目的:研究胰腺癌組織及胰腺癌細(xì)胞中LncRNA XIST、miRNA-101的表達(dá)量及它們之間的表達(dá)關(guān)系,進(jìn)一步研究LncRNA XIST對miRNA-101的調(diào)控作用和LncRNA XIST對胰腺癌生長與轉(zhuǎn)移的影響。方法:收集胰腺癌患者經(jīng)過手術(shù)治療切除的腫瘤組織及癌旁組織標(biāo)本,同時(shí)培養(yǎng)兩種胰腺癌細(xì)胞,分別計(jì)算胰腺癌組織和細(xì)胞中LncRNA XIST與miRNA-101的表達(dá)量,得出二者表達(dá)量之間的相關(guān)性。進(jìn)行雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證LncRNA XIST與miRNA-101之間具有單向調(diào)控關(guān)系,將培養(yǎng)的兩種胰腺癌細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染,得到轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞分別是XIST敲低組、XIST增強(qiáng)組和對照轉(zhuǎn)染,Real-time PCR檢測計(jì)算基因表達(dá)量以及驗(yàn)證轉(zhuǎn)染的準(zhǔn)確性。轉(zhuǎn)染后的各組細(xì)胞分別進(jìn)行細(xì)胞活力檢測實(shí)驗(yàn)（CCK-8）、細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)（劃痕實(shí)驗(yàn)）、遷移侵襲實(shí)驗(yàn)（Transwell）,再進(jìn)行兩種基因的共轉(zhuǎn)染,得到Control、shXIST、shXIST+miR-NC、shXIST+miRNA-101inhibitors（Panc-1組）及Control、XIST、XIST+miR-NC、XIST+miR... 

【文章來源】：皖南醫(yī)學(xué)院安徽省

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
前言
研究材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)材料
    1.2 胰腺癌組織標(biāo)本的收取
    1.3 細(xì)胞培養(yǎng)與細(xì)胞轉(zhuǎn)染
    1.4 胰腺癌組織與細(xì)胞Lnc RNA XIST與 mi RNA-101 表達(dá)水平檢測
    1.5 雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)
    1.6 細(xì)胞活力檢測
    1.7 劃痕實(shí)驗(yàn)
    1.8 Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)
    1.9 兩種基因分別在兩種細(xì)胞的共轉(zhuǎn)染
    1.10 裸鼠成瘤實(shí)驗(yàn)
    1.11 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
結(jié)果
    2.1 胰腺癌組織中Lnc RNA XIST的相對表達(dá)量
    2.2 胰腺癌組織中miRNA-101的相對表達(dá)量
    2.3 兩種細(xì)胞中Lnc RNA XIST的相對表達(dá)量及轉(zhuǎn)染后轉(zhuǎn)染效率的檢測
    2.4 雙熒光素酶分析報(bào)告
    2.5 CCK-8法檢測細(xì)胞增殖情況
    2.6 各組細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)對比
    2.7 各組細(xì)胞Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)對比
    2.8 兩種基因共轉(zhuǎn)染方法下Lnc RNA XIST調(diào)控作用對比
    2.9 裸鼠成瘤實(shí)驗(yàn)
討論
    3.1 胰腺癌組織與細(xì)胞Lnc RNA XIST、mi RNA-101 的表達(dá)
    3.2 Lnc RNA XIST和 mi RNA-101 調(diào)控關(guān)系
    3.3 體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證
    3.4 共轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)背后的深層次分析與動(dòng)物實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證
    3.5 總結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
附錄
作者簡介及讀研期間主要科研成果
致謝



本文編號：3154186