【摘要】：前言:乳腺癌作為當(dāng)前對婦女健康危害最為嚴(yán)重的腫瘤問題之一。當(dāng)前每年大概有數(shù)十萬人死于乳腺癌。相對于發(fā)達(dá)國家的數(shù)據(jù)而言,盡管當(dāng)前在發(fā)病率方面依舊相對偏低,但是當(dāng)前的發(fā)病率有著持續(xù)增加的趨勢,在女性癌癥中位列榜首。乳腺癌作為女性常見腫瘤,具有高度的異質(zhì)性~([1-2]),不管是在分子、組織又或是對治療的反應(yīng)等方面都有著顯著的區(qū)別,科學(xué)的認(rèn)知此類區(qū)別能夠?qū)崿F(xiàn)更具針對性的治療。伴隨當(dāng)前關(guān)于分子分型的認(rèn)知更為深化,三陰乳腺癌(TNBC)作為一類獨(dú)立亞型,獲得的關(guān)注度不斷提升。TNBC作為ER、PR兩類受體與對應(yīng)的hu m aepn i d e r grmoa lw ftahc t roerce p-t 2o都r歸屬于陰性范疇的特殊乳腺癌,在全體乳腺癌內(nèi)的比例大約為10%-20%~([3-5]),三陰性乳腺癌,呈現(xiàn)一種特有的轉(zhuǎn)移特點(diǎn),發(fā)病2年時(shí)間中的轉(zhuǎn)移與復(fù)發(fā)幾率不斷提升,2-3年內(nèi)的轉(zhuǎn)移抵達(dá)高峰階段~([6-9])。三陰乳腺癌與非三陰性乳腺比較,發(fā)病年齡相對較輕,多數(shù)是絕經(jīng)之前,實(shí)際的病理種類以浸潤性導(dǎo)管癌作為重點(diǎn)構(gòu)成,腫瘤范圍相對偏大,有著顯著的侵襲性,通常會伴隨淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移問題的產(chǎn)生,無病的生存幾率相對偏低,在手術(shù)之后的初期階段或許會產(chǎn)生局部復(fù)發(fā)與轉(zhuǎn)移等問題,同時(shí)在內(nèi)臟轉(zhuǎn)移率方面顯著大于骨轉(zhuǎn)移率~([10-12])。因?yàn)槿幮匀橄侔┤狈?yīng)的分子靶點(diǎn),針對內(nèi)分泌與抗靶向兩類療法都不存在顯著的效果,因此治療手段較為單一,與非三陰性相比不能從內(nèi)分泌治療及靶向治療中受益,這也是其預(yù)后較差的因素之一。資料與方法:病例選擇回顧性的收集了中國醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院2004年-2009年收治的70例乳腺癌患者,均為女性,且經(jīng)病理學(xué)確診ER、PR均為陰性伴有腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移�；颊咴谑中g(shù)之前都并未進(jìn)行放化療,通過手術(shù)來切除其中的原發(fā)灶與淋巴結(jié),同時(shí)進(jìn)行后續(xù)的包埋處理。方法:1、HE染色;2、免疫組織化學(xué)SP法染色;3、熒光免疫原位雜交;4、RT-PCR;5、western blot;6、網(wǎng)絡(luò)數(shù)據(jù)庫挖掘隨訪:所有70例患者均采用電話隨訪,隨訪截止時(shí)間為2013年9月,中位隨訪持續(xù)80個(gè)月。在后續(xù)的隨訪過程中,存在28例病患會產(chǎn)生復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移與死亡等問題,在所有病例中有25例死于乳腺癌,同時(shí)3例死于相關(guān)的心血管問題或交通意外等其他原因。隨訪期間死于其他原因、失訪或研究截止仍生存者,均計(jì)為刪失數(shù)據(jù)。無病生存期(DFS)的實(shí)際概念為在手術(shù)之后的時(shí)間開始,到后續(xù)的復(fù)發(fā)或者是轉(zhuǎn)移;總生存期(OS)的具體概念則屬于最初的確診開始,到最后的死亡停止計(jì)時(shí)。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理:采用SPSS 18.0及prism7.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。在數(shù)據(jù)分析程序中包括基本描述性統(tǒng)計(jì),卡方檢驗(yàn),t檢驗(yàn),多因素分析用Cox比例風(fēng)險(xiǎn)回歸模型計(jì)數(shù)資料以率(%)表示;生存期采用Kaplan-Meier法來開展后續(xù)的計(jì)算,同時(shí)在組間分析的過程中則使用Log-rank來進(jìn)行檢驗(yàn)。代p0.05表其中的區(qū)別存在一定的統(tǒng)計(jì)學(xué)價(jià)值。結(jié)果:發(fā)病年齡:三陰性乳腺癌患者為30-73歲,中位年齡49歲;病理類型:均為浸潤性導(dǎo)管癌,TNM分期:IIA期,7例,IIB期13例,III期50例(IIIA30例,IIIB期4例,IIIC期16例),術(shù)中清除淋巴結(jié)數(shù)量2-51枚,其中淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)量1-35枚,平均7枚。轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)中ER陽性表達(dá)15例,表達(dá)率21.4%(15/70);PR陽性表達(dá)15例,表達(dá)率21.4%(15/70);ER、PR共同陽性表達(dá)9例,表達(dá)率12.9%;經(jīng)FISH確認(rèn)陽性表達(dá)4例,占全部患者5.7%。轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)組織中ER表達(dá)陰性組與陽性組的DFS生存率差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.2094,P=0.6472)轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)組織中ER陰性組與陽性組的OS生存率沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)組織中PR陰性組與陽性組的DFS生存率沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.7218,P=0.3956)轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)組織中PR陰性組與陽性組的OS生存率沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.6314,P=0.4268)。淋巴結(jié)組織陰性組與陽性組的DFS生存率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=16.2313,P0.0001)淋巴結(jié)組織陰性組與陽性組的OS生存率有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=22.0983,P=0.0001)。COX多因素回歸模型顯示,影響乳腺癌患者DFS的獨(dú)立因素為轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)數(shù)(χ2=11.7118,P=0.0006)和總淋巴結(jié)數(shù)(χ2=7.6222,P=0.0058),其余因素,如,年齡,腫瘤大小,ER、PR和的陽性表達(dá)對乳腺癌患者DFS無顯著影響。COX多因素回歸模型顯示,影響乳腺癌患者OS的獨(dú)立因素為轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)數(shù)(χ2=6.2882,P=0.0122)和陽性表達(dá)(χ2=4.4741,P=0.0344),其余因素,如,年齡,腫瘤大小,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù),ER、PR陽性表達(dá)對乳腺癌患者OS無顯著影響。免疫組化法檢測70例患者轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)中GATA3表達(dá)情況發(fā)現(xiàn),ER陽性的15例患者中GATA3陽性表達(dá)12例,陽性表達(dá)率為80%;ER陰性的患者中GATA3陽性表達(dá)11例,陽性率為20%。經(jīng)Fisher精確檢驗(yàn),二者間P0.01,有顯著差異ER陽性的轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)ER mRNA表達(dá)水平明顯較原發(fā)灶和ER陰性的轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)高(P=0.0002)ER陽性的轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)GATA3 mRNA表達(dá)水平明顯較原發(fā)灶和ER陰性的轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)高(P0.0001)RT-PCR檢測發(fā)現(xiàn)ER陽性的轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)miRNA-519a表達(dá)水平明顯較原發(fā)灶和ER陰性的轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)低(P=0.0092)在GEO數(shù)據(jù)庫、TCGA數(shù)據(jù)庫、Target scan數(shù)據(jù)庫進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)數(shù)據(jù)挖掘分析發(fā)現(xiàn)在三陰性乳腺癌中microRNA簇c19mc對ERα、GATA3有調(diào)控作用且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.0001)MDA-MB-231細(xì)胞系中轉(zhuǎn)染miRNA-519a inhibitor和NC以及GATA3質(zhì)粒及空載PCMV6并進(jìn)行RT-PCR檢測及Western blot檢測。可見在轉(zhuǎn)染miRNA-519a inhibitor之后,GATA3和ERα的表達(dá)均有所升高,且均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)在三陰性乳腺癌細(xì)胞系MDA-MB-231細(xì)胞中轉(zhuǎn)染GATA3質(zhì)粒進(jìn)行培養(yǎng),通過Western blot檢測,與轉(zhuǎn)染空載的細(xì)胞相比,MDA-MB-231細(xì)胞出現(xiàn)了極少的ERα表達(dá)結(jié)論:1、ER、PR在淋巴結(jié)與原發(fā)灶中的差異性表達(dá)對TNBC患者DFS、OS無顯著影響。