肝癌是世界上最常見也是致死率最高的癌癥類型之一,而現(xiàn)有的靶向治療手段對其療效甚微。肌細胞增強因子（myocyte enhancer factor 2,MEF2）作為一個被廣泛研究的轉錄因子家族,其參與并調(diào)控肌肉和神經(jīng)發(fā)育過程。值得一提的是,該家族成員中,MEF2D的蛋白結構特異性以及在腫瘤中的作用逐漸被人們關注。MEF2D作為轉錄因子,其蛋白結構的N端包含一個MADS/MEF2結構域,介導MEF2D自身的二聚化、MEF2D與DNA的結合以及與其他蛋白的相互作用,該結構域在MEF2家族各成員中具有保守性。而MEF2D蛋白的C端則包含多個轉錄激活結構域,且與MEF2家族其他成員有明顯差異。MEF2D在以肝癌為主的多種腫瘤中高表達,并提示疾病的進展和不良預后。具體作用上,MEF2D可以促進腫瘤的生長、侵襲轉移和血管化等過程,不僅調(diào)控腫瘤細胞自身生物學行為,也影響整個腫瘤微環(huán)境。由于炎癥相關的發(fā)病機制,很多肝癌都具有免疫原性,反映為其微環(huán)境中有各種類型的免疫細胞浸潤。其中一些免疫細胞,如效應性T細胞介導的抗腫瘤免疫反應可以抑制肝癌的進程。相反,肝癌也利用各種機制進行免疫逃逸。盡管有前期研究關注... 

【文章來源】：中國人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學重慶市

【文章頁數(shù)】：117 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

MEF2D促進H22肝癌細胞在同源野生型小鼠體內(nèi)成瘤

陸軍軍醫(yī)大學博士學位論文192.3.2臨床肝癌樣本中的腫瘤細胞MEF2D表達與T細胞瘤內(nèi)浸潤負相關，與CD8+T細胞耗竭正相關。為了在臨床肝癌標本中驗證上述結論并進一步探索機制，我們利用流式細胞術檢測了20例肝癌患者腫瘤細胞中MEF2D的表達，以及瘤內(nèi)浸潤的各類免疫細胞數(shù)量和耗竭程度（免疫細胞耗竭程度反映為PD-1和Tim-3陽性細胞占各類免疫細胞的百分比），并分析兩者的相關性（圖2A）。免疫組化染色技術檢測125例肝癌患者腫瘤細胞中MEF2D的表達及其與瘤內(nèi)浸潤T細胞數(shù)量以及臨床預后的相關性（圖2B、C）。檢測結果表明：MEF2D與瘤內(nèi)浸潤的CD3，CD4和CD8陽性T細胞數(shù)呈現(xiàn)顯著負相關，與瘤內(nèi)浸潤的CD8陽性細胞耗竭程度呈現(xiàn)顯著正相關；生存分析發(fā)現(xiàn)肝癌MEF2D高表達且T細胞瘤內(nèi)浸潤少的組中，患者生存時間明顯短于其他各組，即MEF2D高表達且T細胞浸潤少聯(lián)合提示患者的不良預后。圖2肝癌組織中腫瘤細胞MEF2D表達與免疫細胞瘤內(nèi)浸潤情況分析。（A）流式細胞術檢測

陸軍軍醫(yī)大學博士學位論文21圖3敲除MEF2D抑制肝癌細胞移植瘤生長的過程依賴CD8+T細胞。（A）CD4和CD8功能阻斷抗體系統(tǒng)干預條件下，敲除MEF2D及對照H22細胞在同源野生型BALB/c小鼠體內(nèi)成瘤能力檢測；（B）各組荷瘤同源野生型小鼠生存分析。2.4討論我們之前的研究發(fā)現(xiàn)MEF2D可以促進肝癌和結直腸癌的血管化過程，首次報道了MEF2D對腫瘤微環(huán)境的塑造作用[16]。然而腫瘤微環(huán)境不僅有血管存在，還包含各種細胞，例如腫瘤浸潤的免疫細胞，腫瘤相關的成纖維細胞等，以及存在各種細胞因子，缺氧以及酸性環(huán)境等[25,26]。肝癌由于其炎癥相關的發(fā)病機制，屬于具有免疫原性的腫瘤類型，其微環(huán)境中往往存在大量的免疫細胞。已有大量研究表明，這些浸潤的免疫細胞在肝癌的發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用[2]。而在以往MEF2D的各項研究中，免疫系統(tǒng)對MEF2D促進腫瘤發(fā)生發(fā)展中可能存在的作用一直被忽略。在本章的研究中，我們利用野生型和免疫缺陷型小鼠原位移植瘤模型，以及人臨床標本進行研究分析，首次發(fā)現(xiàn)抑制肝癌細胞MEF2D的表達限制腫瘤的生長依賴于小鼠自身T細胞介導的抗腫


本文編號：3231813