本文關(guān)鍵詞：髓母細(xì)胞瘤中腦腫瘤干細(xì)胞的分離培養(yǎng)及鑒定，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景與目的:長(zhǎng)期以來(lái),腦腫瘤等實(shí)體腫瘤中是否存在腫瘤干細(xì)胞一直存在爭(zhēng)論,最近已經(jīng)有報(bào)道從膠質(zhì)瘤和髓母細(xì)胞瘤等腦腫瘤及其它系統(tǒng)實(shí)體腫瘤中成功分離出腫瘤干細(xì)胞。本研究旨在利用簡(jiǎn)化的無(wú)血清培養(yǎng)基和懸浮培養(yǎng)方法,從人髓母細(xì)胞瘤中分離培養(yǎng)腦腫瘤干細(xì)胞,觀察其在體外的增殖、分化,鑒定其特異性標(biāo)志物CD133和Nestin的表達(dá),驗(yàn)證腫瘤組織切片中CD133陽(yáng)性細(xì)胞的存在,為腦腫瘤干細(xì)胞的進(jìn)一步研究打下基礎(chǔ)。方法:術(shù)中取11例患者髓母細(xì)胞瘤組織,分離成單細(xì)胞懸液,接種于含表皮生長(zhǎng)因子、成纖維生長(zhǎng)因子以及B27添加劑的無(wú)血清培養(yǎng)基中懸浮培養(yǎng),以分離其中的腦腫瘤干細(xì)胞;對(duì)其增殖形成的腦腫瘤干細(xì)胞球連續(xù)傳代培養(yǎng);并進(jìn)行單克隆形成實(shí)驗(yàn),以確定原代腫瘤組織中腫瘤干細(xì)胞的百分率,觀察腦腫瘤干細(xì)胞球的形成過(guò)程。然后,將腦腫瘤干細(xì)胞球接種于含血清培養(yǎng)基,觀察腦腫瘤干細(xì)胞的分化現(xiàn)象。最后,利用免疫熒光法檢測(cè)腦腫瘤干細(xì)胞特異性標(biāo)志物CD133和Nestin在腦腫瘤干細(xì)胞球中的表達(dá);利用免疫組化法檢測(cè)組織切片中CD133陽(yáng)性細(xì)胞的分布,并計(jì)算CD133陽(yáng)性細(xì)胞百分率。結(jié)果:本組11例髓母細(xì)胞瘤中均僅有少數(shù)腫瘤細(xì)胞能夠在無(wú)血清培養(yǎng)基中存活并懸浮生長(zhǎng)、增殖形成克隆性腦腫瘤干細(xì)胞球,傳代后腦腫瘤干細(xì)胞仍保持很強(qiáng)的自我更新和增殖能力。單克隆形成實(shí)驗(yàn)表明原代腫瘤細(xì)胞中具有單克隆形成能力的腫瘤干細(xì)胞百分率為(31.18±6.18)%。在含血清培養(yǎng)基中腦腫瘤干細(xì)胞發(fā)生貼壁分化,產(chǎn)生具有多種細(xì)胞形態(tài)的分化細(xì)胞。腦腫瘤干細(xì)胞表達(dá)神經(jīng)干細(xì)胞的特異性標(biāo)志物CD133和Nestin;腫瘤組織切片中CD133陽(yáng)性細(xì)胞呈巢狀或散在分布,占全部腫瘤細(xì)胞的(33.06±8.57)%。結(jié)論:人髓母細(xì)胞瘤組織中存在一定量的具有自我更新和增殖能力、表達(dá)CD133和Nestin的腦腫瘤干細(xì)胞,并能在體外將其分離、培養(yǎng)和誘導(dǎo)分化。
【作者單位】： 中南大學(xué)湘雅醫(yī)院神經(jīng)外科 中南大學(xué)湘雅醫(yī)院神經(jīng)外科 中南大學(xué)湘雅醫(yī)院神經(jīng)外科 中南大學(xué)湘雅醫(yī)院神經(jīng)外科 中南大學(xué)湘雅醫(yī)院神經(jīng)外科 中南大學(xué)湘雅醫(yī)院神經(jīng)外科
【關(guān)鍵詞】： 髓母細(xì)胞瘤 腫瘤干細(xì)胞 細(xì)胞培養(yǎng) 細(xì)胞分化 CD Nestin
【基金】：湖南省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No.055JJ30060) 湖南省科技廳重點(diǎn)資助項(xiàng)目(No.02JTY2009) 湖南省衛(wèi)生廳科研基金課題(No.B2003-016)~~
【分類號(hào)】：R739.4
【正文快照】： 髓母細(xì)胞瘤是高度惡性的神經(jīng)上皮組織腫瘤,是兒童最常見的惡性腫瘤之一。盡管對(duì)髓母細(xì)胞瘤和其它神經(jīng)上皮來(lái)源腦腫瘤的基礎(chǔ)研究取得了很大進(jìn)展,但它們的發(fā)生與起源一直存在爭(zhēng)議,治療效果仍不令人滿意[1]。隨著人體組織干細(xì)胞研究的日益深入,在白血病和造血干細(xì)胞相關(guān)研究的啟

