目的:環(huán)狀RNA（circRNA）是一類由5’和3’末端共價連接形成的環(huán)狀RNA分子,研究表明其在人類癌癥中起著重要的調控作用,但circRNA在胃癌中的相關研究仍鮮少報道。本研究發(fā)現(xiàn)FND3B環(huán)狀RNA（circFNDC3B）表達水平在胃癌組織中下降,提示circFNDC3B在胃癌發(fā)生發(fā)展過程中可能發(fā)揮著重要的作用。因此,本文以兩種具有不同的circFNDC3B表達水平的胃癌細胞為主要的研究對象來探索circFNDC3B在胃癌發(fā)生發(fā)展過程中的作用與分子機制。方法:首先,利用qRT-PCR驗證circFNDC3B在胃癌臨床樣本和胃癌細胞系中的表達水平;其次,采用無縫克隆技術構建circFNDC3B過表達載體和siRNA技術分別對MGC-803細胞和BGC-823細胞進行circFNDC3B表達水平的介入干擾,再通過一系列western blot、劃痕實驗、transwell實驗和qRT-PCR等實驗對circFNDC3B在胃癌細胞中的表型和功能作用進行探究;最后,采用RNA結合蛋白免疫沉淀分析（RIP）和RNApull-down實驗分析證實circFNDC3B與IGF2BP3、CD44... 

【文章來源】：廈門大學福建省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．?ｃｉｒｃＲＮＡｓ生物合成模型

雙鏈ＲＮＡ通過解鎖莖環(huán)結構以拮抗ｃｉｒｃＲＮＡｓ的生物發(fā)生［１８］。隨著探索ｃｉｒｃＲＮＡｓ??生物合成的持續(xù)進展，張等人提出了類似于可變剪接的可變環(huán)化模型以系統(tǒng)性地??解釋ｃｉｒｃＲＮＡｓ的生成機制［７］（如圖２所示）。在ＲＮＡ配對過程中，重復或非重??復的側翼內含子互補序列的競爭會影響剪接選擇和外顯子環(huán)化，且橫跨于側翼內??含子的互補序列可明顯促進外顯子的環(huán)化。反向互補序列可以導致多個ｃｉｒｃＲＮＡｓ??來源于同一個基因的轉錄本。由于互補序列在不同物種間的分布不同，可變環(huán)化??可導致物種之間的特異性環(huán)化�；パa序列的存在可促進轉錄本通過可變環(huán)化形成??ｃｉｒｃＲＮＡｓ，但互補序列對于外顯子環(huán)化來說是必要但不充分條件［７］，這個模型暗??示可變環(huán)化的復雜性和ｃｉｒｃＲＮＡｓ的多樣性，且一定程度上可能受其他因素的影??響，如ＲＢＰｓ正向或負向調控ｃｉｒｃＲＮＡｓ的形成［５］。??２??

利用ｑＲＴ－ＰＣＲ檢測５種胃癌細胞系（ＧＥＳ－ｌ，ＡＧＳ，ＳＧＣ－７９０１，??ＭＧＣ－８０３，?ＢＧＣ－８２３）中?ｃｉｒｃＦＮＤＣ３Ｂ?表達水平的差異，發(fā)現(xiàn)?ｃｉｒｃＦＮＤＣ３Ｂ?的表??達水平在不同細胞系中呈現(xiàn)出不同的表達水平，結果如圖３．２所示。ＳＧＣ－７９０１??細胞和ＭＧＣ－８０３細胞中ｃｉｒｃＦＮＤＣ３Ｂ的表達水平明顯低于ＧＥＳ－１細胞（正常胃??粘膜細胞系），分別為ｐ＜〇．〇〇〇ｌ和Ｐ＝〇．〇〇３２，但ＢＧＣ－８２３細胞的表達水平卻明??顯高于ＧＥＳ－１細胞（ｐ＝０．０００７）。此外，本文還分析了每個細胞系中的ＦＮＤＣ３Ｂ??ｍＲＮＡ的表達水平，結果顯示在ＭＧＣ－８０３細胞中ＦＮＤＣ３Ｂ?ｍＲＮＡ明顯增加??３２??

【參考文獻】：
期刊論文
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