組蛋白去乙;敢种苿┣乓志谹和帕比司他調(diào)節(jié)遺傳性牙齦纖維瘤細(xì)胞增殖及機(jī)制研究
發(fā)布時(shí)間:2021-04-27 14:18
目的:本實(shí)驗(yàn)研究組蛋白去乙;敢种苿┣乓志谹(Trichostatina A)和帕比司他(Panobinostat LBH589)對(duì)遺傳性牙齦纖維瘤來(lái)源間充質(zhì)干細(xì)胞(H-GMSC)的細(xì)胞周期、增殖凋亡是否有影響及其相關(guān)分子機(jī)制,為遺傳性牙齦纖維瘤病的臨床治療提供新的手段。方法:1.遺傳性牙齦纖維瘤來(lái)源間充干細(xì)胞(H-GMSC)的分離、培養(yǎng)及鑒定。第三代健康牙齦間充質(zhì)干細(xì)胞(N-GMSC)由本課題組內(nèi)提供。H-GMSC分離自遺傳性牙齦纖維瘤病患者牙齦組織,選取生長(zhǎng)狀態(tài)良好遺傳性牙齦纖維瘤來(lái)源間充質(zhì)干細(xì)胞,流式檢測(cè)H-GMSC表面的干細(xì)胞標(biāo)記分子的表達(dá)情況。并對(duì)分離所得牙齦間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行成骨成脂分化誘導(dǎo),分別通過(guò)茜素紅染色、油紅O染色鑒定間充質(zhì)干細(xì)胞成骨成脂的多潛能分化能力。2.組蛋白去乙;敢种苿┣乓志谹(Trichostatina A TSA)和帕比司他(Panobinostat LBH589)對(duì)H-GMSC的細(xì)胞周期、增殖凋亡的調(diào)節(jié)及其分子機(jī)制通過(guò)MTT和Annexin V法檢測(cè)不同濃度TSA和LBH589,即0 nM,50 nM,100 nM,200 nM,500 n...
【文章來(lái)源】:天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】:53 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
縮略語(yǔ)/符號(hào)說(shuō)明
前言
研究現(xiàn)狀、成果
研究目的、方法
一、遺傳性牙齦纖維瘤來(lái)源間充質(zhì)干細(xì)胞(H-GMSC)的分離培養(yǎng)鑒定
1.1 對(duì)象和方法
1.1.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)備及試劑
1.1.2 牙齦組織獲取
1.1.3 人牙齦間充質(zhì)干細(xì)胞分離培養(yǎng)
1.1.4 倒置顯微鏡觀察
1.1.5 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)H-GMSC表面抗原
1.1.6 成骨誘導(dǎo)及染色
1.1.7 成脂誘導(dǎo)及染色
1.2 結(jié)果
1.2.1 顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)
1.2.2 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)H-GMSC表達(dá)干細(xì)胞表面標(biāo)志分子
1.2.3 H-GMSC體外成骨誘導(dǎo)分化具有礦化結(jié)節(jié)形成能力
1.2.4 H-GMSC體外成脂誘導(dǎo)分化油紅O染色呈陽(yáng)性
1.3 討論
1.4 小結(jié)
二、組蛋白去乙酰化酶抑制劑對(duì)H-GMSC細(xì)胞周期、增殖凋亡的調(diào)節(jié)作用及其分子機(jī)制
2.1 對(duì)象和方法
2.1.1 主要實(shí)驗(yàn)試劑及設(shè)備
2.1.2 MTT法檢測(cè)不同濃度TSA和 LBH589對(duì)H-GMSC增殖的影響…
2.1.3 AnnexinV檢測(cè)不同濃度TSA和 LBH589對(duì)H-GMSC凋亡的影響
2.1.4 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)不同濃度TSA和 LBH589對(duì)H-GMSC細(xì)胞周期的影響
Waf/Cip1的表達(dá)"> 2.1.5 半定量RT-PCR及 Western-blot檢測(cè)TSA和 LBH589對(duì)H-GMSC中p21Waf/Cip1的表達(dá)
2.2 結(jié)果
2.2.1 MTT法檢測(cè)顯示TSA和 LBH589 抑制H-GMSC增殖并具有濃度依賴性
2.2.2 AnnexinV檢測(cè)顯示TSA和 LBH589 促進(jìn)H-GMSC凋亡并具有濃度依賴性
2.2.3 流式細(xì)胞顯示TSA和 LBH589 影響H-GMSC細(xì)胞周期的G1 期
