目的:檢測神經(jīng)元素3（neurogenin3,NEUROG3）在胃癌臨床標(biāo)本和細(xì)胞系中的表達(dá),探討其與胃癌細(xì)胞分化程度及腫瘤分期的關(guān)系。方法:回顧性收集2016年—2018年重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院181例患者的臨床病理資料。并采用免疫組織化學(xué)染色（immunohistochemistry,IHC）檢測NEUROG3在腸化生胃粘膜和胃癌組織中的表達(dá)。利用Real-time PCR和Western blot,檢測NEUROG3在不同分化程度胃癌細(xì)胞系和人胃黏膜上皮細(xì)胞系GES-1中的表達(dá)。觀察沉默NEUROG3基因表達(dá)的MKN-28細(xì)胞形態(tài)變化,并通過Real-time PCR檢測其胃癌細(xì)胞分化抑制蛋白（inhibitor of DNA binding or differentiation,Id-1）的表達(dá)。結(jié)果:NEUROG3在低分化胃癌組織中表達(dá)較低,而在癌旁組織、腸化生胃粘膜組織和中高分化胃癌組織中表達(dá)評分較高,評分差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.001）。GES-1和高分化胃癌細(xì)胞系MKN-28中的NEUROG3表達(dá)明顯高于中低分化胃癌細(xì)胞系SGC-7901、MKN-45和BGC... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：29 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

IHC染色檢測不同胃組織中NEUROG3的表達(dá)情況

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文9系中NEUROG3的表達(dá)情況。結(jié)果提示，在高分化胃癌細(xì)胞系MKN-28和胃黏膜上皮細(xì)胞系GES-1中，NEUROG3的基因轉(zhuǎn)錄水平明顯高于中低分化胃癌細(xì)胞系SGC-7901、MKN-45和BGC-823，并且蛋白表達(dá)呈強陽性（圖2），與臨床標(biāo)本的檢測結(jié)果一致。為了進(jìn)一步評估NEUROG3在胃癌細(xì)胞分化中的作用，我們利用前期實驗構(gòu)建的沉默了NEUROG3的MKN-28細(xì)胞株（MKN-28-shNEUROG3），通過Real-timePCR和WB證實其NEUROG3的敲低情況（圖3A、B）。實驗觀察發(fā)現(xiàn)，MKN-28-sh-NEUROG3細(xì)胞變小，與Ctrl/MKN-28細(xì)胞相比，核細(xì)胞質(zhì)比例增加（圖3C），細(xì)胞生長增快。Real-timePCR檢測細(xì)胞分化抑制蛋白Id-1的表達(dá)增加（P<0.001，圖3D）。由此可見，NEUROG3在維持細(xì)胞分化中起重要作用，其表達(dá)下調(diào)可致去分化。A:Real-timePCR檢測胃癌細(xì)胞中NEUROG3mRNA的表達(dá)，a：P<0.01，與GES-1組比較；b：P<0.001，與GES-1組比較；B:Westernblot檢測胃癌細(xì)胞中NEUROG3蛋白的表達(dá)。圖2NEUROG3在不同胃細(xì)胞系中的表達(dá)情況Figure2TheexpressionofNEUROG3indifferentgastriccelllines

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文10A：Real-timePCR檢測胃癌細(xì)胞shNEUROG3/MKN-28中NEUROG3mRNA的表達(dá)，a：P<0.01，與對照組比較；B：Westernblot檢測胃癌細(xì)胞shNEUROG3/MKN-28中NEUROG3蛋白的表達(dá)；C：MKN-28細(xì)胞NEUROG3敲低后細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化；D：Real-timePCR檢測MKN-28細(xì)胞NEUROG3敲低后Id-1mRNA的表達(dá)，a：P<0.001，與對照組比較。圖3沉默NEUROG3基因表達(dá)導(dǎo)致胃癌細(xì)胞去分化Figure3.TheexpressionofthesilentNEUROG3geneleadstothededifferentiationofgastriccancercells2.2NEUROG3表達(dá)與胃癌臨床分期呈負(fù)相關(guān)進(jìn)一步評估NEUROG3和胃癌的臨床相關(guān)性（臨床病理特征與NEUROG3表達(dá)的關(guān)系總結(jié)在表1中），分析顯示，NEUROG3的表達(dá)差異與患者的性別、年齡和腫瘤大小無統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05，表1），而與是否存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（P<0.05，r=-0.180，表1）和TNM分期（P<0.001，r=-0.431，表2）呈負(fù)相關(guān)。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Characteristics of gastric cancer in Asia[J]. Rubayat Rahman,Akwi W Asombang,Jamal A Ibdah.  World Journal of Gastroenterology. 2014(16)



本文編號：3110720