第一部分:PRSS3-SPINKs-KLK5通路在肺腺癌增殖與轉(zhuǎn)移過程中的作用及機制探討目的:通過臨床、細胞生物學及生物信息學等相關研究方法探索PRSS3基因在肺腺癌增殖與侵襲轉(zhuǎn)移過程中的作用及機制。方法:我們采用生物信息學方法采集分析了多個基因芯片數(shù)據(jù)庫中肺腺癌PRSS3的表達水平,并分析了其與預后的關系。通過慢病毒shRNA感染技術敲低了肺腺癌細胞A549、HCC827及PC9中PRSS3基因的表達,并觀察對其增殖、侵襲遷移能力的影響;為明確PRSS3作用的下游信號通路,我們在PRSS3敲低的PC9細胞中收集無血清培養(yǎng)液,濃縮后Western Blot分析了濃縮培養(yǎng)液中SPINKs、KLK5及其下游蛋白的表達情況,并通過免疫共沉淀（Co-IP）分析在培養(yǎng)液中是否存在SPINKs與KLK5的結(jié)合。最后我們設計小鼠動物模型驗證PRSS3在肺腺癌發(fā)生發(fā)展中的作用,并探究Mesotrypsin（PRSS3的編碼蛋白）抑制劑對肺腺癌PC9細胞系增殖、遷移的影響。結(jié)果:Oncomine數(shù)據(jù)庫綜合分析結(jié)果顯示PRSS3的表達水平在肺腺癌中較正常肺肺組織中更高;同時K-Mplotter數(shù)據(jù)庫分析發(fā)... 

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前言
第一部分 PRSS3-SPINKs-KLK5通路在肺腺癌增殖與轉(zhuǎn)移過程中的作用及機制探討
    1 引言
    2 材料和方法
        2.1 細胞株
        2.2 實驗試劑與儀器材料
        2.3 實驗方法
        2.4 動物實驗
        2.5 統(tǒng)計方法
    3 結(jié)果
        3.1 PRSS3在肺腺癌和正常組織中表達及對預后的影響
        3.2 PRSS3在肺腺癌細胞系中的表達及細胞系篩選
        3.3 PRSS3基因沉默對三種肺腺癌細胞系表型的影響
        3.4 Mesotrypsin抑制劑對PC9肺腺癌細胞增殖及侵襲遷移的影響
        3.5 PRSS3影響肺腺癌細胞系PC9表型的下游信號通路研究
        3.6 活性Mesotrypsin作用對PC9細胞培養(yǎng)液中KLK5活性的影響
        3.7 KLK5引起PC9細胞表型變化的下游效應分子
        3.8 小鼠原位注射PRSS3敲低的肺腺癌PC9細胞動物模型驗證
    4 討論
    5 結(jié)論
    6 參考文獻
第二部分 PRSS3在肺鱗癌增殖與轉(zhuǎn)移過程中作用的初步探索
    1 引言
    2 材料和方法
        2.1 細胞株
        2.2 實驗試劑與儀器材料
        2.3 實驗方法
        2.4 統(tǒng)計方法
    3 結(jié)果
        3.1 PRSS3在肺鱗癌和正常組織中的表達比較
        3.2 PRSS3表達水平與肺鱗癌患者預后的關系
        3.3 篩選PRSS3高表達的肺鱗癌細胞系
        3.4 PRSS3基因沉默可降低對肺鱗癌侵襲遷移能力的影響
        3.5 PRSS3及KLK5基因沉默對SNAIL1及AKT/p-AKT水平的影響
    4 討論
    5 緒論
    6 參考文獻
全文總結(jié)
綜述
    參考文獻
作者簡歷


【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
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本文編號：3061610