外泌體介導(dǎo)的CLIC1轉(zhuǎn)運(yùn)對(duì)胃癌耐藥細(xì)胞株SGC-7901/VCR耐藥性的影響
發(fā)布時(shí)間：2020-12-21 03:22
目的:化療耐藥是胃癌（尤其晚期胃癌）患者治療失敗最常見(jiàn)和最難克服的問(wèn)題之一,也是腫瘤復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移的主要原因。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)CLIC1的表達(dá)水平與胃癌細(xì)胞的增殖、凋亡、細(xì)胞周期及侵襲與遷移能力密切相關(guān),CLIC1是胃癌基因治療的一個(gè)潛在的靶點(diǎn)。前期實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)CLIC1在胃癌耐藥細(xì)胞SGC-7901/VCR和其分泌的外泌體中高表達(dá)。我們推測(cè)CLIC1可能和腫瘤耐藥相關(guān)。因此,本課題通過(guò)提取SGC-7901/VCR的外泌體作用于正常胃癌細(xì)胞SGC-7901,檢測(cè)其對(duì)長(zhǎng)春新堿的耐藥情況和CLIC1表達(dá)水平的改變,同時(shí)沉默CLIC1基因在SGC-7901/VCR中的表達(dá)來(lái)檢測(cè)該細(xì)胞對(duì)長(zhǎng)春新堿的耐藥情況,和外泌體中CLIC1對(duì)胃癌耐藥的作用。方法:CCK-8測(cè)定SGC-7901和SGC-7901/VCR對(duì)長(zhǎng)春新堿的耐藥性,qRT-PCR測(cè)定SGC-7901和SGC-7901/VCR中CLIC1基因的表達(dá)情況;Western Blot和免疫熒光測(cè)定SGC-7901和SGC-7901/VCR中CLIC1蛋白的表達(dá)情況。提取SGC-7901/VCR和SGC-7901的外泌體,在電子顯微鏡下鑒定外泌體的...
【文章來(lái)源】：廣西醫(yī)科大學(xué)廣西壯族自治區(qū)
【文章頁(yè)數(shù)】：79 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
A.耐藥細(xì)胞（SGC-7901/VCR）和敏感細(xì)胞（SGC-7901）的CLIC1蛋白表達(dá)；B.耐藥細(xì)胞
胃癌敏感細(xì)胞（SGC-7901）和耐藥細(xì)胞細(xì)胞（SGC-7901/VCR）的 CLIC1 蛋白表達(dá)分析（igure. 4. Analysis of CLIC1 protein expression in gastric cancer-sensitive cells (SGC-7901) andrug-resistant cell lines (SGC-7901/VCR)（200um）2. SGC-7901/VCR 分泌的外泌體量大于 SGC-7901分別提取耐藥細(xì)胞 SGC-7901/VCR 和胃癌細(xì)胞 SGC-7901 細(xì)液，超速離心法得到的外泌體 V-exo 和 7901-exo，BCA 法測(cè)定 SG和 SGC-7901/VCR 外泌體蛋白濃度分別為 5.32±0.78 mg/ml 和 2.4mg/ml。 (P＜0.05 圖 5A)。用 Western blot 通過(guò)外泌體標(biāo)記蛋白 H（內(nèi)參 GAPDH）來(lái)鑒定外泌體（圖 5B）；并用透射電鏡鑒定外泌態(tài)和大�。▓D 5C）。同時(shí) qRT-PCR 結(jié)果顯示 V-exo 中 CLIC1 基因是 7901-exo 的 1.46±0.23 倍（圖 6），和細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果相一致。
敏感細(xì)胞(SGC-7901)外泌體的鑒定。(A)每 180mL 細(xì)胞上的含量（注:* 與正常組比較 p<0.05）記蛋白 HSP-70 的表達(dá)(內(nèi)參為 GAPDH)。(C)透射電鏡圖像字標(biāo) 2 是 SGC-7901/VCR。drug-resistant (SGC-7901/VCR) exosomes and sensitive cellsd SGC-7901/VCR exosomes per 180 mL of cell supernatantroup); (B) Western blot: SGC-7901/VCR Expression ofosomes (GAPDH as an internal reference). (C) TEM imagenumber 2 is SGC-7901/VCR
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Function of chloride intracellular channel 1 in gastric cancer cells[J]. Peng-Fei Ma,Jun-Qiang Chen,Zhen Wang,Jin-Lu Liu,BoPei Li,Department of Gastrointestinal Surgery,the First Affiliated Hospital of Guangxi Medical University,Nanning 530021,Guangxi Zhuang Autonomous Region,China. World Journal of Gastroenterology. 2012(24)
[2]影響5-FU療效的研究進(jìn)展[J]. 韓勇,壽成超. 中國(guó)腫瘤臨床. 2010(21)
本文編號(hào)：2929089
【文章來(lái)源】：廣西醫(yī)科大學(xué)廣西壯族自治區(qū)
【文章頁(yè)數(shù)】：79 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
A.耐藥細(xì)胞（SGC-7901/VCR）和敏感細(xì)胞（SGC-7901）的CLIC1蛋白表達(dá)；B.耐藥細(xì)胞
胃癌敏感細(xì)胞（SGC-7901）和耐藥細(xì)胞細(xì)胞（SGC-7901/VCR）的 CLIC1 蛋白表達(dá)分析（igure. 4. Analysis of CLIC1 protein expression in gastric cancer-sensitive cells (SGC-7901) andrug-resistant cell lines (SGC-7901/VCR)（200um）2. SGC-7901/VCR 分泌的外泌體量大于 SGC-7901分別提取耐藥細(xì)胞 SGC-7901/VCR 和胃癌細(xì)胞 SGC-7901 細(xì)液，超速離心法得到的外泌體 V-exo 和 7901-exo，BCA 法測(cè)定 SG和 SGC-7901/VCR 外泌體蛋白濃度分別為 5.32±0.78 mg/ml 和 2.4mg/ml。 (P＜0.05 圖 5A)。用 Western blot 通過(guò)外泌體標(biāo)記蛋白 H（內(nèi)參 GAPDH）來(lái)鑒定外泌體（圖 5B）；并用透射電鏡鑒定外泌態(tài)和大�。▓D 5C）。同時(shí) qRT-PCR 結(jié)果顯示 V-exo 中 CLIC1 基因是 7901-exo 的 1.46±0.23 倍（圖 6），和細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果相一致。
敏感細(xì)胞(SGC-7901)外泌體的鑒定。(A)每 180mL 細(xì)胞上的含量（注:* 與正常組比較 p<0.05）記蛋白 HSP-70 的表達(dá)(內(nèi)參為 GAPDH)。(C)透射電鏡圖像字標(biāo) 2 是 SGC-7901/VCR。drug-resistant (SGC-7901/VCR) exosomes and sensitive cellsd SGC-7901/VCR exosomes per 180 mL of cell supernatantroup); (B) Western blot: SGC-7901/VCR Expression ofosomes (GAPDH as an internal reference). (C) TEM imagenumber 2 is SGC-7901/VCR
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Function of chloride intracellular channel 1 in gastric cancer cells[J]. Peng-Fei Ma,Jun-Qiang Chen,Zhen Wang,Jin-Lu Liu,BoPei Li,Department of Gastrointestinal Surgery,the First Affiliated Hospital of Guangxi Medical University,Nanning 530021,Guangxi Zhuang Autonomous Region,China. World Journal of Gastroenterology. 2012(24)
[2]影響5-FU療效的研究進(jìn)展[J]. 韓勇,壽成超. 中國(guó)腫瘤臨床. 2010(21)
本文編號(hào)：2929089
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