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 李茗初,陳風(fēng)華,鄧永文,伍軍,周仁輝,盧明,陳成,周向陽(yáng),方芳,方加勝;懸浮法培養(yǎng)C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞系和該細(xì)胞系中腦腫瘤干細(xì)胞的分離[J];中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志;2004年24期

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 魏立勇,彭祥鄂;阿克拉霉素B對(duì)人癌干細(xì)胞克隆形成能力影響的初步研究[J];湖南醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);1988年03期

2 鄧永文;方加勝;李茗初;陳風(fēng)華;周向陽(yáng);伍軍;周仁輝;方芳;陳成;盧明;曾飛躍;;腦腫瘤干細(xì)胞與神經(jīng)上皮腫瘤病理級(jí)別的相關(guān)性[J];中南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2006年01期

3 周仁輝;方加勝;鄧永文;陳風(fēng)華;劉勁芳;;人類室管膜瘤中腫瘤干細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[J];醫(yī)學(xué)臨床研究;2007年08期

4 劉平平;李曉明;;實(shí)體腫瘤干細(xì)胞分離鑒定技術(shù)的研究進(jìn)展[J];西南軍醫(yī);2009年03期

5 崔大明;車曉明;;腦腫瘤干細(xì)胞的研究進(jìn)展[J];中國(guó)臨床神經(jīng)科學(xué);2006年06期

6 李平;傅震;尤永平;;微小RNA在人腦膠質(zhì)瘤干細(xì)胞中的研究進(jìn)展[J];立體定向和功能性神經(jīng)外科雜志;2010年06期

7 高凌,王佾先,許林;人癌細(xì)胞集落培養(yǎng)的改進(jìn)[J];實(shí)用癌癥雜志;1990年03期

8 李小平;蘇承武;;腫瘤化療藥物體外藥敏預(yù)測(cè)實(shí)驗(yàn)進(jìn)展[J];蛇志;2007年01期

9 張世光;成玉;高英堂;杜智;陳力;;腫瘤干細(xì)胞及肝癌腫瘤干細(xì)胞[J];細(xì)胞生物學(xué)雜志;2007年01期

10 歐陽(yáng)振;王栓科;康學(xué)文;王翠芳;汪靜;郭洪章;;人骨肉瘤細(xì)胞株U2-OS中分離并鑒定腫瘤干細(xì)胞[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2007年24期

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前7條

1 羅湘穎;ATRA協(xié)同BCNU靶向抑制人腦腫瘤干細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[D];中南大學(xué);2007年

2 畢長(zhǎng)龍;腦腫瘤干細(xì)胞的多藥耐藥性及其機(jī)理研究[D];中南大學(xué);2007年

3 沈罡;腦膠質(zhì)細(xì)胞瘤腫瘤干細(xì)胞的分離、鑒定以及生物學(xué)特性研究[D];浙江大學(xué);2008年

4 楊智勇;人腦膠質(zhì)瘤干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)、初步鑒定以及腦膠質(zhì)瘤治療的新探討[D];昆明醫(yī)學(xué)院;2008年

5 鄧永文;磁珠分選U251細(xì)胞系中的腦腫瘤干細(xì)胞及其耐藥性的初步研究[D];中南大學(xué);2008年

6 鄒奇飛;肝癌中具有轉(zhuǎn)移特性腫瘤干細(xì)胞的鑒定研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2009年

7 張全斌;腦腫瘤干細(xì)胞分化抑制機(jī)制的研究[D];蘇州大學(xué);2007年

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 朱言亮;陳龍邦;王靖華;褚曉源;陳一天;張群;夏欣一;;肺腺癌細(xì)胞株SPC-A1中側(cè)群細(xì)胞的分離與腫瘤干細(xì)胞樣特征的鑒定[J];中國(guó)肺癌雜志;2008年05期

2 陳驊;黃強(qiáng);董軍;蘭青;;腫瘤起源細(xì)胞學(xué)說(shuō)與爭(zhēng)論[J];癌癥;2006年06期

3 蔡磊;劉桂香;劉光萍;李雅娜;錢知勉;馮國(guó)營(yíng);;缺血再灌注大鼠腦勻漿上清對(duì)干細(xì)胞的誘導(dǎo)[J];四川解剖學(xué)雜志;2009年01期

