【摘要】：目的:1.探討胰腺癌患者中的免疫學(xué)失調(diào)情況;2.明確胰蛋白酶與胰腺癌之間存在的關(guān)系;3.在體內(nèi)體外分別驗(yàn)證胰蛋白酶影響TCR的表達(dá)情況。方法:1.血液樣本收集本課題收集了從2015年12月至2017年12月之間入住福建醫(yī)科大學(xué)附屬第一病院肝膽外科,行外科手術(shù)切除并經(jīng)過術(shù)后病理金標(biāo)準(zhǔn)確診,且全部的相關(guān)的臨床資料完整的胰腺癌患者的外周血液標(biāo)本共103例。在本課題所入選的所有收集的外周血液樣本的胰腺癌患者,在手術(shù)前均未接受任何的化療、放療及分子靶向及中藥中藥等治療。2.患者入院術(shù)前血常規(guī)數(shù)據(jù)收集。收集課題時(shí)間跨度中的103例符合標(biāo)準(zhǔn)的胰腺癌患者及正常體檢人群369例血常規(guī)中的淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)。3.胰腺癌患者胰蛋白酶PRSS1表達(dá)的檢測。將所有收集的103例胰腺癌患者和369例正常體檢人群為對(duì)照組的血液標(biāo)本,血液標(biāo)本放置于-80度冰箱,進(jìn)行DNA提取,行PCR擴(kuò)增,基因測序,最后行ELISA試劑盒測血清胰蛋白酶濃度。4.檢測胰蛋白酶PRSS1過表達(dá)的胰腺癌細(xì)胞株、動(dòng)物模型與對(duì)照的空載胰腺癌細(xì)胞株、動(dòng)物模型(PRSS1正常表達(dá))中TCRVβ各基因型的表達(dá)情況。5.檢測胰蛋白酶PRSS1過表達(dá)的胰腺癌細(xì)胞株與對(duì)照的空載胰腺癌細(xì)胞中的CD抗原、白介素及MAPK的表達(dá)情況。6.實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)將本課題實(shí)驗(yàn)所得的所有數(shù)據(jù)全部逐一錄入SPSS19.0軟件中,并對(duì)所有的數(shù)據(jù)進(jìn)行多次核對(duì)確認(rèn),準(zhǔn)確核對(duì)無誤后,并再對(duì)所有數(shù)據(jù)進(jìn)行系統(tǒng)的統(tǒng)計(jì)分析。采用χ2檢驗(yàn)分析胰蛋白酶PRSS1在不同基因型及不同分期的胰腺癌患者中的表達(dá)情況同胰腺癌患者的臨床病理參數(shù)存在相關(guān)性。應(yīng)用T檢驗(yàn)分析胰蛋白酶PRSS1過表達(dá)的淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、TCRVβ細(xì)胞株及小鼠模型中的表達(dá)情況。用F檢驗(yàn)分析胰腺癌細(xì)胞株及小鼠模型中的CD抗原、白介素及MAPK數(shù)據(jù)。在數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析過程中所用的假設(shè)檢驗(yàn)均是應(yīng)用雙側(cè)檢驗(yàn),當(dāng)P0.05時(shí),被認(rèn)為有著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。結(jié)果:1.基因測序結(jié)果顯示PRSS1在胰腺癌患者中呈高表達(dá),PRSS1 SNP位點(diǎn)T/C基因型與T/T、C/C基因型有明顯差異,PRSS1表達(dá)與胰腺癌分期、生存期有關(guān)。2.胰腺癌患者與正常人群對(duì)比淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)差異明顯低于正常人群,P0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示胰腺癌患者胰蛋白酶PRSS1表達(dá)情況與年齡、性別、手術(shù)切緣、腫瘤大小、腫瘤位置、是否淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、是否存在神經(jīng)侵犯、是否存在遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、腫瘤細(xì)胞的分化程度、是否出現(xiàn)神經(jīng)侵犯等情況無明顯的相關(guān)性,而與胰腺癌患者的臨床分期、是否存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有著顯著相關(guān)性。4.在PRSS1過表達(dá)的胰腺癌患者其TCRVβ中的Dβ1的表達(dá)降低,P0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。5.