【摘要】：背景:以CD133為標(biāo)志物,利用其蛋白特異性特征可對(duì)不同的腫瘤干細(xì)胞進(jìn)行分選和研究。目的:探討干細(xì)胞表面標(biāo)志CD133在肝癌中的表達(dá)及其陽(yáng)性亞群的體外增殖特性。方法:對(duì)人肝癌MHCC97-H細(xì)胞株進(jìn)行培養(yǎng)和分選,分別獲得CD133~+與CD133~-MHCC97-H細(xì)胞,檢測(cè)CD133表達(dá)及細(xì)胞遷移侵襲能力;培養(yǎng)14 d,檢測(cè)細(xì)胞克隆形成率;培養(yǎng)7 d,檢測(cè)細(xì)胞增殖及Notch基因蛋白表達(dá)。將CD133~+與CD133~-MHCC97-H細(xì)胞分別接種于裸鼠背部皮下,4周后,檢測(cè)成瘤情況。結(jié)果與結(jié)論:(1)CD133表達(dá)與細(xì)胞克隆形成率:CD133~+MHCC97-H細(xì)胞CD133表達(dá)率、克隆形成率均顯著大于CD133~-MHCC97-H細(xì)胞(P0.05);(2)細(xì)胞增殖:CD133~+MHCC97~-H細(xì)胞培養(yǎng)3-7 d的吸光度值大于CD133~-MHCC97-H細(xì)胞(P0.05);(3)細(xì)胞遷移侵襲:CD133~+MHCC97-H細(xì)胞遷移與侵襲實(shí)驗(yàn)的透膜細(xì)胞數(shù)均顯著多于CD133~-MHCC97-H細(xì)胞(P0.05);(4)Notch基因蛋白:CD133~+MHCC97-H細(xì)胞Notch基因蛋白表達(dá)多于CD133~-MHCC97-H細(xì)胞(P0.05);(5)成瘤實(shí)驗(yàn):CD133~-MHCC97-H細(xì)胞組成瘤體積大于CD133~-MHCC97-H細(xì)胞組(P0.05);(6)結(jié)果表明:CD133陽(yáng)性肝癌細(xì)胞亞群具有較強(qiáng)的體外增殖特性,具有一定的腫瘤干細(xì)胞特性,并有較強(qiáng)的侵襲、轉(zhuǎn)移及致瘤能力。
[Abstract]:Background: using CD133 as marker, different tumor stem cells can be sorted and studied by using its protein specific characteristics. Objective: to investigate the expression of stem cell surface marker CD133 in hepatocellular carcinoma (HCC) and the proliferation characteristics of its positive subsets in vitro. Methods: human hepatocellular carcinoma MHCC97-H cell line was cultured and sorted, CD133~ and CD133~-MHCC97-H cells were obtained, CD133 expression and cell migration and invasion were detected, cell clone formation rate was detected after 14 days of culture, and cell proliferation and Notch gene protein expression were detected after 7 days of culture. CD133~ and CD133~-MHCC97-H cells were inoculated subcutaneously on the back of nude mice, and the tumorigenesis was detected 4 weeks later. Results and conclusion: (1) CD133 expression and clone formation rate: the CD133 expression rate and clone formation rate of CD133~ MHCC97-H cells were significantly higher than those of CD133~-MHCC97-H cells (P 0.05); (2). The absorbance of CD133~ MHCC97~-H cells cultured for 3 days was higher than that of CD133~-MHCC97-H cells (P 0.05). (3) Cell migration and invasion: the number of permeable cells in CD133~ MHCC97-H cell migration and invasion test was significantly higher than that in CD133~-MHCC97-H cell (P 0.05); (4). The expression of Notch gene protein in CD133~ MHCC97-H cell was higher than that in CD133~-MHCC97-H cell (P 0.05); (5). The tumor volume of CD133~-MHCC97-H cell was larger than that of CD133~-MHCC97-H cell group (P 0.05). (6) the results showed that CD133 positive HCC cell subsets had strong proliferation characteristics in vitro, had certain tumor stem cell characteristics, and had strong invasion, metastasis and tumorigenic ability.
【作者單位】： 北京大學(xué)濱海醫(yī)院、天津市第五中心醫(yī)院消化科;
【基金】：國(guó)家青年科學(xué)基金項(xiàng)目(81770221):膜聯(lián)蛋白A2亞硝基化誘導(dǎo)肝細(xì)胞癌上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化的機(jī)制~~
【分類(lèi)號(hào)】：R735.7

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本文編號(hào)：2518932