4 張衣北;陳安民;郭風(fēng)勁;黃仕龍;熊文化;;骨骺干細(xì)胞的體外培養(yǎng)及生長(zhǎng)特性[J];中國(guó)康復(fù);2006年01期

5 呂寶忠;;腫瘤干細(xì)胞研究進(jìn)展[J];腫瘤;2006年01期

6 崔榮太;蒲傳強(qiáng);劉潔曉;毛燕玲;;人參皂甙Rg1對(duì)大鼠腦源性神經(jīng)干細(xì)胞分化作用的實(shí)驗(yàn)研究[J];中國(guó)神經(jīng)精神疾病雜志;2008年02期

7 程康;賈國(guó)良;王海昌;欒榮華;周祥;宗小娟;;小型豬骨髓內(nèi)皮祖細(xì)胞的體外培養(yǎng)及分化的比較[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2006年15期

8 李衛(wèi)華;孫志成;王文;李淑艷;;堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子對(duì)人前脂肪細(xì)胞增殖和分化的影響[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2009年45期

9 周高速;張振書;劉思德;蘇磊;王亞東;何敬東;張明軍;李旭;;大鼠肝卵圓細(xì)胞體外分離培養(yǎng)和誘導(dǎo)分化為肝細(xì)胞的初步研究[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2007年05期

10 周鳳;黃麗娜;成洪波;曾健;張國(guó)明;;大鼠視網(wǎng)膜干細(xì)胞體外培養(yǎng)、增殖及分化[J];中國(guó)病理生理雜志;2007年08期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 曾麗玲;羅仙;朱進(jìn)霞;鐘耀華;陳小章;舒暢;李廷玉;;體外誘導(dǎo)成年大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向上皮樣細(xì)胞分化[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十四次全國(guó)兒科學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

2 顧問;郭雪君;丁濤;;SiRNA干擾Notch信號(hào)通路胞外分子Fringe對(duì)哮喘時(shí)T細(xì)胞分化的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)年會(huì)——2011（第十二次全國(guó)呼吸病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議）論文匯編[C];2011年

3 顧問;郭雪君;丁濤;;Notch信號(hào)通路胞外調(diào)控分子Fring對(duì)哮喘T細(xì)胞分化的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)年會(huì)——2011（第十二次全國(guó)呼吸病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議）論文匯編[C];2011年

4 方艷芬;林美花;周星露;朱瓊文;楊波;何俏軍;;泛素-蛋白酶體系統(tǒng)參與的周期調(diào)節(jié)在全反式維甲酸(ATRA)誘導(dǎo)的白血病細(xì)胞分化過(guò)程中的作用研究[A];2009醫(yī)學(xué)前沿論壇暨第十一屆全國(guó)腫瘤藥理與化療學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2009年

5 魏永祥;韓德民;蔡貞;楊凌;劉小超;羨慕;張曉斌;;嗅感覺神經(jīng)細(xì)胞的分離與培養(yǎng)[A];第七屆北京青年科技論文評(píng)選獲獎(jiǎng)?wù)撐募痆C];2003年

6 何國(guó)雄;李飛;李海標(biāo);梁志忠;潘志信;利玉歡;黃錦桃;;移植成人骨髓間質(zhì)干細(xì)胞在腦梗死模型鼠的分化及功能恢復(fù)研究[A];第九次全國(guó)神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編[C];2006年

7 胡秀華;;細(xì)胞培養(yǎng)與real-time RT-PCR相結(jié)合的方法檢測(cè)水體中感染性輪狀病毒[A];2006中國(guó)微生物學(xué)會(huì)第九次全國(guó)會(huì)員代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2006年

8 石旭東;甘志華;;細(xì)胞培養(yǎng)用聚乳酸多孔微載體的制備及改性研究[A];2009年全國(guó)高分子學(xué)術(shù)論文報(bào)告會(huì)論文摘要集（下冊(cè)）[C];2009年

9 高毅;慕寧;唐力軍;;體外誘導(dǎo)人骨髓多能成體祖細(xì)胞向肝樣細(xì)胞分化的實(shí)驗(yàn)研究[A];肝臟病防治學(xué)術(shù)研討會(huì)及新進(jìn)展學(xué)習(xí)班�？痆C];2005年

10 周海文;周曾同;商慶新;曹誼林;;正常人口腔粘膜角化細(xì)胞體外培養(yǎng)研究[A];第一屆全國(guó)口腔頜面部腫瘤學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2001年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 胡衛(wèi)娜;大愛鑄就生命之盾[N];科技日?qǐng)?bào);2011年

