目的:本研究回顧性分析了207例惡性胸腔積液患者的臨床特征資料,并探討應用循環(huán)腫瘤細胞的檢測方法檢測胸腔積液腫瘤細胞的臨床意義。方法:第一部分研究篩選陜西省腫瘤醫(yī)院2013年1月至2017年12月間住院的惡性胸腔積液患者的臨床資料進行回顧性分析;第二部分研究另外納入2018年1月至2019年12月就診陜西省腫瘤醫(yī)院的54例胸腔積液患者,分為兩組,惡性腫瘤組即脫落細胞學檢測或組織活檢證實為惡性胸腔積液患者,33例;良性對照組即符合臨床診斷為非惡性腫瘤相關疾病,或已經確診的良性疾病合并胸腔積液患者,21例。兩組均采集患者外周血及胸腔積液標本,使用CTCs檢測法檢測并比較腫瘤細胞含量。繪制CTCs檢測的ROC曲線,評價CTCs檢測法檢測胸腔積液腫瘤細胞的潛在應用價值。隨訪并記錄33例惡性腫瘤患者的生存信息,統(tǒng)計分析不同基線CTCs計數患者中位生存期的差異,評價該項檢測技術在預后預測方面的臨床意義。結果:1.207例惡性胸腔積液患者中,男116例,占56.0%;女91例,占44.0%;最大年齡82歲,最小年齡8歲,患者平均年齡（61.16±12.55）歲。原發(fā)腫瘤,肺癌137例,占66.1%,... 

【文章來源】：西安醫(yī)學院陜西省

【文章頁數】：61 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

MPE的發(fā)病機制（圖片來源：SpellaM,etal.JournalofThoracicDisease,2015,7(6):1009-1020）

西安醫(yī)學院臨床醫(yī)學碩士專業(yè)學位論文13中發(fā)現了與腫瘤細胞形態(tài)相似的一類細胞，將其命名為循環(huán)腫瘤細胞（CTCs），由于當時技術條件的限制，人們無法分離鑒定出活的CTCs。1976年，Nowell將CTCs的概念修正為—來自腫瘤原發(fā)部位或轉移灶，可脫離基底膜并入侵組織基質進入血管的一類腫瘤細胞。目前，CTCs是指存在于外周血中的各類腫瘤細胞的統(tǒng)稱。1989年，英國病理學家Paget在Ashworth理論的基礎上提出了特定組織器官的微環(huán)境（“土壤”）可影響特定腫瘤細胞（“種子”）的種植、侵襲、存活、生長，即著名的“種子和土壤”假說，此假說成功地揭示了腫瘤轉移的機理。但是，即便外周血中檢測到CTCs也并不代表腫瘤已經發(fā)生轉移，只有極小一部分能力強的CTCs逃避免疫系統(tǒng)識別后，侵入第二器官形成微轉移灶，CTCs才會發(fā)展成為腫瘤遠處轉移（見圖2）。因此，CTCs的形成被認為是腫瘤轉移的必要前提。圖2CTCs和腫瘤轉移（圖片來源：DanilaDC,etal.CancerJ.2011,17(6):438-450.）腫瘤周圍的微環(huán)境隨著腫瘤不斷生長而發(fā)生特殊改變，一些上皮來源的腫瘤細胞脫離原發(fā)灶進入血液循環(huán)后，通常需要經歷上皮-間質轉化（epithelialmesenchymaltransition，EMT）這一過程[37,38]。一般正常的上皮細胞通過黏附分子錨定在細胞外基質，并且細胞與細胞之間緊密相連，相對穩(wěn)定難以發(fā)生遷移，而間質細胞間很少有細胞連接，結構松散，且分散于細胞外基質中，易發(fā)生遷移。當腫瘤細胞發(fā)生侵襲和轉移時，細胞表型也隨即發(fā)生改變，逐漸喪失上皮細胞的表型，獲得一些間質細胞的表型，從而失去與細胞間的緊密連接及細胞外基質間的錨定，繼而穿透血管內皮進入外周血液循環(huán)，這一過程稱為EMT（見圖3）。EMT是上皮來源的腫瘤細胞

西安醫(yī)學院臨床醫(yī)學碩士專業(yè)學位論文18圖4CTCs的富集和鑒定技術。親和性富集法中靶向EpCAM蛋白的免疫磁性試劑是其中最常用的。非親和性的CTCs富集技術包括基于細胞大小和基于細胞密度的技術。而且，去除陰性細胞或腫瘤細胞侵襲力的技術也被采用。集合不同富集技術的策略也是可行的。使用腫瘤特異性標記抗體的免疫組化技術，或針對腫瘤特異性mRNA或DNA序列的PCR技術捕獲的腫瘤細胞可用來分析其分子特征。另一個方法是通過蛋白質分泌技術檢測可見的細胞，而且FISH技術可用來檢測腫瘤特異性基因異常。（圖片來源：JoosseSA,etal.EMBOMolMed.,2015,7(1):1-11.）2.4FR陽性CTCs的研究葉酸受體（folatereceptor，FR）是一種跨膜單鏈糖蛋白，目前已知FR有α、β、γ三種亞型。FRα、β、γ的信號肽中分別含有25、19、23個氨基酸殘基；FRα具有Asn-69、Asn-161、Asn-201三個潛在的N-糖基化位點，FRβ則具有Asn-99、Asn-179兩個糖基化位點。不同亞型的FR的組織特異性不同，FRα僅在極少數正常組織中低表達，而在上皮來源的惡性腫瘤細胞表面高表達，如卵巢癌、子宮內膜癌、肺癌等；FRβ在頭頸部鱗狀細胞癌及一些非上皮來源的腫瘤細胞表面高表達；FRγ在少數血液系統(tǒng)惡性腫瘤中過量表達。與其他腫瘤標記物相比,FR的優(yōu)勢不僅在于其配體葉酸易通過γ-羧基與其他分子結合,且不會降低其親和力，還能通過內吞作用有效地將葉酸及其偶合物運入細胞內。


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