2、原發(fā)灶與轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)中存在差異性表達(dá)的乳腺癌患者,組間DFS、OS差異顯著,陽性表達(dá)組復(fù)發(fā)/轉(zhuǎn)移或死亡的風(fēng)險(xiǎn)較大,生存時(shí)間短。3、腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)和總淋巴結(jié)數(shù)與TNBC患者DFS相關(guān)。4、腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)和在淋巴結(jié)中陽性表達(dá)與TNBC患者OS相關(guān)。1、ER陽性的轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)GATA3表達(dá)較ER陰性的轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)及原發(fā)灶高。2、ER陽性的轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)miRNA-519a表達(dá)水平明顯較原發(fā)灶和ER陰性的轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)低(P=0.0092)。3、組織中miRNA-519a表達(dá)水平與GATA3 mRNA表達(dá)水平呈負(fù)相關(guān),與ERαmRNA表達(dá)水平也呈負(fù)相關(guān)。4、數(shù)據(jù)挖掘及預(yù)測發(fā)現(xiàn)miRNA簇c19mc的表達(dá)水平與GATA3和ERERαmRNA表達(dá)呈明顯負(fù)相關(guān)。5、在三陰性乳腺癌細(xì)胞系MDA-MB-231中轉(zhuǎn)染miRNA-519a inhibitor和NC后,可見抑制了miRNA-519a之后,細(xì)胞中的GATA3 mRNA表達(dá)水平和ERαmRNA表達(dá)水平均有明顯變化,但Western blot提示蛋白水平GATA3和ERα均未見明顯變化。考慮僅miRNA-519a尚不足以支撐ER轉(zhuǎn)陽的全部過程。6、轉(zhuǎn)染GATA3之后,ERα由陰轉(zhuǎn)陽,但較微弱。與GATA3的升高水平完全不成正比,表明在GATA3調(diào)控ER表達(dá)的過程中,還有其他的因素的參與。7、c19mc在ER上游GATA3表達(dá)的層面以及ER表達(dá)的層面都有參與調(diào)控,從而影響了ER的最終表達(dá)水平。
【圖文】：

中國醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文3.3 無病生存率 DFS 及總生存率 OS3.3.1 轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)中 ER 陽性表達(dá)轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)組織中 ER 表達(dá)陰性組與陽性組的 DFS 生存率見表 2。Log-rank 統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示，兩組間的 DFS 生存率差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.2094，，P=0.6472）。兩組間的 DFS 生存率變化趨勢見圖 1。表 2 ER 組間 DFS 比較組別 1 年生存率 3 年生存率 5 年生存率 χ2P 值陰性組 90.91% 63.64% 63.64% 0.2094 0.6472陽性組 93.33% 66.67% 66.67%

圖 2 ER 組間 OS 生存率情況3.3.2 轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)中 PR 陽性表達(dá)轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)組織中 PR 陰性組與陽性組的 DFS 生存率見表 4。Log-rank 統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示，兩組間的 DFS 生存率差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.7218，P=0.3956）。兩組間的 DFS 生存率變化趨勢見圖 3。表 4 PR 組間 DFS 比較組別 1 年生存率 3 年生存率 5 年生存率 χ2P 值陰性組 90.91% 67.27% 67.27% 0.7218 0.3956陽性組 93.33% 53.33% 53.33%
【學(xué)位授予單位】：中國醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R737.9

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2624844