【摘要】：目的:以肺癌A549細胞作為研究對象,探討白花蛇舌草總黃酮與順鉑聯(lián)合對肺癌A549細胞增殖、凋亡的影響及可能機制。方法:用體外培養(yǎng)法培養(yǎng)肺癌A549細胞,采用對數(shù)期的腫瘤細胞進行該項試驗,隨機分為四個實驗組:陰性對照組;白花蛇舌草總黃酮組;順鉑組;聯(lián)合組(白花蛇舌草總黃酮+順鉑組)。采用MTT法來檢測白花蛇舌草總黃酮、順鉑兩種藥物單用及二者聯(lián)合應(yīng)用對肺癌A549細胞增殖的影響,并采用Q值公式來進行評估兩藥聯(lián)合干預(yù)的作用效果;給予流式細胞分析儀檢查并測定兩種干預(yù)藥物對于細胞的分化周期以及細胞的凋亡率的作用效果;RT-PCR技術(shù)檢測凋亡相關(guān)蛋白p-AKT、Caspase-9、Bcl-2、Bax m RNA的表達水平;Western bloting檢測p-AKT、Caspase-9、Bcl-2、Bax蛋白的表達變化。結(jié)果:1、與陰性對照組對比,白花蛇舌草總黃酮組、順鉑組對肺癌A549細胞的增殖呈現(xiàn)時間-濃度依賴抑制作用,差異存在統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);聯(lián)合組優(yōu)于白花蛇舌草總黃酮組、順鉑組,差異存在統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);兩藥聯(lián)合干預(yù)的作用表現(xiàn)為單純相加。2、在使用藥物干預(yù)肺癌A549細胞48小時以后,白花蛇舌草總黃酮組G1期細胞的比例升高,S、G2期細胞比例下降,與陰性對照組比較差異存在統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);順鉑組S期比例升高,與陰性對照組比較差異存在統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);與陰性對照組及順鉑組比較,聯(lián)合組G1期細胞比例升高,與陰性對照組及白花蛇舌草總黃酮組比較,聯(lián)合組S期比例升高,差異存在統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。白花蛇舌草總黃酮及順鉑均能誘導(dǎo)肺癌A549細胞凋亡,白花蛇舌草總黃酮組、順鉑組凋亡率分別為(10.870±0.442)%、(16.648±0.307)%,與正常對照組[(1.152±0.275)%]比,差異存在統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),聯(lián)合組的A549細胞凋亡率[(19.856±0.649)%],比白花蛇舌總黃酮組、順鉑組有增加,差異存在統(tǒng)計學(xué)意義。3、與陰性對照組對比,白花蛇舌草總黃酮組、順鉑組明顯抑制肺癌A549細胞p-AKT、BCL-2表達(P0.05),明顯促進Caspase-9、Bax蛋白的表達(P0.05);與陰性對照組和單一藥物干預(yù)組相比較,聯(lián)合組的協(xié)同作用更強,差異存在統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1、白花蛇舌草總黃酮、順鉑均具有抑制肺癌A549細胞增殖及促進細胞凋亡的作用,兩藥聯(lián)合作用明顯加強。2、白花蛇舌草總黃酮聯(lián)合順鉑促進肺癌A549細胞的凋亡的機制可能是通過降低p-AKT的表達程度,從而增強Caspase-9的表達程度、下調(diào)Bcl-2的表達程度、上調(diào)Bax的表達程度,升高Bax/Bcl-2的比值。
【圖文】：

3.3 白花蛇舌草總黃酮聯(lián)合順鉑對肺癌 A549 細胞 p-AKT、Caspase-9、BCL-2、Bax 及蛋白表達的影響3.3.1 白花蛇舌草總黃酮、順鉑對肺腺癌 A549 細胞 p-AKT、Caspase-9、BCL-2、Bax mRNA 表達的影響白花蛇舌草總黃酮、順鉑均可以抑制 p-AKT、BCL-2 mRNA 的表達，促進肺腺癌 A549 細胞 Bax、Caspase-9 mRNA 表達，并且差異存在統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。白花蛇舌草總黃酮與順鉑聯(lián)合作用效果更強，與單一藥物組相比較，，差異存在統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），見圖 3.3.1.1。應(yīng)用電腦圖像分析系統(tǒng)分析 p-AKT、Caspase-9、BCL-2、Bax 和內(nèi)參 Actin 之間的灰度值，pAKT/Actin、Caspase-9/Actin、BCL-2/Actin、Bax/Actin 灰度值比值見表3.3.1、圖 3.3.1.2。逡逡

