目的探討缺氧條件下糖代謝對(duì)骨髓源性抑制性細(xì)胞（MDSCs）向腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞（TAM）分化的影響。方法采用流式細(xì)胞術(shù)選出MDSCs,Western blot法檢測(cè)缺氧或非缺氧條件下MDSCs中缺氧誘導(dǎo)因子1α（HIF-1α）、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子3（STAT3）的蛋白表達(dá)。缺氧條件下加入HIF-1α抑制劑LW6 20μmol/L、2-脫氧-D-葡萄糖（2-DG）0.5、5 mmol/L或寡霉素A 0.5 mmol/L后,采用流式細(xì)胞術(shù)觀察MDSCs向巨噬細(xì)胞體外分化的情況。采用流式細(xì)胞術(shù)、RT-PCR和ELISA法檢測(cè)MDSCs分化的細(xì)胞具有TAM特征的情況。結(jié)果與非缺氧條件相比,缺氧條件下HIF-1α蛋白表達(dá)、MDSCs向巨噬細(xì)胞分化的比例增加（P<0.05）,STAT3蛋白表達(dá)降低（P<0.05）;而加入HIF-1α抑制劑LW6可逆轉(zhuǎn)上述各指標(biāo)的變化過(guò)程（P<0.05）。2-DG 5 mmol/L和寡霉素A 0.5 mmol/L可下調(diào)缺氧條件下MDSCs向巨噬細(xì)胞分化（P<0.05）。在缺氧條件下,MDSCs分化的巨噬細(xì)胞特征為CD206陽(yáng)性、Arg-1基... 

【文章來(lái)源】：江蘇醫(yī)藥. 2020,46(11)

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【部分圖文】：

缺氧條件下HIF-1α和STAT3在MDSCs中的蛋白表達(dá)

與非缺氧條件相比,MDSCs在缺氧條件下培養(yǎng)7 d后的巨噬細(xì)胞比例增加(P<0.05);而加入LW6后,MDSCs在缺氧條件下培養(yǎng)7 d后的巨噬細(xì)胞比例降低(P<0.05)(圖2)。三、抑制糖酵解和氧化磷酸化對(duì)MDSCs向巨噬細(xì)胞分化的影響

CD206是TAM的特異性標(biāo)記,利用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)MDSCs分化的巨噬細(xì)胞CD206表達(dá)情況發(fā)現(xiàn),分化得到的巨噬細(xì)胞高表達(dá)CD206(90.3%);進(jìn)一步RT-PCR檢測(cè)MDSCs分化得到巨噬細(xì)胞與小鼠腹腔巨噬細(xì)胞相比,Arg-1基因表達(dá)升高(P<0.05);與未分化的MDSCs相比,MDSCs分化得到的巨噬細(xì)胞上清液中IL-10含量增加(P<0.05)(圖4)。圖4 缺氧條件下MDSCs分化的巨噬細(xì)胞具有TAM特征


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