目的:胃癌是消化系統(tǒng)最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一,每年全球約有超過(guò)100萬(wàn)的新發(fā)病例以及80萬(wàn)的死亡病例。目前,手術(shù)聯(lián)合放化療、免疫治療以及靶向治療仍然是胃癌治療的有效手段,但由于腫瘤早期癥狀不典型且我國(guó)居民體檢意識(shí)相對(duì)較弱,我國(guó)的早期胃癌檢出率較低。因此,發(fā)現(xiàn)并揭示胃癌的特異性標(biāo)記物及有效治療靶點(diǎn)對(duì)疾病的診治具有深遠(yuǎn)的意義。研究證實(shí)人類基因組中有98%的基因不具備編碼蛋白的能力,因此被稱為非編碼基因。長(zhǎng)鏈非編碼RNA（long non-coding RNA,lncRNA）是指一類長(zhǎng)度大于200個(gè)核苷酸且不具有開放閱讀框的轉(zhuǎn)錄本。近年來(lái),圍繞lncRNA在胃癌中的作用及機(jī)制研究已成為學(xué)術(shù)熱點(diǎn),大量研究報(bào)道lncRNA可影響腫瘤的增殖、侵襲、遷移以及凋亡等表型變化。我們通過(guò)分析TCGA（The Cancer Genome Atlas）數(shù)據(jù)庫(kù)發(fā)現(xiàn)lncRNA DLX6-AS1在胃癌中過(guò)表達(dá)并與預(yù)后相關(guān)。DLX6-AS1是長(zhǎng)度為1990bp的轉(zhuǎn)錄組,位于7q21.3染色體上。已有學(xué)者報(bào)道DLX6-AS1在肝癌、骨巨細(xì)胞瘤、前列腺癌、肺癌、卵巢癌中過(guò)表達(dá)并起促癌作用。盡管如此,DLX6-AS1在胃癌中... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁(yè)數(shù)】：124 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

DLX6-AS1在TCGA數(shù)據(jù)庫(kù)的胃癌組織中呈高表達(dá)且與預(yù)后相關(guān)

為進(jìn)一步驗(yàn)證TCGA數(shù)據(jù)庫(kù)中的高通量結(jié)果,我們通過(guò)qRT-PCR實(shí)驗(yàn)檢測(cè)56組胃癌及對(duì)應(yīng)癌旁非癌組織的DLX6-AS1表達(dá)水平。如圖1.2A所示,DLX6-AS1在胃癌組織的表達(dá)水平顯著高于癌旁組織,此結(jié)果也與TCGA數(shù)據(jù)庫(kù)的高通量數(shù)據(jù)結(jié)果相一致。我們檢測(cè)了DLX6-AS1在胃癌細(xì)胞系和胃正常粘膜上皮細(xì)胞中的表達(dá)水平以進(jìn)一步闡釋DLX6-AS1在胃癌中的功能及作用機(jī)制。將GES-1的表達(dá)水平作為標(biāo)準(zhǔn)組,胃癌細(xì)胞系中DLX6-AS1均呈過(guò)表達(dá),且SGC-7901和AGS細(xì)胞系的表達(dá)水平最高(圖1.2B)。3.3 DLX6-AS1的表達(dá)水平與臨床病理資料的關(guān)系

為進(jìn)一步證實(shí)DLX6-AS1在胃癌發(fā)生發(fā)展中的作用,我們通過(guò)轉(zhuǎn)染siRNA-DLX6-AS1下調(diào)胃癌細(xì)胞系中DLX6-AS1的表達(dá)水平,并通過(guò)qRT-PCR實(shí)驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證。如圖2.1所示,轉(zhuǎn)染siRNA-DLX6-AS1后可有效下調(diào)DLX6-AS1在胃癌細(xì)胞系SGC-7901和AGS中的表達(dá)水平。由于si-DLX6-AS1#2和si-DLX6-AS1#3的轉(zhuǎn)染效率最高,因此我們選擇這兩對(duì)序列進(jìn)行后續(xù)的細(xì)胞功能實(shí)驗(yàn)和機(jī)制研究。CCK8實(shí)驗(yàn)可以檢測(cè)細(xì)胞的增殖能力。如圖2.2A所示,與對(duì)照組相比,敲除DLX6-AS1后SGC-7901和AGS細(xì)胞系的增殖能力明顯下降�？寺⌒纬蓪�(shí)驗(yàn)也進(jìn)一步證實(shí),DLX6-AS1可促進(jìn)胃癌細(xì)胞的增殖(圖2.2B)。應(yīng)用Transwell實(shí)驗(yàn)可進(jìn)一步驗(yàn)證細(xì)胞的遷移和侵襲能力。如圖2.2C所示,沉默DLX6-AS1后可顯著抑制胃癌細(xì)胞的遷移和侵襲功能。

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號(hào)：3020896