目的本論文旨在探究賴氨酸特異性去甲基化酶1（LSD1）與自噬體蛋白LC3在卵巢癌組織中的表達以及相互關(guān)系,并探討LSD1在人卵巢癌細胞自噬中的作用及其具體調(diào)控機制,為探尋卵巢癌發(fā)病機理及其分子靶向治療提供一種新的思路。方法1、利用生物信息學(xué),通過卵巢癌患者的癌癥基因組圖譜（TCGA）數(shù)據(jù)庫、Oncomine數(shù)據(jù)庫、Kaplan-Meier繪圖儀等分析軟件對卵巢癌組織中LSD1和LC3基因的表達進行分析。2、通過基因表達譜交互分析（GEPIA）軟件對LSD1與LC3基因表達的相關(guān)性進行分析。3、利用GST-LC3B pulldown實驗檢測LSD1的SWIRM結(jié)構(gòu)域與卵巢癌細胞內(nèi)的自噬體蛋白LC3的相互作用。4、通過免疫熒光染色法檢測LSD1與LC3在卵巢癌細胞內(nèi)的定位情況。5、采用蛋白質(zhì)免疫共沉淀法檢測卵巢癌HO8910和SKOV3細胞內(nèi)LC3蛋白的甲基化水平,以及LSD1對LC3甲基化的影響。6、在蛋白合成抑制劑cycloheximide（CHX）處理條件下,采用免疫印跡法檢測LSD1敲低對LC3蛋白穩(wěn)定性的影響。7、在溶酶體抑制劑Chloroquine（CQ）或蛋白酶體抑制劑MG1... 

【文章來源】：江蘇大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：75 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

自噬過程模式圖[58]

賴氨酸特異性去甲基化酶1在卵巢癌細胞自噬中的作用機理研究4圖1.1自噬過程模式圖[58]Fig1.1Theautophagypatterndiagramshowsthestagesandmolecules圖1.2自噬體蛋白LC3的成熟過程[59]Figure1.2MaturationprocessofautophagosomeproteinLC3自噬是一把雙刃劍[60]，自噬既能在不利環(huán)境中維持腫瘤細胞存活，又能在腫瘤發(fā)展的不同階段抑制其發(fā)生和轉(zhuǎn)移[61]。自噬可能參與癌細胞的生存或死亡[62]。此外，自噬的正常調(diào)節(jié)有利于腫瘤抑制蛋白或者癌基因的表達[63]。mTOR和AMPK可以負調(diào)控抑癌因子，導(dǎo)致自噬的誘導(dǎo)和對癌變起始階段的抑制[64]。相反，mTOR、I類PI3K和AKT可激活癌基因，從而抑制自噬，增強腫瘤形成[65]。

FIREHOSE分析LSD1(KDM1A)和LC3(MAP1LC3B)表達譜


本文編號：3377931