發(fā)布時(shí)間：2021-09-09 07:10

　　目的:本研究通過在體外細(xì)胞培養(yǎng)上,應(yīng)用RNA干擾技術(shù)沉默ERK1/2基因后,分析其總的ERK基因的mRNAs、下游靶向蛋白表達(dá)、及其磷酸化水平變化,探討胃泌素是否通過ERK1/2信號(hào)分子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路實(shí)現(xiàn)對(duì)大腸癌細(xì)胞增殖的調(diào)控,旨在進(jìn)一步明確胃泌素調(diào)控大腸癌發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制,為部分激素依賴性大腸癌的個(gè)體化治療提供理論依據(jù)。方法:通過慢病毒感染細(xì)胞構(gòu)建CCKBR陽性的細(xì)胞穩(wěn)轉(zhuǎn)株CACO2,應(yīng)用RTQ-PCR檢測大腸癌細(xì)胞株CACO2中胃泌素受體（CCKBR）的表達(dá)情況,通過MTT法觀察不同濃度五肽胃泌素對(duì)細(xì)胞生長的影響情況,由此確定五肽胃泌素作用于大腸癌細(xì)胞株CACO2濃度范圍,實(shí)驗(yàn)共分四組:A組:為空白對(duì)照組,加入無血清培養(yǎng)基DMEM。B組:為陰性干擾組,無關(guān)陰性對(duì)照序列-shRNA轉(zhuǎn)染細(xì)胞,4-6小時(shí)后換1%胎牛血清培養(yǎng)基DMEM,再培養(yǎng)24h。C組:為胃泌素組,加入含胃泌素（25.00mg/L）培養(yǎng)基DMEM。D組:為轉(zhuǎn)染shRNA質(zhì)粒干擾+胃泌素組,4-6小時(shí)后換含胃泌素（25.00 mg/L）培養(yǎng)基DMEM,再培養(yǎng)24h。由上海吉?jiǎng)P基因構(gòu)建ERK1/2-shRNA,轉(zhuǎn)染后觀察轉(zhuǎn)... 

【文章來源】：皖南醫(yī)學(xué)院安徽省

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中英文縮略詞對(duì)照表
摘要
ABSTRACT
前言
研究材料和方法
    一、實(shí)驗(yàn)材料
    二、試劑名稱及配制
    三、實(shí)驗(yàn)方法
    四、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
附錄
作者簡介及讀研期間主要科研成果
致謝



本文編號(hào)：3391659