目的:結直腸癌為常見的人惡性腫瘤之一。目前,結直腸癌的治療方式主要根據(jù)癌癥發(fā)生的部位、分期及癌癥進展情況來選擇。早期癌癥主要依靠外科手術或輔以術前或術后放化療,內(nèi)分泌治療等,但是,當癌癥進入中晚期時,尤其發(fā)生嚴重轉移后,則無法通過手術治療達到預期效果。傳統(tǒng)的治療方法主要利用了化療藥物同時配合放射治療來控制癌癥的擴散和惡化。近些年來,基因的靶向治療成為了腫瘤治療新的熱點,也為結直腸癌的治療提供了許多新的方向,在多方面提高了結直腸癌患者的治愈率生存質量。在多年的研究中發(fā)現(xiàn),結直腸癌最主要的轉移部位是肝臟,在確診為結直腸原發(fā)癌的六個月內(nèi),約有25%-30%的患者發(fā)生了肝轉移。結直腸癌肝轉移是一個非常復雜的生物學過程,其機制尚不十分明顯,肝轉移是結直腸癌發(fā)生和預后不良的主要原因。Micro RNA（mi RNA）作為一種內(nèi)源的、長度約為20-24個核苷酸的小RNA,在細胞內(nèi)具有多種非常重要的調(diào)節(jié)作用。Mi RNA突變與異位表達與多種人類癌癥密切相關,mi RNA可以起到抑制腫瘤的發(fā)生發(fā)展或者促進腫瘤進展的作用,同時可以抑制或促進多種腫瘤相關基因表達。大量的研究表明,mi RNA在腫瘤的發(fā)生、發(fā)... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學遼寧省

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
第一部分 :Micro RNA-196a-5p對結直腸癌細胞上皮細胞-間充質轉化(EMT)的影響和機制研究
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 主要試劑和儀器
            2.1.1 主要試劑
            2.1.2 主要儀器
        2.2 實驗方法
            2.2.1 細胞培養(yǎng)
            2.2.2 細胞轉染
            2.2.3 細胞計數(shù)及鋪板
            2.2.4 Real-time PCR
            2.2.5 CCK8實驗
            2.2.6 細胞劃痕實驗
            2.2.7 細胞侵襲實驗
            2.2.8 Western blot
            2.2.9 免疫熒光檢測
            2.2.10 HE染色
            2.2.11 體內(nèi)腫瘤轉移實驗
            2.2.12 雙熒光素酶報告基因實驗
            2.2.13 統(tǒng)計學方法
    3 實驗結果
        3.1 MiR-196a-5p促進結直腸癌細胞的增殖
        3.2 MiR-196a-5p促進結直腸癌細胞的遷移和侵襲
        3.3 MiR-196a-5p促進結直腸癌肝轉移
        3.4 Mi R-196a-5p促進結直腸癌細胞的上皮間充質轉化(EMT)
        3.5 抑制NF-κB信號通路可以抑制結直腸癌細胞的EMT
        3.6 IκBα是 mi R-196a-5p的下游靶基因
        3.7 Mi R-196a-5p通過與IκBα的靶向結合促進了結直腸癌細胞的EMT和結直腸癌細胞的遷移和侵襲
    4 討論
    5 結論
第二部分 :Micro RNA-196b-5p通過靶向結合ING5 影響結直腸癌惡性生物學行為的機制研究
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 主要試劑和儀器
            2.1.1 主要試劑
            2.1.2 主要儀器
        2.2 實驗方法
            2.2.1 細胞培養(yǎng)
            2.2.2 細胞轉染
            2.2.3 細胞計數(shù)及鋪板
            2.2.4 Real-time PCR
            2.2.5 CCK8
            2.2.6 細胞遷移實驗
            2.2.7 細胞侵襲實驗
            2.2.8 Western blot
            2.2.9 體內(nèi)腫瘤轉移實驗
            2.2.10 雙熒光素酶報告基因實驗
            2.2.11 細胞凋亡實驗
            2.2.12 細胞周期檢測
            2.2.13 統(tǒng)計學方法
    3 實驗結果
        3.1 MiR-196b-5p在結直腸癌組織和細胞中高表達
        3.2 MiR-196b-5p影響結直腸癌細胞增殖和凋亡
        3.3 MiR-196b-5p影響結直腸癌細胞遷移和侵襲
        3.4 ING5影響結直腸癌細胞增殖和凋亡
        3.5 ING5影響結直腸癌細胞遷移和侵襲
        3.6 ING5是mi R-196b-5p的靶基因
        3.7 ING5 敲低同時抑制mi R-196b-5p在結直腸癌細胞中的表達,影響結直腸癌細胞增殖和凋亡
        3.8 ING5 敲低同時抑制mi R-196b-5p在結直腸癌細胞中的表達,影響結直腸癌細胞遷移和侵襲
        3.9 MiR-196b-5影響裸鼠腫瘤生長
    4 討論
    5 結論
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻
綜述
    參考文獻
攻讀學位期間取得的研究成果
致謝
個人簡歷


【參考文獻】：
期刊論文
[1]生長抑制蛋白家族成員5（ING5）在人乳腺癌細胞的核質轉運與不良臨床病理特征的相關性分析[J]. 宋洋,趙樹鵬,齊鳳杰,鄭華川.  細胞與分子免疫學雜志. 2018(01)
[2]MiR-196a與ZG16蛋白在結直腸癌中的表達意義及相關性分析[J]. 樊鑫鑫,趙青芳,關露露,劉奇,王茂勛,呂慧芳,陳小兵.  中華結直腸疾病電子雜志. 2017(04)
[3]MicroRNA-196a對食管癌預后的評估價值及其生物學行為的調(diào)控機制[J]. 吳曉鵬,陳強,劉勤,喬濱,張衛(wèi)國.  中國現(xiàn)代醫(yī)學雜志. 2017(13)
[4]miR-196a2 T>C基因多態(tài)與宮頸癌易感性的關系研究[J]. 丁波,王美林,張正東,韓素萍.  南京醫(yī)科大學學報(自然科學版). 2016(01)
[5]miR-374b-5p suppresses RECK expression and promotes gastric cancer cell invasion and metastasis[J]. Juan Xie,Zhi-Hui Tan,Xia Tang,Ming-Shu Mo,Yan-Ping Liu,Run-Liang Gan,Yi Li,Li Zhang,Guo-Qing Li.  World Journal of Gastroenterology. 2014(46)
[6]Micro RNAs in colorectal cancer:Role in metastasis and clinical perspectives[J]. Shan Muhammad,Kavanjit Kaur,Rui Huang,Qian Zhang,Paviter Kaur,Hamza Obaid Yazdani,Muhammad Umar Bilal,Jiang Zheng,Liu Zheng,Xi-Shan Wang.  World Journal of Gastroenterology. 2014(45)
[7]Colorectal cancer:Current imaging methods and future perspectives for the diagnosis, staging and therapeutic response evaluation[J]. Maka Kekelidze,Luigia D’Errico,Michele Pansini,Anthony Tyndall,Joachim Hohmann.  World Journal of Gastroenterology. 2013(46)
[8]High miR-196a levels promote the oncogenic phenotype of colorectal cancer cells[J]. Carl Christoph Schimanski,Kirsten Frerichs,Fareed Rahman,Martin Berger,Hauke Lang,Peter R Galle,Markus Moehler,Ines Gockel.  World Journal of Gastroenterology. 2009(17)



本文編號：3278712