mTORC2/mTORC1抑制劑誘導骨髓增生異常綜合征/白血病細胞發(fā)生自噬性死亡及作用機制研究
發(fā)布時間:2020-12-28 13:35
第一部分mTORC2/mTORCl抑制劑誘導MDS/AML細胞發(fā)生自噬性死亡目的:探索mTORC1/mTORC2抑制劑對骨髓增生異常綜合征轉(zhuǎn)化急性髓系白血。∕DS/AML)細胞增殖的影響,并從凋亡和自噬兩方面進一步探討抑制細胞增殖的作用機制。方法:本研究以人骨髓增生異常綜合征(MDS)轉(zhuǎn)化的急性髓系白血病細胞株SKM-1細胞株為研究對象,采用CCK-8法檢測不同濃度的雷帕霉素和mTORC2/mTORC1抑制劑OSI-027分別作用于SKM-1細胞后檢測其細胞活性,流式細胞術檢測對細胞周期的影響;采用Annexin V-FITC/PI雙染法流式細胞術檢測凋亡細胞比例,進一步利用Western-blot法檢測PARP蛋白的活性分析來驗證細胞是否發(fā)生凋亡;利用透射電鏡觀察細胞內(nèi)自噬泡及自噬小體;吖啶橙染色法流式檢測酸性自噬泡數(shù)量;利用自噬抑制劑氯喹聯(lián)合OSI-027處理細胞后用Annexin V-FITC/PI流式檢測細胞凋亡比例和CCK-8法檢測增殖活性;RT-PCR法檢測自噬相關基因Beclin-1和LC3B的mRNA表達量;Western-blot法檢測Beclin-1和LC3的蛋白...
【文章來源】:華中科技大學湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:86 頁
【學位級別】:博士
【文章目錄】:
英文縮略詞簡表
中文摘要
Abstract
前言
參考文獻
第一部分 mTORC2/mTORC1抑制劑誘導MDS/AML細胞發(fā)生自噬性死亡
實驗材料和方法
實驗結(jié)果
討論
參考文獻
第二部分 mTORC2/mTORC1抑制劑誘導MDS/AML細胞發(fā)生自噬性死亡的機制研究
實驗材料和方法
實驗結(jié)果
討論
參考文獻
綜述
參考文獻
致謝
附錄
【參考文獻】:
期刊論文
[1]自噬相關基因Beclin1在骨髓增生異常綜合征中的表達及其意義[J]. 萬紹媛,張日,王元元,岑建農(nóng),周潔,楊翼,江鳳,陳子興. 中國實驗血液學雜志. 2013(04)
本文編號:2943843
【文章來源】:華中科技大學湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:86 頁
【學位級別】:博士
【文章目錄】:
英文縮略詞簡表
中文摘要
Abstract
前言
參考文獻
第一部分 mTORC2/mTORC1抑制劑誘導MDS/AML細胞發(fā)生自噬性死亡
實驗材料和方法
實驗結(jié)果
討論
參考文獻
第二部分 mTORC2/mTORC1抑制劑誘導MDS/AML細胞發(fā)生自噬性死亡的機制研究
實驗材料和方法
實驗結(jié)果
討論
參考文獻
綜述
參考文獻
致謝
附錄
【參考文獻】:
期刊論文
[1]自噬相關基因Beclin1在骨髓增生異常綜合征中的表達及其意義[J]. 萬紹媛,張日,王元元,岑建農(nóng),周潔,楊翼,江鳳,陳子興. 中國實驗血液學雜志. 2013(04)
本文編號:2943843
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