目的：觀察DCLK1和Ki67在正常腸粘膜組織、癌旁組織、腺瘤組織和腺癌組織中的表達；分析DCLK1和Ki67在結直腸癌組織中的表達與臨床病理學參數及的意義；著重研究DCLK1+/Ki67-細胞在實體瘤和人結腸癌細胞株LoVo中的分布、形態(tài)特征、數量等,探討其在腺癌組織中與臨床病理學參數、患者預后的關系,進而確定結直腸癌干細胞的特異性免疫表型及生物學特征,為抗腫瘤治療提供新靶點。方法：選取150例結直腸癌組織、34例腺瘤組織、10例正常腸粘膜和10例癌旁組織手工制作組織芯片；HE染色觀察不同病理類型組織和LoVo細胞中細胞的形態(tài)特征、排列方式、分布位置等：免疫組織化學染色顯示DCLK1和Ki67在正常腸粘膜組織、癌旁組織、腺瘤組織和腺癌組織中的表達情況；免疫組化雙重標記腺癌組織中DCLK1和Ki67的表達并與相鄰切片HE染色的細胞形態(tài)進行比較；利用免疫組織熒光染色和化學染色雙重標記DCLK1+/Ki67-細胞在人結腸癌細胞株LoVo中的分布、形態(tài)特征、數量；利用統(tǒng)計學軟件SPSS19.0分析DCLK1、Ki67及DCLK1+/Ki67細胞在結直腸癌組織的表達與臨床病理學參數及預后的意義... 

【文章來源】：蘭州大學甘肅省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數】：58 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
前言
第一部分 正常腸粘膜、腺瘤組織及結直腸癌組織中DCLK1和Ki67的表達及其臨床病理學意義
    材料與方法
        1 研究對象
        2 研究方法與試劑
            2.1 手工制作組織芯片
                2.1.1 方法
                2.1.2 儀器與試劑
            2.2 免疫組織化學染色(EnliVision plus法)
                2.2.1 方法
                2.2.2 儀器與試劑
        3 結果判定
        4 數據分析
    結果
        1 Ki67在正常腸黏膜組織、癌旁組織及腺瘤組織中的表達
        2 DCLK1在正常腸黏膜組織、癌旁組織及病變組織中的表達
        3 DCLK1和Ki67蛋白的表達與臨床病理參數的關系
        4 DCLK1和Ki67在結直腸組織中表達的相關性
    討論
第二部分 結直腸癌組織中DCLK1~+/Ki67~-細胞的形態(tài)特征、位置、數量及其病理學意義
    材料與方法
        1 研究對象
        2 研究方法與試劑
            2.1 免疫組織化學雙重染色(DouSP法)
                2.1.1 方法
                2.1.2 儀器與試劑
            2.2 蘇木素-伊紅染色(HE)
                2.2.1 方法
                2.2.2 儀器與試劑
        3 結果判定
        4 統(tǒng)計學分析
    結果
        1 HE染色下正常腸粘膜組織、腺瘤組織和腺癌組織的組織學形態(tài)
        2 DCLK1~+/Ki67~-細胞在結直腸癌組織中的形態(tài)、分布位置及百分比
        3 DCLK1~+/Ki67~-細胞的表達與臨床病理參數間的關系
        4 DCLK1~+/Ki67~-細胞在正常腸粘膜、腺瘤及腺癌中的表達
        5 DCLK1~+/Ki67~-細胞在結直腸癌組織中的表達與預后的關系
    討論
第三部分 人結腸癌細胞株LoVo中DCLK1~+/Ki67~-細胞的數量及細胞形態(tài)特征
    材料與方法
        1 研究對象
        2 研究方法與試劑
            2.1 細胞培養(yǎng)與爬片
                2.1.1 方法
                2.1.2 試劑與儀器
            2.2 免疫組織化學雙重染色(DouSP法)
                2.2.1 方法
                2.2.2 儀器與試劑
            2.3 蘇木素-伊紅染色(HE)
                2.3.1 方法
                2.3.2 儀器與試劑
            2.4 免疫組織熒光雙重染色
                2.4.1 方法
                2.4.2 儀器與試劑
    結果
        1 HE染色下人結腸癌細胞株LoVo的細胞組織學形態(tài)
        2 DCLK1~+/Ki67~-細胞的形態(tài)及數量百分比
    討論
結論
附圖
參考文獻
英文縮寫
附錄
在校期間的研究成果
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]一種簡便實用的組織芯片制作方法[J]. 張登才,劉斌,張麗華,董亮,蘇勤軍,史敏,楊艷麗.  診斷病理學雜志. 2013(11)
[2]Doublecortin-like kinase 1 exhibits cancer stem cell-like characteristics in a human colon cancer cell line[J]. Lianna Li,Charles F. Bellows.  Chinese Journal of Cancer Research. 2013(02)
[3]Report of incidence and mortality in China cancer registries, 2009[J]. Wanqing Chen,Rongshou Zheng,Siwei Zhang,Ping Zhao,Guanglin Li,Lingyou Wu,Jie He.  Chinese Journal of Cancer Research. 2013(01)
[4]Colorectal cancer in inflammatory bowel disease:What is the real magnitude of the risk?[J]. Jessica K Dyson,Matthew D Rutter.  World Journal of Gastroenterology. 2012(29)
[5]結直腸癌CD44+/ki-67-癌干細胞特征及其與臨床病理關系[J]. 韓軍平,劉斌,楊艷麗,蘇勤軍,史敏,錢震,董亮,張彩蘭,哈英娣.  世界華人消化雜志. 2011(34)



本文編號：3248016