發(fā)布時間：2019-08-09 13:34

【摘要】：目的 :探討廣藿香酮對人膽囊癌SGC-996細胞增殖和凋亡的影響及其可能的作用機制。方法:MTT法檢測10、40、80、100和120μg/m L廣藿香酮作用24、48和72 h后,人膽囊癌SGC-996細胞的增殖情況�？寺⌒纬蓪嶒灆z測10、20和30μg/m L廣藿香酮對膽囊癌SGC-996細胞克隆形成的影響。FCM法檢測40、60和80μg/m L廣藿香酮作用48 h后,膽囊癌SGC-996細胞的凋亡及細胞周期分布。蛋白質印跡法檢測40、60和80μg/m L廣藿香酮作用膽囊癌SGC-996細胞48 h后,活化型caspase-9、活化型caspase-3、剪切型多聚ADP核糖聚合酶1[ploy(ADP-ribose)ployrnerase-1,PARP-1]、Bax、Bcl-2及cyclin D1、cyclin A、cyclin B1蛋白的表達水平。結果:10、40、80、100和120μg/m L廣藿香酮可明顯抑制人膽囊癌SGC-996細胞的增殖(P值均0.01),且呈劑量和時間依賴性(P值均0.05)。10、20和30μg/m L廣藿香酮能明顯抑制SGC-996細胞的克隆形成(P值均0.05)。40、60和80μg/m L廣藿香酮可顯著促進SGC-996細胞的凋亡(P值均0.05),并將細胞周期阻滯于S期(P值均0.05)。40、60和80μg/m L廣藿香酮處理后,SGC-996細胞中活化型caspase-9、活化型caspase-3、剪切型PARP-1蛋白表達水平及Bax/Bcl-2值均顯著上調(P值均0.05),而cyclin D1、cyclin A和cyclin B1蛋白的表達水平則顯著下調(P值均0.01)。結論 :廣藿香酮可抑制膽囊癌SGC-996細胞的增殖,并將細胞周期阻滯于S期。這一作用可能與廣藿香酮調控線粒體凋亡途徑相關蛋白及細胞周期相關蛋白的表達水平有關。
【圖文】：

（P值均＜0.05），而S期細胞所占百分比均高于對照組（P值均＜0.05）。2.4廣藿香酮調控細胞凋亡線粒體途徑中相關蛋白的表達Caspase家族、PRAP蛋白及Bcl-2家族蛋白等在細胞凋亡線粒體途徑中發(fā)揮關鍵的調控作用[9-11]。40、60和80μg/mL廣藿香酮處理SGC-996細胞48h后，應用蛋白質印跡法檢測細胞凋亡線粒體途徑中相關蛋白的表達水平。結果（圖3A）顯示，，各質量濃度廣藿香酮處理組SGC-996細胞中活化型caspase-9、活化型caspase-3、剪切型PARP-1Fig.1TheeffectsofpatchoulenoneontheabilitiesofproliferationandcolonyformationofhumangallbladdercarcinomaSGC-996cellsweredetectedbyMTT(A)andcolonyformationmethods(B),respectively.SGC-996cellswithoutanytreatmentasthecontrol.*P<0.05,**P<0.01,vsthecontrol(n=3).圖1MTT法（A）和克隆形成實驗（B）分別檢測廣藿香酮對人膽囊癌SGC-996細胞增殖和克隆形成的影響54吳瑤詩，等.廣藿香酮抑制人膽囊癌SGC-996細胞的增殖

Fig.2Theeffectsofpatchoulenoneontheapoptosis(A)andcellcycledistribution(B)ofhumangallbladdercarcinomaSGC-996cellsweredetectedbyFCMassay.SGC-996cellswithoutanytreatmentasthecontrol.*P<0.05,**P<0.01,vsthecontrol(n=3).圖2FCM法檢測廣藿香酮對人膽囊癌SGC-996細胞凋亡（A）及細胞周期分布（B）的影響蛋白表達水平及Bax/Bcl-2比值均高于對照組（P值均＜0.05）。這一結果表明，廣藿香酮可能通過上調細胞凋亡線粒體途徑中相關蛋白的表達水平，進而誘導膽囊癌SGC-996細胞的凋亡。2.5廣藿香酮調控細胞周期相關蛋白的表達40、60和80μg/mL廣藿香酮處理SGC-996細胞48h后，應用蛋白質印跡法檢測細胞周期相關蛋白的表達水平。結果（圖3B）顯示，各質量濃度廣藿香酮處理組SGC-996細胞中cyclinD1、cyclinA和cyclinB1蛋白的表達水平均顯著低于對照組（P值均＜0.01）。這一結果提示，廣藿香酮可能通過下調細胞周期相關蛋白的表達水平，將細胞周期阻滯于S期。吳瑤詩，等.廣藿香酮抑制人膽囊癌SGC-996細胞的增殖55
【作者單位】： 南昌大學第二附屬醫(yī)院消化內科;清華大學附屬北京清華長庚醫(yī)院肝膽胰中心;
【分類號】：R735.8

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本文編號：2524812