YY1/miR-186/ZHX1調(diào)控胰腺癌侵襲和增殖的機制研究
發(fā)布時間:2021-04-09 23:43
目的ZHX1(zinc finger and homeobox 1)是ZHX家族(ZHX1,ZHX2,ZHX3)的一員,很有可能扮演轉(zhuǎn)錄抑制因子的作用。有研究表明ZHX1在癌癥的發(fā)展過程發(fā)揮重要的作用,如胃癌,肝癌,膽管癌,腎癌等。但是關(guān)于ZHX1在胰腺癌中的相關(guān)研究暫未有報道。在本研究中,我們探討ZHX1在胰腺癌中的表達、功能以及相關(guān)機制。方法(1)利用IHC(免疫組織化學(xué)法)檢測ZHX1在53對胰腺癌組織和對應(yīng)非癌組織中的定位及表達,分析ZHX1的表達與臨床病理因素的關(guān)系;利用免疫熒光法(IF)檢測ZHX1在胰腺癌細胞中的表達部位;(2)利用RT-PCR(逆轉(zhuǎn)錄聚合酶聯(lián)反應(yīng))和Western blot(蛋白印跡實驗)檢測ZHX1在胰腺癌細胞株SW1990,CFPAC-1,Patu8988,PL45,和Panc-1中的表達情況,分別用si RNA-ZHX1轉(zhuǎn)染胰腺癌細胞株靶向沉默ZHX1的表達,用ZHX1過表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至胰腺癌細胞株,利用RT-PCR和Western blot確認si RNA沉默及質(zhì)粒過表達ZHX1的效率;(3)下調(diào)及上調(diào)ZHX1表達后,利用細胞侵襲實驗、劃痕實驗、平...
【文章來源】:蘇州大學(xué)江蘇省
【文章頁數(shù)】:64 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
胰腺癌5年生存率和中位生存時間(引自Hartwig,TheLancetOncology,2013[4])
圖 1 胰腺癌及非癌胰腺組織 ZHX-1 的表達(IHC,X200,X400) 1 免疫組化檢測 ZHX1 蛋白在胰腺癌和非癌胰腺組織中的表例數(shù) 陽性例數(shù) 陽性率 χ2織 53 14 26.4%27.549 織 53 41 77.3%表 2 胰腺癌中 ZHX1 的表達與臨床病理因素的關(guān)系ZHX1 的表達素 例數(shù) 陽性 陰性 28 6 2225 8 17歲)
十、統(tǒng)計處理采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學(xué)處理, 計量資料數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差表示,組間比較采用單因素方差分析。P<0.05表示有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié) 果一、ZHX1 在胰腺癌細胞中的表達和定位在 5 個胰腺癌細胞株(SW1990,CFPAC-1,Patu8988,PL45,和 PANC-1)中,我們通過 RT-PCR 和 Western blot 實驗分別在 mRNA 和蛋白水平檢測 ZHX1 的表達。結(jié)果顯示,ZHX1 在 Patu8988 細胞中表達水平最高,在 CFPAC-1 中 ZHX1 表達水平最低(圖 1,圖 3)。因此,我們選用 Patu8988 和 CFPAC-1 細胞株進行后續(xù)的細胞學(xué)實驗。在胰腺癌細胞株 Patu8988 中,免疫熒光實驗結(jié)果表明 ZHX1 主要在細胞核中表達,并在細胞質(zhì)中略微表達(圖 2),與第一部分胰腺癌組織免疫組化的結(jié)果相一致。
【參考文獻】:
期刊論文
[1]胰腺癌危險因素的研究進展[J]. 王濱. 職業(yè)與健康. 2017(21)
[2]PI3K/Akt/mTOR信號通路在腫瘤中的研究進展[J]. 肖亮,殷小成. 現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生. 2016(12)
[3]ZHX2與腫瘤的相關(guān)性研究[J]. 付世杰,郭慶河. 國際腫瘤學(xué)雜志. 2013 (12)
[4]Notch信號通路與腫瘤研究[J]. 劉兆國,朱智杰,周梁,田超,王愛云,陳文星,鄭仕中,陸茵. 中國藥理學(xué)通報. 2012(08)
[5]胰腺癌發(fā)病分子機制研究進展[J]. 葉爾買克,張明鑫,王健生. 北京聯(lián)合大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2010(03)
[6]腫瘤轉(zhuǎn)移研究的現(xiàn)狀與趨勢[J]. 齊菲菲,賀福初,姜穎. 生物化學(xué)與生物物理進展. 2009(10)
[7]真核生物轉(zhuǎn)錄因子及其研究方法進展[J]. 張娜,尹繼剛,孫高超,陳啟軍. 動物醫(yī)學(xué)進展. 2009(01)