Waf/Cip1調(diào)節(jié)H-GMSC細(xì)胞周期抑制細(xì)胞增殖"> 2.2.4 TSA和 LBH589 通過(guò)上調(diào)p21Waf/Cip1調(diào)節(jié)H-GMSC細(xì)胞周期抑制細(xì)胞增殖
2.3 討論
2.4 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說(shuō)明
綜述 組蛋白乙酰化修飾在腫瘤發(fā)生、發(fā)展、治療中的作用研究進(jìn)展
綜述參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷
本文編號(hào):3163620
【文章來(lái)源】:天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】:53 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
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中文摘要
Abstract
縮略語(yǔ)/符號(hào)說(shuō)明
前言
研究現(xiàn)狀、成果
研究目的、方法
一、遺傳性牙齦纖維瘤來(lái)源間充質(zhì)干細(xì)胞(H-GMSC)的分離培養(yǎng)鑒定
1.1 對(duì)象和方法
1.1.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)備及試劑
1.1.2 牙齦組織獲取
1.1.3 人牙齦間充質(zhì)干細(xì)胞分離培養(yǎng)
1.1.4 倒置顯微鏡觀察
1.1.5 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)H-GMSC表面抗原
1.1.6 成骨誘導(dǎo)及染色
1.1.7 成脂誘導(dǎo)及染色
1.2 結(jié)果
1.2.1 顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)
1.2.2 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)H-GMSC表達(dá)干細(xì)胞表面標(biāo)志分子
1.2.3 H-GMSC體外成骨誘導(dǎo)分化具有礦化結(jié)節(jié)形成能力
1.2.4 H-GMSC體外成脂誘導(dǎo)分化油紅O染色呈陽(yáng)性
1.3 討論
1.4 小結(jié)
二、組蛋白去乙酰化酶抑制劑對(duì)H-GMSC細(xì)胞周期、增殖凋亡的調(diào)節(jié)作用及其分子機(jī)制
2.1 對(duì)象和方法
2.1.1 主要實(shí)驗(yàn)試劑及設(shè)備
2.1.2 MTT法檢測(cè)不同濃度TSA和 LBH589對(duì)H-GMSC增殖的影響…
2.1.3 AnnexinV檢測(cè)不同濃度TSA和 LBH589對(duì)H-GMSC凋亡的影響
2.1.4 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)不同濃度TSA和 LBH589對(duì)H-GMSC細(xì)胞周期的影響
Waf/Cip1的表達(dá)"> 2.1.5 半定量RT-PCR及 Western-blot檢測(cè)TSA和 LBH589對(duì)H-GMSC中p21Waf/Cip1的表達(dá)
2.2 結(jié)果
2.2.1 MTT法檢測(cè)顯示TSA和 LBH589 抑制H-GMSC增殖并具有濃度依賴性
2.2.2 AnnexinV檢測(cè)顯示TSA和 LBH589 促進(jìn)H-GMSC凋亡并具有濃度依賴性
2.2.3 流式細(xì)胞顯示TSA和 LBH589 影響H-GMSC細(xì)胞周期的G1 期
Waf/Cip1調(diào)節(jié)H-GMSC細(xì)胞周期抑制細(xì)胞增殖"> 2.2.4 TSA和 LBH589 通過(guò)上調(diào)p21Waf/Cip1調(diào)節(jié)H-GMSC細(xì)胞周期抑制細(xì)胞增殖
2.3 討論
2.4 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說(shuō)明
綜述 組蛋白乙酰化修飾在腫瘤發(fā)生、發(fā)展、治療中的作用研究進(jìn)展
綜述參考文獻(xiàn)
致謝
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本文編號(hào):3163620
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