研究背景奧沙利鉑（oxaliplatin,OXA）作為第三代鉑類化療藥物,對(duì)結(jié)直腸癌、胰腺癌、肺癌等多種實(shí)體腫瘤均有療效。但應(yīng)用奧沙利鉑的患者85%～95%會(huì)出現(xiàn)相關(guān)的周圍神經(jīng)病變,臨床表現(xiàn)主要為末梢感覺麻木、痛覺過敏或超敏、“套襪樣”感覺異常。冷刺激可加重其神經(jīng)癥狀,并且具有明顯的劑量依賴性和時(shí)間依賴性,往往因嚴(yán)重的神經(jīng)性病變?cè)斐蓨W沙利鉑治療的中斷,影響患者的治療效果,甚至縮短生存時(shí)間。因此,探究奧沙利鉑誘導(dǎo)的周圍神經(jīng)病變的分子機(jī)制,對(duì)減輕或避免奧沙利鉑治療所產(chǎn)生的神經(jīng)毒性作用具有重要的指導(dǎo)意義。有研究表明,奧沙利鉑對(duì)周圍神經(jīng)的損傷比對(duì)中樞的損傷更為明顯,因此探索背根神經(jīng)節(jié)離子通道改變及受損的分子機(jī)制,是揭示周圍神經(jīng)損傷后興奮性改變的基礎(chǔ)。電壓門控鉀離子通道是參與神經(jīng)元興奮性改變的重要離子通道之一,通過維持靜息膜電位和控制動(dòng)作電位放電參與神經(jīng)元興奮性的調(diào)節(jié)。在奧沙利鉑誘導(dǎo)的周圍神經(jīng)損傷動(dòng)物模型中,電壓門控鉀離子通道1.2（Kv1.2）的蛋白表達(dá)減少,引起神經(jīng)元興奮性增加,然而對(duì)靶向kv1.2分子調(diào)控機(jī)制仍知之甚少。表觀遺傳學(xué)指基于非基因序列改變所致的基因表達(dá)水平的變化,可調(diào)控基因的表... 

【文章來源】：鄭州大學(xué)河南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：109 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略詞簡表
前言
第一部分 建立奧沙利鉑化療痛模型并檢測Kv1.2的表達(dá)變化
    引言
    1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與材料
        1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.1.2 動(dòng)物麻醉
        1.1.3 實(shí)驗(yàn)分組
        1.1.4 實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備與試劑耗材
    1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        1.2.1 奧沙利鉑誘導(dǎo)化療痛模型的建立
        1.2.2 行為學(xué)檢測化療痛模型的建立
        1.2.3 Western-blot檢測kv1.2的蛋白表達(dá)
        1.2.4 RT-qPCR檢測鉀離子通道的mRNA表達(dá)
        1.2.5 免疫熒光檢測kv1.2在DRG神經(jīng)元形態(tài)分布
    1.3 數(shù)據(jù)分析
    1.4 結(jié)果
        1.4.1 奧沙利鉑可以誘導(dǎo)大鼠產(chǎn)生痛行為學(xué)
        1.4.2 奧沙利鉑化療痛模型中不同亞型鉀離子通道m(xù)RNA表達(dá)水平變化
        1.4.3 Kv1.2與DRG不同類型神經(jīng)元共標(biāo)
        1.4.4 建模后不同時(shí)間點(diǎn)DRG神經(jīng)元Kv1.2的陽性細(xì)胞
        1.4.5 大鼠奧沙利鉑誘導(dǎo)的化療痛模型中Kv1.2的蛋白和mRNA表達(dá)降低
    1.5 討論
    1.6 小結(jié)
第二部分 TET1的下調(diào)可能參與奧沙利鉑誘導(dǎo)的化療痛
    引言
    2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.1.2 動(dòng)物麻醉
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)分組
        2.1.4 實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 奧沙利鉑誘導(dǎo)化療痛模型的建立
        2.2.2 行為學(xué)檢測化療痛模型的建立
        2.2.3 DRG顯微注射敲除TET1-loxp轉(zhuǎn)基因小鼠DRG中TET1的基因
        2.2.4 Western-blot檢測TET1的蛋白表達(dá)
        2.2.5 qRT-PCR檢測TET1的mRNA表達(dá)
        2.2.6 免疫熒光檢測TET1在DRG神經(jīng)元形態(tài)分布
    2.3 數(shù)據(jù)分析
    2.4 結(jié)果
        2.4.1 TET1與DRG不同類型神經(jīng)元共標(biāo)
        2.4.2 建模后不同時(shí)間點(diǎn)DRG神經(jīng)元TET1的陽性細(xì)胞
        2.4.3 大鼠奧沙利鉑誘導(dǎo)的化療痛模型中TET1蛋白和mRNA的表達(dá)變化
        2.4.4 TET1-loxp轉(zhuǎn)基因鼠的疼痛行為學(xué)和基因表達(dá)變化
    2.5 討論
    2.6 小結(jié)
第三部分 TET1通過下調(diào)kv1.2緩解奧沙利鉑誘導(dǎo)的神經(jīng)病理性疼痛
    引言
    3.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與材料
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        3.1.2 動(dòng)物麻醉
        3.1.3 實(shí)驗(yàn)分組
        3.1.4 實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 奧沙利鉑誘導(dǎo)的化療痛模型的建立
        3.2.2 行為學(xué)檢測化療痛模型的建立以及過表達(dá)TET1后對(duì)動(dòng)物痛敏的影響
        3.2.3 DRG顯微注射TET1-Lv,過表達(dá)DRG神經(jīng)元TET1基因
        3.2.4 Western-blot檢測kv1.2和TET1的蛋白表達(dá)
        3.2.5 qRT-PCR檢測kv1.2和TET1的mRNA表達(dá)
        3.2.6 免疫熒光檢測kv1.2和TET1在DRG神經(jīng)元的共定位
    3.3 數(shù)據(jù)分析
    3.4 結(jié)果
        3.4.1 Kv1.2與TET1免疫熒光雙標(biāo)
        3.4.2 大鼠先給予TET1-Lv,再建立奧沙利鉑化療痛模型,對(duì)大鼠行為學(xué)以及分子水平的影響
        3.4.3 大鼠先建立化療痛模型,再給予TET1-Lv,可以緩解奧沙利鉑誘導(dǎo)的行為學(xué)變化
        3.4.4 小鼠給予TET1-Lv,對(duì)行為以及基因表達(dá)的影響
    3.5 討論
    3.6 小結(jié)
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
綜述 慢性神經(jīng)病理性疼痛的表觀遺傳學(xué)機(jī)制
    參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡歷
致謝



本文編號(hào)：3052199