圖 3.3.1.2 FHD、DDP 對 A549 細胞 p-AKT、caspase-9 、BCL-2、Bax mRNA 表達的比較3.3.2 FHD、DDP 對 A549 細胞 p-AKT、Caspase-9、BCL-2、Bax 蛋白表達水平的影響同陰性對照組相比較，白花蛇舌草總黃酮、順鉑均可以明顯降低 p-AKT、BCL-2 蛋白的表達水平，提高促凋亡蛋白 Caspase-9、Bax 蛋白的表達。與陰性對照組以及單一用藥組相比較，聯(lián)合用藥組作用效果更明顯，差異存在統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），見圖 3.3.2.1。應(yīng)用電腦圖像分析系統(tǒng)分析 p-AKT、Caspase-9、BCL-2、Bax 和內(nèi)參 Actin 的灰度值，p-AKT/Actin、Caspase-9/Actin、BCL-2/Actin、Bax/Actin 灰度值比值見表 3.3.2、圖 3.3.2.2。00.10.2對照組 FHD組 DDP組 FHD+DDP組
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R734.2

【參考文獻】

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1 潘瑩;龔五星;梁翠微;楊兵;謝云;鄭禮平;張楠;付社竹;王燕;;靶向和化療的治療先后順序?qū)ν砥谶M展性非小細胞肺癌療效影響[J];中國醫(yī)師進修雜志;2017年02期

2 于濤;張秋生;齊擁軍;;康萊特對晚期肺癌患者癥狀及生活質(zhì)量的改善作用[J];中國藥業(yè);2015年23期

3 王秋蘭;薛永杰;韓濤;;白花蛇舌草總黃酮的提取及其對BGC-823胃癌細胞增殖周期與凋亡的影響[J];中國中西醫(yī)結(jié)合消化雜志;2015年11期

4 黃勇;秦叔逵;;洛鉑治療非小細胞肺癌的實驗與臨床研究現(xiàn)狀及進展[J];臨床腫瘤學(xué)雜志;2015年10期

5 張彥兵;王天昶;朱嬌;郭亞煥;肖菊香;廖子君;阮之平;;白花蛇舌草總黃酮對肝癌MHCC97-H細胞增殖的抑制作用[J];現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué);2015年19期

6 金靜思;賀巾釗;周黎明;;非小細胞肺癌分子靶向治療藥物的現(xiàn)狀及進展[J];中國腫瘤臨床;2015年17期

7 毛宇;徐芳;徐小娟;劉湘新;賀建華;;白花蛇舌草抗腫瘤成分及其作用機理研究進展[J];現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué);2015年17期

8 王秋蘭;高曉民;張煦;;白花蛇舌草總黃酮對BGC-823胃癌細胞增殖和凋亡的影響[J];現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志;2015年21期

9 王寶強;周陳華;;紫杉醇聯(lián)合順鉑同步放化療治療局部晚期非小細胞肺癌的臨床療效及安全性評價[J];中國臨床藥理學(xué)雜志;2015年08期

10 張義;李薇;胡小軍;;欖香烯聯(lián)合TC方案治療非小細胞肺癌療效觀察[J];中國實用醫(yī)藥;2015年12期

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1 包曉霞;李柳葉;薛曉鷗;;蓮花湯通過抑制子宮內(nèi)膜癌細胞中TAMs活化下調(diào)TLR4/MyD88信號通路表達的分子機制研究[A];2015全國中西醫(yī)結(jié)合月經(jīng)病專題學(xué)術(shù)會議論文及摘要集[C];2015年

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1 董靜;中國漢族人群肺癌全基因組關(guān)聯(lián)研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2012年

2 于莉;白花蛇舌草抗腫瘤活性成分的研究[D];沈陽藥科大學(xué);2009年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前3條

1 李方麗;白花蛇舌草化學(xué)成分及其體外抗腫瘤活性研究[D];山東中醫(yī)藥大學(xué);2016年

2 陳婧;中藥白花蛇舌草提取物抑制癌細胞STAT3活化并誘導(dǎo)細胞凋亡[D];蘭州大學(xué);2015年

3 望琴;閩產(chǎn)白花蛇舌草抗腫瘤與抗炎的實驗研究[D];福建中醫(yī)藥大學(xué);2013年

本文編號：2662260