乳腺癌腦轉移細胞靶向肽BRBP1結合相關蛋白分子的鑒定
發(fā)布時間:2021-01-06 18:53
乳腺癌(breast cancer)嚴重威脅女性的健康與生命。乳腺癌轉移至骨、腦、肺等器官增加了乳腺癌的治療難度,也降低了患者的生存質量。乳腺癌腦轉移(breast cancer brain metastases,BCBM)患者的中位生存時間短,確診BCBM后一年內死亡率約為80%,即使很小的損傷也可能會導致神經功能病變,影響生活質量。研究乳腺癌腦轉移的機制、尋找乳腺癌細胞膜表面與腦轉移有關的靶蛋白,對乳腺癌腦轉移的早期診斷及治療具有重要意義。本實驗室前期通過噬菌體展示肽庫篩選技術(Phage display technology)進行全細胞消減篩選,獲得能與人乳腺癌專一性腦轉移細胞系231-BR結合的多肽,命名為BRBP1(專利號:ZL201210538671.4),體內體外實驗均證明該肽與231-BR細胞呈特異性結合;臨床乳腺癌病理切片結果也顯示BRBP1肽與人乳腺浸潤性導管癌組織標本特異性結合且傾向結合高轉移潛能的腫瘤細胞。因此,尋找與BRBP1肽結合的靶蛋白,對探索乳腺癌腦轉移的作用機制,深度認識及拓寬BRBP1肽的應用價值有重要意義。本實驗室前期真核表達BRBP1-Fc肽體,...
【文章來源】:東南大學江蘇省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:101 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
人乳腺癌細胞中MVPmRNA的表達(a)MVP溶解曲線;(b)MVP分子mRNA在231-BR、MDA-MB-231、MCF-7細胞中的表達
第二章 乳腺癌細胞靶向肽 BRBP1 與 MVP 分子相關性的鑒定我們通過 Western blot、細胞免疫熒光實驗、流式細胞術驗證 MVP 在人乳腺癌細胞 231-BR、MDA-MB-231、MCF-7 細胞中的表達。如圖(2-2、2-3、2-4)結果顯示,MVP 在 231-BR、MDA-MB-231 中均有表達且在 231-BR 細胞中表達程度高于 MDA-MB-231 細胞,在 MCF-7 中低表達,流式實驗結果進一步顯示MVP 蛋白在 231-BR、MDA-MB231 和 MCF-7 細胞表面的表達分別為 73.86%、57.29%和 32.71%,與 mRNA 檢測結果一致,符合 BRBP1 期望靶蛋白的分布情況。因此,我們后續(xù)將干擾 MVP 分子在 231-BR 細胞中的表達,以期驗證 MVP是否為 BRBP1 的靶蛋白。
細胞免疫熒光驗證MVP分子在231-BR、MDA-MB-231、MCF-7細胞的表達
【參考文獻】:
期刊論文
[1]Cancer incidence and mortality in China, 2014[J]. Wanqing Chen,Kexin Sun,Rongshou Zheng,Hongmei Zeng,Siwei Zhang,Changfa Xia,Zhixun Yang,He Li,Xiaonong Zou,Jie He. Chinese Journal of Cancer Research. 2018(01)
[2]乳腺癌腦轉移細胞系靶向肽體的表達與特異性鑒定[J]. 楊姣姣,張瑩,沈宇清,王潔,付波,張建瓊. 東南大學學報(醫(yī)學版). 2016(03)
[3]腫瘤歸巢肽的研究進展[J]. 朱蕾蕾,任建麗,周志益. 腫瘤. 2016(05)
[4]體內示蹤技術評價噬菌體展示肽GX1特異靶向胃癌新生血管[J]. 惠曉麗,梁樹輝,劉洋,劉驚濤,吳開春. 現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學. 2015(14)
[5]受體-配體結合的質譜分析方法研究進展[J]. 孔愛英,喬晉萍,武仙英,鄧艾芳. 中國藥學雜志. 2013(15)
[6]Affinity peptide developed by phage display selection for targeting gastric cancer[J]. Arun Budha,Thomas D Wang. World Journal of Gastroenterology. 2012(17)
[7]蛋白質分子的結構與功能[J]. 徐國恒. 生物學通報. 2010(03)
[8]RGD肽與整合素αvβ3受體結合的構效關系及放射性標記配體的設計[J]. 張春麗,楊銘,王榮福. 腫瘤學雜志. 2009(01)