[8]miRNA的生物學(xué)特性和功能[J]. 俞焙秦,劉炳亞. 上海交通大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2007(05)
博士論文
[1]轉(zhuǎn)錄因子和microRNA組成的基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的生物信息學(xué)分析[D]. 蘇乃芳.北京大學(xué) 2013
碩士論文
[1]肝細胞癌組織HK-Ⅱ表達對評估患者預(yù)后的價值[D]. 陳賀.大連醫(yī)科大學(xué) 2014
本文編號:3128522
【文章來源】:蘇州大學(xué)江蘇省
【文章頁數(shù)】:64 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
胰腺癌5年生存率和中位生存時間(引自Hartwig,TheLancetOncology,2013[4])
圖 1 胰腺癌及非癌胰腺組織 ZHX-1 的表達(IHC,X200,X400) 1 免疫組化檢測 ZHX1 蛋白在胰腺癌和非癌胰腺組織中的表例數(shù) 陽性例數(shù) 陽性率 χ2織 53 14 26.4%27.549 織 53 41 77.3%表 2 胰腺癌中 ZHX1 的表達與臨床病理因素的關(guān)系ZHX1 的表達素 例數(shù) 陽性 陰性 28 6 2225 8 17歲)
十、統(tǒng)計處理采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學(xué)處理, 計量資料數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差表示,組間比較采用單因素方差分析。P<0.05表示有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié) 果一、ZHX1 在胰腺癌細胞中的表達和定位在 5 個胰腺癌細胞株(SW1990,CFPAC-1,Patu8988,PL45,和 PANC-1)中,我們通過 RT-PCR 和 Western blot 實驗分別在 mRNA 和蛋白水平檢測 ZHX1 的表達。結(jié)果顯示,ZHX1 在 Patu8988 細胞中表達水平最高,在 CFPAC-1 中 ZHX1 表達水平最低(圖 1,圖 3)。因此,我們選用 Patu8988 和 CFPAC-1 細胞株進行后續(xù)的細胞學(xué)實驗。在胰腺癌細胞株 Patu8988 中,免疫熒光實驗結(jié)果表明 ZHX1 主要在細胞核中表達,并在細胞質(zhì)中略微表達(圖 2),與第一部分胰腺癌組織免疫組化的結(jié)果相一致。
【參考文獻】:
期刊論文
[1]胰腺癌危險因素的研究進展[J]. 王濱. 職業(yè)與健康. 2017(21)
[2]PI3K/Akt/mTOR信號通路在腫瘤中的研究進展[J]. 肖亮,殷小成. 現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生. 2016(12)
[3]ZHX2與腫瘤的相關(guān)性研究[J]. 付世杰,郭慶河. 國際腫瘤學(xué)雜志. 2013 (12)
[4]Notch信號通路與腫瘤研究[J]. 劉兆國,朱智杰,周梁,田超,王愛云,陳文星,鄭仕中,陸茵. 中國藥理學(xué)通報. 2012(08)
[5]胰腺癌發(fā)病分子機制研究進展[J]. 葉爾買克,張明鑫,王健生. 北京聯(lián)合大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2010(03)
[6]腫瘤轉(zhuǎn)移研究的現(xiàn)狀與趨勢[J]. 齊菲菲,賀福初,姜穎. 生物化學(xué)與生物物理進展. 2009(10)
[7]真核生物轉(zhuǎn)錄因子及其研究方法進展[J]. 張娜,尹繼剛,孫高超,陳啟軍. 動物醫(yī)學(xué)進展. 2009(01)
[8]miRNA的生物學(xué)特性和功能[J]. 俞焙秦,劉炳亞. 上海交通大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2007(05)
博士論文
[1]轉(zhuǎn)錄因子和microRNA組成的基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的生物信息學(xué)分析[D]. 蘇乃芳.北京大學(xué) 2013
碩士論文
[1]肝細胞癌組織HK-Ⅱ表達對評估患者預(yù)后的價值[D]. 陳賀.大連醫(yī)科大學(xué) 2014
本文編號:3128522
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