結(jié)腸癌是發(fā)病于消化道的一種惡性腫瘤,近幾年來(lái),全球范圍內(nèi)的發(fā)病率和死亡率居高不下,嚴(yán)重威脅著人類的生命健康安全。2019年國(guó)家癌癥中心公布的癌癥發(fā)病率中結(jié)腸癌排名第三,達(dá)到38.8%。目前結(jié)腸癌治療方式主要有手術(shù)切除、化學(xué)治療和中藥治療,它們對(duì)結(jié)腸癌患者的治療及康復(fù)有著重大的意義,但都存在一定的不足。手術(shù)治療對(duì)腸道損傷大;化學(xué)治療藥物易產(chǎn)生抗藥性,毒副作用大,中藥治療個(gè)體差異大;且均無(wú)預(yù)防結(jié)腸癌的功效。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn),益生菌可以黏附在腸道表面,形成一層致密的屏障,阻止病原菌的定殖,并可以結(jié)合致癌物質(zhì)排出體外,具有預(yù)防癌癥的作用。此外,益生菌的細(xì)胞壁肽聚糖成分和次級(jí)代謝產(chǎn)物胞外多糖可以通過(guò)激活細(xì)胞免疫系統(tǒng),增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬功能、增強(qiáng)NK細(xì)胞的殺傷活性、增強(qiáng)T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答反應(yīng)等,從而增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能,誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡,對(duì)癌癥的發(fā)生和發(fā)展有緩解作用。因此,開(kāi)發(fā)一種對(duì)人體副作用小,治療效果好,成本低、對(duì)結(jié)腸癌有預(yù)防和治療效果的功能性益生菌制劑有重要的臨床意義和應(yīng)用價(jià)值。而優(yōu)良菌株是制備益生菌制劑的關(guān)鍵前提,如何快速高效篩選益生菌優(yōu)良菌株成為當(dāng)下的研究熱點(diǎn)。胃液的酸性環(huán)境及小腸中的膽... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)科學(xué)院大學(xué)(中國(guó)科學(xué)院近代物理研究所)甘肅省

【文章頁(yè)數(shù)】：78 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

019年中國(guó)癌癥發(fā)病率統(tǒng)計(jì)

第2章JY菌株16SrDNA鑒定及其生物學(xué)特性研究15MRS瓊脂平板上，于超凈工作臺(tái)中放置30min自然晾干。將標(biāo)準(zhǔn)藥物紙片（諾氟沙星、頭孢拉定、氨芐西林、頭孢曲松）采用無(wú)菌鑷子夾取，貼于平板表面，置37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h后觀察其藥敏性。2.2.7數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)及分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS20.0進(jìn)行方差分析；P<0.05表示差異顯著；P<0.01表示差異極顯著。2.3結(jié)果與討論2.3.1JY菌株16SrDNA鑒定結(jié)果測(cè)序結(jié)果顯示，菌株JY的16SrDNAPCR產(chǎn)物片段為1439bp，將其16S序列進(jìn)行BLAST比對(duì)，發(fā)現(xiàn)JY菌株與干酪乳桿菌序列同源性為99.99%，因此，確定JY菌株為干酪乳桿菌。16SrDNA序列提交至GeneBank，獲得JY菌株NCBI登錄號(hào)為MN400655。進(jìn)化發(fā)育樹(shù)如圖2.1所示。圖2.1JY菌株種屬鑒定結(jié)果Figure2.1SpeciesidentificationofstrainJY2.3.2JY菌株生長(zhǎng)曲線、產(chǎn)酸曲線測(cè)定干酪乳桿菌JY各個(gè)時(shí)間段的生長(zhǎng)情況及產(chǎn)酸情況，結(jié)果如圖2.2所示。

重離子輻照誘變干酪乳桿菌優(yōu)良菌株選育及在抗結(jié)腸癌中的應(yīng)用16由圖2.2可知，JY菌株生長(zhǎng)迅速，在2h到達(dá)對(duì)數(shù)期，24h到達(dá)穩(wěn)定期，24h活菌數(shù)為1010CFU/mL，隨著JY菌株的生長(zhǎng)，產(chǎn)乳酸量不斷增加，pH值也隨之下降，進(jìn)入穩(wěn)定期后，pH值維持3.92在左右。JY菌株活菌數(shù)高，代謝產(chǎn)酸迅速，滿足益生菌的三大必要條件之一。圖2.2JY菌株生長(zhǎng)曲線及產(chǎn)酸情況Figure2.2TheresultsofgrowthcurveandacidproductionofJYstrain2.3.3JY菌株耐酸性、耐膽鹽性研究結(jié)果對(duì)干酪乳桿菌JY進(jìn)行不同pH值下的酸處理及不同濃度的膽鹽處理后存活情況如圖2.3、2.4所示。從圖2.3可以看出，JY菌株在不同pH的酸性培養(yǎng)基中仍然可以存活，且隨著pH值的下降，JY的活菌數(shù)減少，存活率降低。pH從2到7，JY活菌數(shù)依次為lg7.30CFU/mL、lg8.52CFU/mL、lg9.56CFU/mL、lg9.78CFU/mL、lg10.40CFU/mL、lg10.44CFU/mL，盧承蓉等(2020)人選用的乳酸菌株L15、L15U2-26在pH2.0的培養(yǎng)基中作用3h后沒(méi)有活菌生長(zhǎng)，相比之下，JY菌株在pH2.0的培養(yǎng)基中作用12h后其活菌數(shù)達(dá)到lg7.30CFU/mL，說(shuō)明JY菌株存在一定的酸耐受性。從圖2.4可以看出，JY菌株在不同濃度的膽鹽情況下，活菌數(shù)隨著膽鹽濃度的升高而降低。其在2.0%的膽鹽中仍能存活；0%-2.0%膽鹽中JY的活菌數(shù)分別為lg10.44CFU/mL、lg7.89

【參考文獻(xiàn)】：
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