研究目的:1.篩選小細(xì)胞肺癌干細(xì)胞與分化細(xì)胞差異表達(dá)的代謝相關(guān)基因。2.探究上述關(guān)鍵目的基因?qū)π〖?xì)胞肺癌能量代謝和順鉑敏感性的影響。3.探究上述關(guān)鍵目的基因?qū)π〖?xì)胞肺癌體內(nèi)移植瘤生長的影響。研究方法:1.課題組前期工作證明小細(xì)胞肺癌H446細(xì)胞系中的uPAR⁺細(xì)胞亞群富集了癌干細(xì)胞。本實(shí)驗(yàn)采用流式細(xì)胞分選技術(shù)從小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系H446細(xì)胞中分選出uPAR⁺細(xì)胞和uPAR^-細(xì)胞分別作為小細(xì)胞肺癌干細(xì)胞和分化細(xì)胞。2.通過全轉(zhuǎn)錄組測序分析初步篩選小細(xì)胞肺癌干細(xì)胞和分化細(xì)胞中差異表達(dá)的基因。3.通過GO分析和KEGG分析,根據(jù)代謝相關(guān)性以及差異倍數(shù)顯著性,進(jìn)一步篩選小細(xì)胞肺癌干細(xì)胞和分化細(xì)胞中差異表達(dá)的代謝相關(guān)基因。4.通過熒光定量PCR和ELISA實(shí)驗(yàn),課題組其他成員對上述代謝相關(guān)基因進(jìn)行驗(yàn)證并進(jìn)一步篩選目的基因。5.利用RNA干擾技術(shù)和目的基因的人重組蛋白,降低或升高目的基因的表達(dá)水平后,通過ATP實(shí)驗(yàn)分析目的基因?qū)π〖?xì)胞肺癌能量代謝的影響。通過MTS實(shí)驗(yàn)觀察細(xì)胞的存活情況,分析目的基因?qū)π〖?xì)胞肺癌順鉑敏感性的影響。6.通... 

【文章來源】：天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：71 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

SCLC細(xì)胞系H446干細(xì)胞和分化細(xì)胞中差異表達(dá)基因的GO富集分析

2 SCLC 細(xì)胞系 H446 干細(xì)胞和分化細(xì)胞中差異表達(dá)基因的 KEGG 富集 討論癌癥是當(dāng)今影響世界人類健康的致命性疾病，其中，肺癌的發(fā)病率也極胞肺癌（SCLC）是一種具有高度侵襲性的神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤，具有發(fā)展早和易復(fù)發(fā)等特點(diǎn)，其 5 年生存率較低。SCLC 對化療和放療的反應(yīng)相

圖 6A. NC-siRNA 和 IL-8-siRNA 處理兩周后的移植瘤。B. NC-siRNA 對照組和 IL-8-siRNA 實(shí)驗(yàn)組移植瘤的生長曲線。*P < 0.05。2.3 討論隨著對腫瘤研究的不斷深入，我們了解到很多腫瘤的發(fā)生發(fā)展機(jī)制，腫瘤的治療方法也在不斷進(jìn)步和改善。在過去幾十年里，化療和靶向治療已經(jīng)成為治療癌癥的主要方式，有些腫瘤可以得到有效的治療，但是，有些惡性腫瘤的治療依然面臨著很多挑戰(zhàn)。其中，腫瘤耐藥是較常見的一種現(xiàn)象，很多癌癥患者首次使用化療藥物治療效果尚佳，但是短期內(nèi)復(fù)發(fā)的可能性較大，最終導(dǎo)致治療失敗，減短了患者的生存時間，降低了患者的生活質(zhì)量。獲得性耐藥在腫瘤治療中是個特殊的問題和挑戰(zhàn)，因?yàn)槟[瘤細(xì)胞不僅對最初的化療藥物產(chǎn)生耐藥性，而且可能對具有不同作用機(jī)制的其他藥物產(chǎn)生交叉抗性。一般認(rèn)為化療耐藥會導(dǎo)致 90%以上的轉(zhuǎn)移癌患者治療失敗，產(chǎn)生耐藥的微轉(zhuǎn)移腫瘤細(xì)胞對輔


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