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c-Myc-RPS7通路促進(jìn)前列腺癌進(jìn)展的機(jī)制探索

發(fā)布時(shí)間：2020-05-09 18:53

【摘要】：目的探討RPS7在前列腺癌組織中的表達(dá)及臨床意義,揭示探討c-Myc通過(guò)調(diào)節(jié)RPS7對(duì)前列腺癌細(xì)胞增殖的影響及其分子機(jī)制,明確RPS7通過(guò)EMT對(duì)前列腺癌PC3細(xì)胞侵襲效應(yīng)的影響,并揭示其分子機(jī)制。方法運(yùn)用RT-q PCR實(shí)驗(yàn)檢測(cè)RPS7在119例前列腺癌組織及96例前列腺增生組織中的m RNA表達(dá)情況,并通過(guò)Wetern blot實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,隨后,揭示RPS7異常表達(dá)與前列腺癌患者臨床病例資料的相關(guān)性。通過(guò)RPS7特異性的sh RNA轉(zhuǎn)染入前列腺癌PC3細(xì)胞,構(gòu)建RPS7穩(wěn)定低表達(dá)的PC3細(xì)胞,然后運(yùn)用MTT檢測(cè)及細(xì)胞計(jì)數(shù)方法揭示RPS7異常表達(dá)對(duì)前列腺癌細(xì)胞增殖的影響,并將所得的體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果行體內(nèi)驗(yàn)證,運(yùn)用生物信息學(xué)技術(shù)分析尋找調(diào)節(jié)RPS7異常表達(dá)的可能的轉(zhuǎn)錄因子,并通過(guò)熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)及CHIP實(shí)驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證,RT-q PCR及Western blot技術(shù)用于檢測(cè)不同基因m RNA及蛋白的表達(dá)水平。運(yùn)用RPS7特異性si RNA轉(zhuǎn)染入前列腺癌PC3細(xì)胞,構(gòu)建RPS7穩(wěn)定低表達(dá)的前列腺癌細(xì)胞,然后運(yùn)用Transwell檢測(cè)細(xì)胞的侵襲效應(yīng),運(yùn)用RT-q PCR及Western blot方法計(jì)算檢測(cè)不同基因的m RNA及蛋白表達(dá)水平。結(jié)果與前列腺增生組織相比較,RPS7在前列腺癌中顯著高表達(dá),且RPS7高表達(dá)與前列腺癌患者高血清PSA、高臨床分期、高病理分級(jí)及周?chē)窠?jīng)血管浸潤(rùn)密切相關(guān),此外,RPS7異常表達(dá)與患者年齡、淋巴結(jié)陽(yáng)性、切緣陽(yáng)性等沒(méi)有明顯的相關(guān)性,此外,RPS7高表達(dá)與前列腺癌的不良預(yù)后密切相關(guān)。PS7低表達(dá)可顯著抑制前列腺癌細(xì)胞PC3的體內(nèi)外增殖,且在RPS7轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)前存在c-Myc蛋白可能結(jié)合的E-box盒序列,熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)及CHIP實(shí)驗(yàn)表明c-Myc可直接結(jié)合轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)RPS7的表達(dá)。RPS7低表達(dá)可顯著抑制前列腺癌PC3細(xì)胞的體外侵襲,RPS7低表達(dá)可顯著促進(jìn)上皮細(xì)胞標(biāo)志物E-cadherin,而間充質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志物N-cadherin及Vimentin.的表達(dá)顯著降低。結(jié)論我們認(rèn)為RPS7高表達(dá)與前列腺癌不良預(yù)后密切相關(guān),c-Myc可通過(guò)RPS7通路促進(jìn)前列腺癌細(xì)胞增殖,RPS7可通過(guò)EMT通路促進(jìn)前列腺癌細(xì)胞的侵襲,抑制c-Myc-RPS7通路可能是治療前列腺癌可行的診療新策略。
【圖文】：

前列腺增生,腺癌,蛋白