90mg，0.2mmol）加入到5ml甲磺酸中攪拌，向溶液中加入甲硫氨酸（49.5mg，0.33mmol）
浙江大學碩士學位論文正文實驗結(jié)果21減壓濃縮，即化合物2。2號化合物溶解在二氯甲烷（20ml）中，逐滴緩慢加入3-溴丙胺氫溴酸鹽（219mg，1mmol）和溶于二氯甲烷（2ml）的三乙胺（0.556ml，4mmol）室溫攪拌24小時，用有機溶劑萃取，硫酸鎂干燥。真空濃縮溶劑。（C）化合物1（43.2mg，0.1mmol）溶于二甲基甲酰胺（DMF5ml）中，添加K2CO3（55.2mg，0.4mmol），在室溫下攪拌0.5小時。加入中間體3（84.3mg，0.15mmol）。加熱至80℃并攪拌過夜。有機溶劑萃取，硫酸鎂干燥。真空濃縮溶劑。（D）Gefi-RB的核磁氫譜圖結(jié)果。3.2Gefi-RB與溶酶體共定位用羅丹明B標記的Gefi-RB以及溶酶體示蹤劑LysoTracker共同處理細胞。發(fā)現(xiàn)Gefi-RB（紅色）與LysoTracker溶酶體示蹤劑（藍色）呈現(xiàn)明顯共定位（圖2，A），這表明吉非替尼的確在溶酶體中富集。進一步我們想確認Gefitinib的溶酶體積聚是否與EGFR的功能有關，我們在siRNA敲低EGFR的表達同時再次檢測Gefi-RB的定位，結(jié)果發(fā)現(xiàn)敲低EGFR表達對Gefitinib的溶酶體定位基本沒有影響（圖2，B）。因此，我們可以得出結(jié)論，Gefitinib在溶酶體中發(fā)生積聚，且這種聚集很不依賴于EGFR自身內(nèi)吞現(xiàn)象。圖2Gefi-RB與溶酶體共定位
浙江大學碩士學位論文正文實驗結(jié)果23圖3Gefi-2OH的合成（A）向溶于20ml二氯甲烷的3，5-二甲氧基苯甲酰氯（2g，10mmol）溶液中加入三乙胺（1.5ml，15mmol）和3-溴-1-丙醇（1.07ml，5mmol），將混合物在室溫攪拌5小時。用水沖洗反應物，干燥（硫酸鎂），過濾，得到4號化合物，為無色油狀物。將中間體4號化合物（604mg，2mmol）溶于二氯甲烷（10ml）。加入三氯化鋁（1333mg，10mmol），再加入碘化鈉（150mg，1mmol）。室溫攪拌6-12小時，將反應用飽和NH4Cl水溶液（1ml）淬滅，萃取，洗滌并用硫酸鎂干燥，過濾并將溶劑在真空下蒸發(fā)，得到淡黃色油狀的脫甲基產(chǎn)物5。（B）化合物5核磁氫譜圖結(jié)果。（C）將中間體5（274mg，1mmol）和對甲苯磺酸吡啶鎓（50.2mg，0.2mmol）在室溫下于10ml二氯甲烷中攪拌0.5小時，將3,4-二氫-α-吡喃（0.91mL，10mmol）溶解在5ml二氯甲烷中，加入反應體系中。室溫攪拌4-6小時，洗滌，干燥，并真空蒸發(fā)。得到中間體6，為無色油狀物。（D）化合物6核磁氫譜圖結(jié)果。（E）堿性中和的吉非替尼類似物（Gefi-2OH）的合成：向
【參考文獻】：
期刊論文
[1]Autophagy and multidrug resistance in cancer[J]. Ying-Jie Li,Yu-He Lei,Nan Yao,Chen-Ran Wang,Nan Hu,Wen-Cai Ye,Dong-Mei Zhang,Zhe-Sheng Chen. Chinese Journal of Cancer. 2017(08)
本文編號：3453483
【文章來源】：浙江大學浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】：58 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