胰腺癌胰蛋白酶PRSS1過表達(dá)細(xì)胞株與對(duì)照空載組細(xì)胞株的CD抗原(CD3D、CD5、CD14、CD27、CD164)表達(dá)明顯降低、白介素(IL6R、IL6ST、IL7、IL7R、IL8、IL13RA1、IL13RA2、IL15、)表達(dá)明顯增高及MAPK中(MMP2、MAP2K4、MAP2K5、MAP3K1、MAP3K2、MAP3K4、MAP3K5、MAP3K7、MAP3K8)等表達(dá)明顯增強(qiáng)。6.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示胰蛋白酶PRSS1過表達(dá)的胰腺癌細(xì)胞株與對(duì)照空載的胰腺癌細(xì)胞株的CD抗原、白介素及MAPK表達(dá)有差異,P0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論:1.與正常人群對(duì)比PRSS1在胰腺癌患者中存在高表達(dá);在胰腺癌的不同期患者中PRSS1的表達(dá)差異有著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;胰蛋白酶PRSS1與胰腺癌患者的臨床分期、生存期存在明顯相關(guān)性。2.胰腺癌患者與正常同期體檢人群比較,胰腺癌患者的淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3.胰蛋白酶PRSS1在胰腺癌患者的疾病發(fā)展過程中存在相關(guān)性。與胰腺癌患者的年齡、性別、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、神經(jīng)侵犯、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、腫瘤細(xì)胞的分化程度、是否出現(xiàn)神經(jīng)侵犯等情況無明顯的相關(guān)性,而與胰腺癌患者的臨床分期、是否存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有著顯著相關(guān)性。4.胰蛋白酶PRSS1被認(rèn)為可能是提示胰腺癌預(yù)后的有效的生物學(xué)指標(biāo),當(dāng)胰蛋白酶的表達(dá)水平越高時(shí),胰腺癌患者的預(yù)后越差。5.PRSS1過表達(dá)的胰腺癌細(xì)胞株、小鼠模型與對(duì)照空載的胰腺癌細(xì)胞株、小鼠模型的TCR Dβ1的表達(dá)存在差異,過表達(dá)細(xì)胞株及動(dòng)物模型中的Dβ1表達(dá)明顯高于對(duì)照組,P0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。6.PRSS1過表達(dá)的胰腺癌細(xì)胞株與對(duì)照空載組細(xì)胞株的CD抗原、白介素及MAPK的表達(dá)存在明顯差異,過表達(dá)的PRSS1可能通過改變胰蛋白酶濃度,使胰腺癌患者癌細(xì)胞的微環(huán)境發(fā)生變化,從而影響胰腺癌的進(jìn)展,可能是通過對(duì)MAPK途徑的調(diào)控影響胰腺癌發(fā)展。
【學(xué)位授予單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R735.9

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前6條

1 蘆波;錢家鳴;;重癥急性胰腺炎病因及發(fā)病機(jī)制研究進(jìn)展[J];中國實(shí)用外科雜志;2012年07期

2 余忠英;;重癥胰腺炎的觀察及護(hù)理[J];中國中醫(yī)藥現(xiàn)代遠(yuǎn)程教育;2010年15期

3 燕紅玲;何韶衡;;類胰蛋白酶的檢測及臨床意義[J];醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào);2009年08期

4 朱明華,胡先貴,鄭建明,于觀貞,席鵬程,倪燦榮,陳穎;249例外分泌源性胰腺癌臨床病理和免疫組化研究[J];胰腺病學(xué);2003年04期

5 饒紹琴,鄧君,傳良敏,楊明清;胰蛋白酶原-2在急性胰腺炎臨床診斷中的應(yīng)用[J];上海醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志;2001年06期

6 張朋彬;胰酶與急性胰腺炎的預(yù)后[J];胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志;1995年02期

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 鄧南星;沉默PRSS1對(duì)胃癌MGC803細(xì)胞遷移侵襲的影響[D];南華大學(xué);2015年

本文編號(hào)：2792356