【摘要】：目的探究單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(MCT1)在增強(qiáng)乳腺癌細(xì)胞對3-溴丙酮酸(3-Br PA)敏感性中的作用,為乳腺癌治療提供新思路。方法 MTT法檢測3-Br PA對乳腺癌細(xì)胞的增殖抑制作用,溴化丙啶單染法流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡,ELISA試劑盒檢測細(xì)胞內(nèi)己糖激酶Ⅱ、乳酸脫氫酶、乳酸、三磷酸腺苷水平,Western blot檢測MCT1蛋白的表達(dá),瞬時(shí)轉(zhuǎn)染c DNA上調(diào)MCT1的表達(dá)后,檢測3-Br PA對MDA-MB-231細(xì)胞的增殖和三磷酸腺苷水平的影響。結(jié)果 3-Br PA對MDA-MB-231細(xì)胞增殖和凋亡的影響不明顯,200μmol/L作用24 h后增殖抑制率和凋亡率僅為8.72%和7.8%;但200μmol/L 3-Br PA作用MCF-7細(xì)胞24 h后其增殖抑制率和凋亡率為84.6%和82.3%。MDA-MB-231細(xì)胞的MCT1過表達(dá)后,200μmol/L 3-Br PA對細(xì)胞的增殖抑制率為72.44%,明顯高于對照組(P0.05);25、50、100、200μmol/L 3-Br PA作用細(xì)胞6 h后,細(xì)胞內(nèi)三磷酸腺苷水平和對照組相比分別為96.98%、88.44%、43.3%、27.56%。結(jié)論 MCT1能增強(qiáng)乳腺癌細(xì)胞對3-Br PA的敏感性,其機(jī)制可能是將3-Br PA轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞內(nèi),從而抑制細(xì)胞糖酵解來發(fā)揮抗腫瘤作用。
【圖文】：

學(xué)差異（P<0.05，圖1A）。在倒置顯微鏡同一視野下觀察不同濃度3-BrPA處理后的細(xì)胞形態(tài)，結(jié)果顯示：隨著藥物濃度的增加，MDA-MB-231細(xì)胞的形態(tài)和密度未見明顯改變；而MCF-7細(xì)胞的形態(tài)和密度有明顯改變（圖1B）。20μmMDA-MB-231MCF-7025501002003-BrPA(μmol/L)B025501002003-BrPA(μmol/L)025501002003-BrPA(μmol/L)Clelivbailtiy%()120100806040200MDA-MB-23124h48h72h24h48h72hMCF-7Clelivbailtiy%()120100806040200******A圖13-BrPA對MDA-MB-231和MCF-7細(xì)胞的增殖抑制作用Fig.1Inhibitoryeffectof3-BrPAonMDA-MB-231andMCF-7cells.A:Cellviability;B:Morphologicalchangesofthecells(*P<0.05vscontrol).2.23-BrPA誘導(dǎo)人乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231和MCF-7凋亡的作用流式細(xì)胞術(shù)檢測結(jié)果顯示，3-BrPA對MDA-MB-231細(xì)胞的凋亡未有明顯影響，200μmol/L的3-BrPA作用于細(xì)胞后，凋亡率僅為7.8%，3-BrPA能顯著誘導(dǎo)MCF-7細(xì)胞的凋亡，200μmol/L的3-BrPA作用于細(xì)胞后，其凋亡率為82.3%（圖2）。2.33-BrPA對人乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231和MCF-7的糖酵解酶活性的影響ELISA結(jié)果顯示，與對照組比，隨著藥物濃度的增加，，MDA-MB-231細(xì)胞內(nèi)己糖激酶Ⅱ和乳酸脫氫酶的活性未出現(xiàn)顯著下降，差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；而MCF-7細(xì)胞內(nèi)的己糖激酶Ⅱ和乳酸脫氫酶活性在100、200μmol/L時(shí)均有明顯下降，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05，圖3）。2.43-BrPA對人乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231和MCF-7中乳酸和ATP水平的影響ELISA試劑盒檢測表明，MDA-MB-231細(xì)胞內(nèi)乳酸和ATP水平隨著3-BrPA濃度的增加并未出現(xiàn)明顯降低，與對照組比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；而MCF-7細(xì)胞?

通過Westernblot法檢測發(fā)現(xiàn)，MCT1在MDA-MB-231細(xì)胞中幾乎不表達(dá)，而在MCF-7細(xì)胞中表達(dá)較高（圖5A）。為了證實(shí)MCT1對3-BrPA敏感性的影響，將MCT1cDNA轉(zhuǎn)染到MDA-MB-231細(xì)胞中（圖5B），并檢測3-BrPA對過表達(dá)MCT1的MDA-MB-231細(xì)胞的增殖抑制作用和ATP水平的影響。結(jié)果表明（圖5C、D），3-BrPA對于過表達(dá)MCT1的MDA-MB-231細(xì)胞有明顯的增殖抑制作用，同時(shí)也能顯著降低細(xì)胞內(nèi)的ATP025501002003-BrPA(μmol/L)MDA-MB-231MCF-7圖23-BrPA對MDA-MB-231和MCF-7細(xì)胞凋亡的影響Fig.2Effectof3-BrPAonapoptosisofMDA-MB-231andMCF-7cells.120100806040200HexokinaseI(%)MDA-MB-231MCF-7025501002003-BrPA(μmol/L)025501002003-BrPA(μmol/L)*****MDA-MB-231MCF-7120100806040200Lactatedehydrogenase(%)圖33-BrPA對MDA-MB-231和MCF-7細(xì)胞的糖酵解酶活性的影響Fig.3Effectof3-BrPAonglycolysisenzymeactivityinMDA-MB-231andMCF-7cells.A:HexokinaseⅡactivity;B:Lactatedehydrogenaseactivity(*P<0.05vscontrolgroup).AB120100806040200Contentoflacticacid(%)MDA-MB-231MCF-7025501002003-BrPA(μmol/L)025501002003-BrPA(μmol/L)****MDA-MB-231MCF-7120100806040200ATPlevel(%)AB圖43-BrPA影響MDA-MB-231和MCF-7細(xì)胞的乳酸和ATP含量Fig.43-BrPAaffectstheleveloflacticacid(A)andATP(B)inMDA-MB-231andMCF-7cells.*P<0.05vscontrol.http://www.j-smu.comJSouthMedUniv,2017,37(5):588-593·591·
【作者單位】： 蚌埠醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院;蚌埠醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院消化科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81372899,81603155) 安徽省教育廳重大項(xiàng)目(KJ2016SD39) 安徽省國際合作交流項(xiàng)目(1503062024) 安徽省高校省級(jí)自然科學(xué)研究項(xiàng)目(KJ2015A177) 蚌埠醫(yī)學(xué)院研究生科研創(chuàng)新計(jì)劃項(xiàng)目(Byycxz1621)~~
【分類號(hào)】：R737.9

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 李倩;何笑冬;舒小鐳;文軍;李少林;;單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1、2在乳腺浸潤性導(dǎo)管癌中的表達(dá)變化及其與病理級(jí)別之間的關(guān)系[J];中國老年學(xué)雜志;2014年10期

相關(guān)會(huì)議論文 前1條

1 常成;Linda Bergersen;高曉群;;單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白在低氧培養(yǎng)腦和乳腺腫瘤細(xì)胞膜上的密度變化[A];中國解剖學(xué)會(huì)2012年年會(huì)論文文摘匯編[C];2012年

本文編號(hào)：2532384