2 記者 楊帆　實(shí)習(xí)生 楊周;“腫瘤干細(xì)胞研究”在渝實(shí)施[N];重慶日?qǐng)?bào);2009年

3 記者 施嘉奇　通訊員 王姿英;探索中藥對(duì)干細(xì)胞分化的作用[N];文匯報(bào);2009年

4 何雷;“973”計(jì)劃腫瘤干細(xì)胞項(xiàng)目啟動(dòng)[N];健康報(bào);2009年

5 王姿英;中英合作中藥調(diào)控干細(xì)胞分化研究啟動(dòng)[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2009年

6 陳超;科學(xué)家發(fā)現(xiàn)引發(fā)細(xì)胞分化的分子通道[N];科技日?qǐng)?bào);2010年

7 記者 衣曉峰　靳萬(wàn)慶;三氧化二砷可擊殺腫瘤干細(xì)胞[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2010年

8 衣曉峰　藍(lán)建中;三氧化二砷可擊殺腫瘤干細(xì)胞[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2010年

9 衣曉峰;三氧化二砷可殺傷腫瘤干細(xì)胞[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2010年

10 呂斌;湖南湘雅醫(yī)院發(fā)現(xiàn)腫瘤干細(xì)胞[N];醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)(中藥報(bào));2004年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 馮東福;胚胎神經(jīng)干細(xì)胞向視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞誘導(dǎo)分化的實(shí)驗(yàn)研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2005年

2 湯旭群;人髓母細(xì)胞瘤干細(xì)胞樣細(xì)胞的分離鑒定及放療對(duì)其增殖影響的體外實(shí)驗(yàn)研究[D];復(fù)旦大學(xué);2010年

3 王旭;涎腺多形性腺瘤基因治療的實(shí)驗(yàn)研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2005年

4 曠勁松;長(zhǎng)期高糖導(dǎo)致胰島β細(xì)胞功能損傷的分子機(jī)制[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2005年

5 劉東昕;體外甲床細(xì)胞培養(yǎng)、鑒定及組織工程甲床構(gòu)建的實(shí)驗(yàn)研究[D];吉林大學(xué);2006年

6 朱保民;流體剪切力對(duì)破骨細(xì)胞降鈣素受體（CTR）及整合素αVβ3 mRNA表達(dá)影響的研究[D];四川大學(xué);2005年

7 胡夢(mèng)欣;聚丙烯微孔膜的高密度糖基化及其應(yīng)用基礎(chǔ)研究[D];浙江大學(xué);2009年

8 宮安靜;腫瘤干細(xì)胞致敏的樹突狀細(xì)胞對(duì)腦膠質(zhì)瘤免疫作用研究[D];山東大學(xué);2011年

9 吳江群;骨髓基質(zhì)干細(xì)胞體內(nèi)成骨分化研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2008年

10 池京洋;靜脈移植骨髓基質(zhì)細(xì)胞治療大鼠腦外傷[D];天津醫(yī)科大學(xué);2007年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 李玲巧;細(xì)胞培養(yǎng)芯片的研制及芯片內(nèi)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化控制的前期研究[D];廈門大學(xué);2009年

2 車樹圣;人腦膠質(zhì)瘤干細(xì)胞的分離培養(yǎng)和超微結(jié)構(gòu)觀察[D];青島大學(xué);2007年

3 劉楠;Wnt信號(hào)通路狀態(tài)與白藜蘆醇抗髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞作用關(guān)系的研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2007年

4 陳炬瑩;乳腺癌細(xì)胞系中腫瘤干細(xì)胞相關(guān)亞群的初步研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2010年

5 王建鵬;Notch-1基因下調(diào)誘導(dǎo)GBM腫瘤干細(xì)胞腫瘤細(xì)胞凋亡的試驗(yàn)研究[D];青島大學(xué);2010年

6 保秋萍;多發(fā)性骨髓瘤U266細(xì)胞株中腫瘤干細(xì)胞的分離及生物學(xué)特性的初步研究[D];昆明醫(yī)學(xué)院;2011年

7 陳坤;人喉癌細(xì)胞系Hep-2中的腫瘤干細(xì)胞與放療抵抗關(guān)系的初步研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2010年

8 李曾;人前列腺癌細(xì)胞系PC-3細(xì)胞中類腫瘤干細(xì)胞的培養(yǎng)分離和初步鑒定[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2010年

9 焦?jié)?人卵巢癌CD24-表型細(xì)胞的干細(xì)胞特征及上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)變的體外研究[D];浙江大學(xué);2011年

10 孫曉彤;胃癌中腫瘤干細(xì)胞標(biāo)志物的初步鑒定、表達(dá)及其臨床病理學(xué)意義[D];蘭州大學(xué);2010年

  本文關(guān)鍵詞：髓母細(xì)胞瘤中腦腫瘤干細(xì)胞的分離培養(yǎng)及鑒定，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：274577