背景:c-Myc原癌基因是Myc基因家族的主要成員之一,是骨髓性細胞白血病病毒的癌基因v-Myc的同類物,在8q24.12-8q24.13染色體上定位,該基因編碼產(chǎn)物為c-Myc蛋白。c-Myc蛋白是一個具有螺旋環(huán)螺旋/亮氨酸拉鏈的轉(zhuǎn)錄因子,它能夠調(diào)節(jié)細胞的增殖。c-Myc蛋白和Max蛋白可以在螺旋環(huán)螺旋/亮氨酸拉鏈處形成二聚體,c-Myc/Max復(fù)合物可以綁定DNA的E-box區(qū)（5’CANNTG 3’）,該區(qū)域一般是啟動子所在位置。在人類的很多腫瘤細胞中c-Myc蛋白均高表達,其原因是c-Myc基因發(fā)生了突變或是被大量轉(zhuǎn)錄。B-lineage acute lymphoblastic leukemia（B-ALL）是一種急性B淋巴瘤白血病,具有很強的增殖能力和侵染能力,c-Myc在該類疾病的發(fā)生在扮演著重要角色,但其治病機制尚不清楚。為了進一步闡述其致病機理,該實驗中我們用Raji細胞建立了c-Myc細胞沉默模型Raji-KD,發(fā)現(xiàn)c-Myc可以通過影響組蛋白乙�；D(zhuǎn)移酶TIP60,MOF的表達來影響組蛋白H₄的乙�；�,從而調(diào)節(jié)CDK1,cyclin B1的表達... 

【文章來源】：大連醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 c-Myc-siRNA Raji細胞沉默模型和恢復(fù)模型的構(gòu)建和鑒定
    材料和方法
        1.實驗材料
            1.1 實驗對象
            1.2 主要試劑
            1.3 主要儀器
            1.4 相關(guān)試劑配制
        2.實驗方法
            2.1 細胞培養(yǎng)
            2.2 c-Myc基因的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體包裝與沉默模型和恢復(fù)恢復(fù)模型構(gòu)建
                2.2.1 最佳干擾序列的篩選和病毒包裝
                2.2.2 Raji-KD細胞模型建立
                2.2.3 Raji-KD-Re細胞模型建立
            2.3 蛋白質(zhì)免疫印跡分析（western bloting）
            2.4 實時熒光定量PCR分析（Real-time PCR）
            2.5 抗體稀釋倍數(shù)
    結(jié)果
        （1）c-Myc最佳干擾序列的PCR檢測
        （2）pSINsi-hU6-c-Myc重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染Raji細胞
        （3）穩(wěn)定下調(diào)c-Myc表達單克隆及恢復(fù)c-Myc表達細胞株的鑒定
    討論
    結(jié)論
第二部分 c-Myc蛋白的低表達對Raji細胞增殖能力的影響
    材料和方法
        1.實驗材料
            1.1 實驗對象
            1.2 主要試劑
            1.3 主要儀器
            1.4 相關(guān)試劑配制
        2.實驗方法
            2.1 細胞活力測定（MTT、BrdU）
            2.2 動物實驗
    結(jié)果
        （1）MTT、BrdU檢測細胞活性及SCID小鼠體內(nèi)實體瘤的形成
    討論
    結(jié)論
第三部分 c-Myc蛋白的低表達對Raji細胞周期及細胞凋亡的影響
    材料和法
        1.實驗材料
            1.1 實驗對象
            1.2 主要試劑
            1.3 主要儀器
            1.4 相關(guān)試劑配制
        2.實驗方法
            2.1 細胞周期檢測
            2.2 細胞凋亡檢測
            2.3 免疫組化
    結(jié)果
        （1）c-Myc蛋白低表達對Raji-KD細胞周期影響
        （2）c-Myc蛋白低表達對Raji-KD細胞凋亡影響
    討論
    結(jié)論
第四部分 c-Myc通過組蛋白乙�；D(zhuǎn)移酶的表達影響細胞周期
    材料和方法
        1.實驗材料
            1.1 實驗對象
            1.2 主要試劑
            1.3 主要儀器
            1.4 相關(guān)試劑配制
        2.實驗方法
            2.1 實時熒光定量PCR分析
            2.2 染色體免疫共沉淀（ChIP）
    結(jié)果
        （1）c-Myc調(diào)控周期蛋白CDK1、cyclinB和乙酰基轉(zhuǎn)移酶Tip60
4的乙�；鹬芷诘鞍譪yclinB和CDK1等周期基因的變化">        （2） c-Myc通過組蛋白H₄的乙�；鹬芷诘鞍譪yclinB和CDK1等周期基因的變化
    討論
    結(jié)論
參考文獻
綜述 c-Myc與腫瘤的發(fā)生及其生物學(xué)功能
    參考文獻
攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況
致謝



本文編號：3053261