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乳腺癌MCF-7細(xì)胞p21 WAF1/CIP1 啟動(dòng)子區(qū)HDAC1高功能結(jié)合位點(diǎn)的研究

發(fā)布時(shí)間:2020-12-26 04:30
  目的研究乳腺癌MCF-7細(xì)胞中組蛋白去乙酰化酶1(histone deacetylases 1,HDAC1)募集于p21WAF1/CIP1啟動(dòng)子區(qū)調(diào)控其轉(zhuǎn)錄活性的特異性結(jié)合位點(diǎn)。方法將處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的乳腺癌MCF-7細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基中饑餓24 h后,分別用20μmol·L-10.88μL SAHA(S組)、0.625 nmol·L-110μL Leptin(L組)處理24 h,對(duì)照組(B組)細(xì)胞培養(yǎng)在完全型RPMI 1640培養(yǎng)基中。各組細(xì)胞裂解液與HDAC1抗體孵育,收集純化結(jié)合HDAC1抗體的DNA片段,應(yīng)用Realtime PCR法檢測(cè)p21WAF1/CIP1啟動(dòng)子區(qū)從TSS到其上游(+2-4 000 bp)f1f10片段的DNA相對(duì)表達(dá)量并用2-ΔΔCT法分析。結(jié)果 B組中,HDAC1抗體在p21WAF1/CIP1啟動(dòng)子區(qū)f1、f8片段有高親和力,f8片段達(dá)最高。S組中,HDAC1抗體與p21WAF1/CIP1

【文章來(lái)源】:中國(guó)藥理學(xué)通報(bào). 2017年03期 北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】:5 頁(yè)

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        1.2.2 應(yīng)用染色質(zhì)免疫共沉淀技術(shù)(chromatin-im-munoprecipitation,Ch IP)處理樣品
f10片段的DNA相對(duì)表達(dá)">        1.2.3 Real-time PCR檢測(cè)各組p21WAF1/CIP1f1f10片段的DNA相對(duì)表達(dá)
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 結(jié)果
f10片段HDAC1高功能結(jié)合位點(diǎn)篩選">    2.1 B組MCF-7細(xì)胞p21WAF1/CIP1啟動(dòng)子區(qū)f1f10片段HDAC1高功能結(jié)合位點(diǎn)篩選
f10片段HDAC1高功能結(jié)合位點(diǎn)篩選">    2.2 SAHA作用下MCF-7細(xì)胞p21WAF1/CIP1啟動(dòng)子區(qū)f1f10片段HDAC1高功能結(jié)合位點(diǎn)篩選
f10片段HDAC1高功能結(jié)合位點(diǎn)篩選">    2.3 Leptin作用下MCF-7細(xì)胞p21WAF1/CIP1啟動(dòng)子區(qū)f1f10片段HDAC1高功能結(jié)合位點(diǎn)篩選
3 討論


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]SAHA在Leptin誘導(dǎo)的乳腺癌MCF-7細(xì)胞增殖過(guò)程中的調(diào)控作用[J]. 馮秀艷,韓翰,周偉強(qiáng).  中國(guó)藥理學(xué)通報(bào). 2016(04)
[2]SAHA和TRAIL聯(lián)合使用對(duì)乳腺癌雌激素受體陽(yáng)性細(xì)胞MCF-7生長(zhǎng)的影響[J]. 韓翰,王敏.  中國(guó)藥理學(xué)通報(bào). 2016(02)



本文編號(hào):2939039

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