Gefi-RB的合成（A）吉非替尼（90mg，0.2mmol）加入到5ml甲磺酸中攪拌，向溶液中加入甲硫氨酸（49.5mg，0.33mmol）
浙江大學碩士學位論文正文實驗結(jié)果21減壓濃縮，即化合物2。2號化合物溶解在二氯甲烷（20ml）中，逐滴緩慢加入3-溴丙胺氫溴酸鹽（219mg，1mmol）和溶于二氯甲烷（2ml）的三乙胺（0.556ml，4mmol）室溫攪拌24小時，用有機溶劑萃取，硫酸鎂干燥。真空濃縮溶劑。（C）化合物1（43.2mg，0.1mmol）溶于二甲基甲酰胺（DMF5ml）中，添加K2CO3（55.2mg，0.4mmol），在室溫下攪拌0.5小時。加入中間體3（84.3mg，0.15mmol）。加熱至80℃并攪拌過夜。有機溶劑萃取，硫酸鎂干燥。真空濃縮溶劑。（D）Gefi-RB的核磁氫譜圖結(jié)果。3.2Gefi-RB與溶酶體共定位用羅丹明B標記的Gefi-RB以及溶酶體示蹤劑LysoTracker共同處理細胞。發(fā)現(xiàn)Gefi-RB（紅色）與LysoTracker溶酶體示蹤劑（藍色）呈現(xiàn)明顯共定位（圖2，A），這表明吉非替尼的確在溶酶體中富集。進一步我們想確認Gefitinib的溶酶體積聚是否與EGFR的功能有關，我們在siRNA敲低EGFR的表達同時再次檢測Gefi-RB的定位，結(jié)果發(fā)現(xiàn)敲低EGFR表達對Gefitinib的溶酶體定位基本沒有影響（圖2，B）。因此，我們可以得出結(jié)論，Gefitinib在溶酶體中發(fā)生積聚，且這種聚集很不依賴于EGFR自身內(nèi)吞現(xiàn)象。圖2Gefi-RB與溶酶體共定位
浙江大學碩士學位論文正文實驗結(jié)果23圖3Gefi-2OH的合成（A）向溶于20ml二氯甲烷的3，5-二甲氧基苯甲酰氯（2g，10mmol）溶液中加入三乙胺（1.5ml，15mmol）和3-溴-1-丙醇（1.07ml，5mmol），將混合物在室溫攪拌5小時。用水沖洗反應物，干燥（硫酸鎂），過濾，得到4號化合物，為無色油狀物。將中間體4號化合物（604mg，2mmol）溶于二氯甲烷（10ml）。加入三氯化鋁（1333mg，10mmol），再加入碘化鈉（150mg，1mmol）。室溫攪拌6-12小時，將反應用飽和NH4Cl水溶液（1ml）淬滅，萃取，洗滌并用硫酸鎂干燥，過濾并將溶劑在真空下蒸發(fā)，得到淡黃色油狀的脫甲基產(chǎn)物5。（B）化合物5核磁氫譜圖結(jié)果。（C）將中間體5（274mg，1mmol）和對甲苯磺酸吡啶鎓（50.2mg，0.2mmol）在室溫下于10ml二氯甲烷中攪拌0.5小時，將3,4-二氫-α-吡喃（0.91mL，10mmol）溶解在5ml二氯甲烷中，加入反應體系中。室溫攪拌4-6小時，洗滌，干燥，并真空蒸發(fā)。得到中間體6，為無色油狀物。（D）化合物6核磁氫譜圖結(jié)果。（E）堿性中和的吉非替尼類似物（Gefi-2OH）的合成：向
【參考文獻】：
期刊論文
[1]Autophagy and multidrug resistance in cancer[J]. Ying-Jie Li,Yu-He Lei,Nan Yao,Chen-Ran Wang,Nan Hu,Wen-Cai Ye,Dong-Mei Zhang,Zhe-Sheng Chen. Chinese Journal of Cancer. 2017(08)
本文編號：3453483
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