肝癌是全球第五大致死性癌癥疾病,其發(fā)病率和死亡率已有逐漸上升趨勢(shì)。近年來(lái)的研究發(fā)現(xiàn)肝臟的慢性炎癥與肝癌的發(fā)生、進(jìn)展及預(yù)后有密切聯(lián)系。病毒、細(xì)菌等致病性病原微生物一旦入侵機(jī)體,將迅速啟動(dòng)機(jī)體天然免疫應(yīng)答并觸發(fā)炎癥性反應(yīng)。天然免疫是抗病原體感染的第一道防御屏障,引發(fā)炎癥和對(duì)感染的抵抗,其反應(yīng)反復(fù)持續(xù)會(huì)造成慢性炎癥甚至可能引發(fā)癌癥。研究發(fā)現(xiàn)NLRs（nucleotide-binding oligomerization domain-like receptors）家族成員,如NOD1、NOD2、NLRP1、NLRP3、NLRP7及NLRP12等,通過(guò)調(diào)控多種信號(hào)通路參與腫瘤尤其是胃腸道腫瘤的發(fā)生發(fā)展。NLRC5（NLR family,CARD domain containing 5）是最新發(fā)現(xiàn)的NOD樣受體（NOD like receptors,NLRs）家族成員之一,參與機(jī)體天然免疫應(yīng)答和抗病原體感染,可能在短期內(nèi)誘發(fā)急性炎癥反應(yīng)或抗炎反應(yīng),而長(zhǎng)期作用引發(fā)免疫調(diào)控功能失衡,可能與癌癥的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。NLRC5可能在肝癌的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中起著重要作用。研究表明Wnt/β-catenin信號(hào)通路激... 

【文章來(lái)源】：安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

【文章頁(yè)數(shù)】：90 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
英文縮略詞
中文摘要
英文摘要
1 前言
2 實(shí)驗(yàn)材料
    2.1 儀器與設(shè)備
    2.2 藥品與試劑
    2.3 肝臟組織、細(xì)胞株、菌株及質(zhì)粒
3 實(shí)驗(yàn)方法
    3.1 免疫組織化學(xué)SP染色
    3.2 人源NLRC5重組質(zhì)粒的構(gòu)建
TM 2000試劑瞬時(shí)轉(zhuǎn)染siRNA進(jìn)入細(xì)胞">    3.3 Lipofectamin^TM 2000試劑瞬時(shí)轉(zhuǎn)染siRNA進(jìn)入細(xì)胞
TM 2000試劑瞬時(shí)轉(zhuǎn)染NLRC5重組質(zhì)粒進(jìn)入細(xì)胞">    3.4 Lipofectamin^TM 2000試劑瞬時(shí)轉(zhuǎn)染NLRC5重組質(zhì)粒進(jìn)入細(xì)胞
    3.5 q RT-PCR法檢測(cè)m RNA表達(dá)
    3.6 Western blot法檢測(cè)蛋白表達(dá)
    3.7 MTT細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)
    3.8 流式細(xì)胞儀檢測(cè)檢測(cè)細(xì)胞周期
    3.9 腫瘤細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)
    3.10 Transwell腫瘤細(xì)胞遷移與侵襲實(shí)驗(yàn)
    3.11 數(shù)據(jù)處理
4. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4.1 NLRC5在肝臟組織和細(xì)胞中的蛋白變化
        4.1.1 人肝組織中NLRC5蛋白表達(dá)
        4.1.2 正常肝細(xì)胞和肝癌細(xì)胞中的NLRC5蛋白表達(dá)
    4.2 NLRC5對(duì)肝癌細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲的影響
        4.2.1 過(guò)表達(dá)NLRC5對(duì)肝癌細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲能力的影響
        4.2.2 沉默NLRC5對(duì)肝癌細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲能力的影響
    4.3 NLRC5對(duì)Wnt/β-catenin信號(hào)通路的影響
        4.3.1 正常肝細(xì)胞和肝癌細(xì)胞中Wnt/β-catenin信號(hào)通路表達(dá)情況
        4.3.2 過(guò)表達(dá)NLRC5對(duì) β-catenin mRNA和蛋白表達(dá)的影響
        4.3.3 沉默NLRC5對(duì) β-catenin m RNA和蛋白表達(dá)的影響
        4.3.4 過(guò)表達(dá)NLRC5對(duì)Cyclin D1、C-myc和MMP-7 蛋白表達(dá)的影響
        4.3.5 沉默NLRC5對(duì)Cyclin D1、C-myc和MMP-7 蛋白表達(dá)的影響
        4.3.6 β-catenin 抑制劑 iCRT3 對(duì) BEL-7402 肝癌細(xì)胞增殖的影響
        4.3.7 β-catenin 抑制劑 iCRT3 對(duì)肝癌細(xì)胞 BEL-7402 遷移能力的影響
        4.3.8 iCRT3對(duì)肝癌細(xì)胞BEL-7402中 β-catenin、Cyclin D1、C-myc和MMP-7 蛋白表達(dá)的影響
5.討論
6.結(jié)論
7.參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
Functions of NLRC5 in immunity and inflammation
    REFERENCES



本文編號(hào)：3018587