[9]應用免疫沉淀-質譜法篩選腫瘤血管靶向肽CGNSNPKSC的結合受體[J]. 賀莉,吳開春,惠曉莉,陳瑜,梁樹輝,陳蓓,曹姍姍,閆堃,韓宇,姚芳芳,楊利萍,韓英,樊代明. 現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學. 2008(08)
[10]T7噬菌體展示技術篩選丙型肝炎病毒非結構蛋白3的相互作用蛋白[J]. 黃英,蔡雪飛,何茂銳,張君,黃愛龍. 中華肝臟病雜志. 2006(08)
本文編號:2961086
【文章來源】:東南大學江蘇省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:101 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
人乳腺癌細胞中MVPmRNA的表達(a)MVP溶解曲線;(b)MVP分子mRNA在231-BR、MDA-MB-231、MCF-7細胞中的表達
第二章 乳腺癌細胞靶向肽 BRBP1 與 MVP 分子相關性的鑒定我們通過 Western blot、細胞免疫熒光實驗、流式細胞術驗證 MVP 在人乳腺癌細胞 231-BR、MDA-MB-231、MCF-7 細胞中的表達。如圖(2-2、2-3、2-4)結果顯示,MVP 在 231-BR、MDA-MB-231 中均有表達且在 231-BR 細胞中表達程度高于 MDA-MB-231 細胞,在 MCF-7 中低表達,流式實驗結果進一步顯示MVP 蛋白在 231-BR、MDA-MB231 和 MCF-7 細胞表面的表達分別為 73.86%、57.29%和 32.71%,與 mRNA 檢測結果一致,符合 BRBP1 期望靶蛋白的分布情況。因此,我們后續(xù)將干擾 MVP 分子在 231-BR 細胞中的表達,以期驗證 MVP是否為 BRBP1 的靶蛋白。
細胞免疫熒光驗證MVP分子在231-BR、MDA-MB-231、MCF-7細胞的表達
【參考文獻】:
期刊論文
[1]Cancer incidence and mortality in China, 2014[J]. Wanqing Chen,Kexin Sun,Rongshou Zheng,Hongmei Zeng,Siwei Zhang,Changfa Xia,Zhixun Yang,He Li,Xiaonong Zou,Jie He. Chinese Journal of Cancer Research. 2018(01)
[2]乳腺癌腦轉移細胞系靶向肽體的表達與特異性鑒定[J]. 楊姣姣,張瑩,沈宇清,王潔,付波,張建瓊. 東南大學學報(醫(yī)學版). 2016(03)
[3]腫瘤歸巢肽的研究進展[J]. 朱蕾蕾,任建麗,周志益. 腫瘤. 2016(05)
[4]體內示蹤技術評價噬菌體展示肽GX1特異靶向胃癌新生血管[J]. 惠曉麗,梁樹輝,劉洋,劉驚濤,吳開春. 現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學. 2015(14)
[5]受體-配體結合的質譜分析方法研究進展[J]. 孔愛英,喬晉萍,武仙英,鄧艾芳. 中國藥學雜志. 2013(15)
[6]Affinity peptide developed by phage display selection for targeting gastric cancer[J]. Arun Budha,Thomas D Wang. World Journal of Gastroenterology. 2012(17)
[7]蛋白質分子的結構與功能[J]. 徐國恒. 生物學通報. 2010(03)
[8]RGD肽與整合素αvβ3受體結合的構效關系及放射性標記配體的設計[J]. 張春麗,楊銘,王榮福. 腫瘤學雜志. 2009(01)
[9]應用免疫沉淀-質譜法篩選腫瘤血管靶向肽CGNSNPKSC的結合受體[J]. 賀莉,吳開春,惠曉莉,陳瑜,梁樹輝,陳蓓,曹姍姍,閆堃,韓宇,姚芳芳,楊利萍,韓英,樊代明. 現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學. 2008(08)
[10]T7噬菌體展示技術篩選丙型肝炎病毒非結構蛋白3的相互作用蛋白[J]. 黃英,蔡雪飛,何茂銳,張君,黃愛龍. 中華肝臟病雜志. 2006(08)
本文編號:2961086
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