[目的]研究表明,NF-κB與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及侵襲轉(zhuǎn)移密切相關(guān),一般認(rèn)為NF-κB主要起抗凋亡和促腫瘤作用,因此NF-κB被作為治療靶點,其抑制劑被用于癌癥治療。然而,數(shù)以千計的NF-κB抑制劑卻未能發(fā)揮預(yù)期的臨床效果。隨著研究的深入,人們發(fā)現(xiàn)NF-κB不同位點的磷酸化狀態(tài)可表現(xiàn)出截然相反的功能。國外已有研究表明,NF-κB Rel A/p65第536位絲氨酸位點磷酸化（p-p65 Ser536）對結(jié)直腸癌、乳腺癌、前列腺癌有抑制作用。本課題對p-p65 Ser536在胃癌中的表達(dá)及作用進(jìn)行研究。[方法]使用組織芯片結(jié)合免疫組織化學(xué)法（SP法）檢測NF-κB p-p65 Ser536在正常胃粘膜、癌旁組織及胃癌中的表達(dá),并分析其表達(dá)的臨床意義;Western blot檢測胃癌細(xì)胞和永生化胃粘膜上皮細(xì)胞中的表達(dá)情況;使用間接免疫熒光染色法檢測NF-κB p65 Ser536的表達(dá)及觀察其磷酸化入核情況;建立NF-κB p65第536位絲氨酸位點磷酸化與非磷酸化細(xì)胞模型,通過使用Transwell遷移、侵襲小室實驗和劃痕實驗檢測NF-κB p-p65 Ser536對胃癌細(xì)胞遷移與侵襲能力... 

【文章來源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
中英文縮略詞表
第1章 緒論
第2章 實驗材料與試驗方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 實驗主要試劑
        2.1.2 實驗所需主要儀器
        2.1.3 實驗標(biāo)本
        2.1.4 實驗試劑的配制
    2.2 實驗方法
        2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2.2 免疫組化
        2.2.3 Westernblot
        2.2.4 細(xì)胞免疫熒光
        2.2.5 遷移實驗
        2.2.6 侵襲實驗
        2.2.7 劃痕實驗
        2.2.8 統(tǒng)計分析
第3章 實驗結(jié)果
    3.1 NF-κBp-p65 Ser536在胃癌細(xì)胞中低表達(dá)
    3.2 NF-κBp-p65 Ser536在胃癌細(xì)胞中低表達(dá)
    3.3 免疫熒光檢測RelA/p65 Ser536磷酸化蛋白入核情況
    3.4 質(zhì)粒載體構(gòu)建及胃癌SGC7901細(xì)胞轉(zhuǎn)染模型建立
    3.5 Transwell遷移與侵襲實驗結(jié)果
    3.6 劃痕實驗結(jié)果
第4章 討論
第5章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    1 NF-κB概述
    2 RelA/p65的磷酸化調(diào)控
    3 小結(jié)與展望
    參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間研究成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Treatment of gastric cancer[J]. Michele Orditura,Gennaro Galizia,Vincenzo Sforza,Valentina Gambardella,Alessio Fabozzi,Maria Maddalena Laterza,Francesca Andreozzi,Jole Ventriglia,Beatrice Savastano,Andrea Mabilia,Eva Lieto,Fortunato Ciardiello,Ferdinando De Vita.  World Journal of Gastroenterology. 2014(07)



本文編號：3201560