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RMP通過(guò)ATM/NFκB通路促進(jìn)肝癌細(xì)胞的DNA損傷修復(fù)

發(fā)布時(shí)間:2021-04-09 05:22
  目的:研究在肝癌中RMP(RPB5 Mediating Protein)介導(dǎo)的DNA損傷修復(fù)及其分子機(jī)制。方法:1、肝癌細(xì)胞以及肝正常細(xì)胞經(jīng)60Coγ射線處理后,Real-time PCR和Western blot檢測(cè)RMP的mRNA和蛋白表達(dá)水平。2、通過(guò)Real-time PCR檢測(cè)各細(xì)胞株輻照后不同時(shí)間點(diǎn)Rad50、Mre11和Ku70的mRNA表達(dá)水平。3、通過(guò)Western blot檢測(cè)各細(xì)胞株輻照后不同時(shí)間點(diǎn)Rad50、Mre11、Ku70、ATM、p-ATM、p65、p-p65、AKT、p-AKT、IκB的蛋白表達(dá)水平。4、通過(guò)免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)檢測(cè)RMP與Mre11的相互作用。5、通過(guò)Western blot檢測(cè)瞬時(shí)轉(zhuǎn)染不同劑量RMP過(guò)表達(dá)質(zhì)粒pCDNA3.1-RMPo的HepG2細(xì)胞中p65、p-p65、IκB的蛋白表達(dá)水平。6、通過(guò)Western blot檢測(cè)ATM抑制劑Ku55933處理后各細(xì)胞株p65入核情況。7、通過(guò)Western blot檢測(cè)NFκB磷酸化抑制劑Bay 11-7082處理后各細(xì)胞株中p65和p-p65的蛋白表達(dá)水平。8、通過(guò)彗星電泳實(shí)驗(yàn)檢測(cè)NFκ... 

【文章來(lái)源】:蘇州大學(xué)江蘇省

【文章頁(yè)數(shù)】:75 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
引言
材料與方法
    1 材料
    2 主要儀器設(shè)備
    3 實(shí)驗(yàn)方法
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    1 肝癌細(xì)胞系(HepG2、SMMC-7721)和肝正常細(xì)胞系(QSG-7701、HL-7702)輻照之后不同時(shí)間點(diǎn)RMP基因的mRNA表達(dá)量
    2 肝癌細(xì)胞系(HepG2、SMMC-7721)和肝正常細(xì)胞系(QSG-7701、HL-7702)輻照之后不同時(shí)間點(diǎn)RMP基因的蛋白表達(dá)水平
    3 檢測(cè)RMP對(duì)DNA損傷修復(fù)相關(guān)基因mRNA表達(dá)量的影響
    4 檢測(cè)RMP對(duì)DNA損傷修復(fù)相關(guān)基因蛋白表達(dá)量的影響
    5 RMP與Mre11蛋白的相互作用情況
    6 RMP表達(dá)對(duì)ATM表達(dá)量及其磷酸化水平的影響
    7 RMP表達(dá)對(duì)p65表達(dá)量及其磷酸化水平的影響
    8 RMP表達(dá)量的不同對(duì)p65磷酸化水平的影響
    9 抑制劑Ku55933抑制p65入核
    10 檢測(cè)Bay 11-7082對(duì)肝癌細(xì)胞內(nèi)p-p65蛋白表達(dá)的影響
    11 抑制劑Bay 11-7082抑制RMP對(duì)肝癌細(xì)胞DNA損傷修復(fù)的促進(jìn)作用
    12 RMP、p-ATM、p-p65在臨床病例中的表達(dá)
結(jié)論
討論
參考文獻(xiàn)
綜述:關(guān)于DNA雙鏈損傷修復(fù)信號(hào)通路的研究
    參考文獻(xiàn)
展望
本文受下列資金資助
縮略詞表
致謝


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]原發(fā)性肝癌放射治療進(jìn)展[J]. 代麗,趙恒芳,劉孜.  胃腸病學(xué). 2008(11)
[2]腫瘤細(xì)胞放射敏感性與放射誘導(dǎo)凋亡關(guān)系的研究[J]. 鐘軍,熊戴群,羅輝,陳文學(xué).  實(shí)用癌癥雜志. 2007(06)



本文編號(hào):3127000

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