【摘要】：急性髓系白血病(Acute Myeloid Leukemia,AML)是不同的致癌因子之間復雜的相互作用產生的一類遺傳異質性疾病,基因組學的研究不但使人們發(fā)現了AML的分子發(fā)病機制,并得以發(fā)現各亞型之間巨大的多樣性。近年來,NCCN指南加入了幾個常見的基因突變來指導預后(NPM1、CEBPA、FLT3-ITD、TP53、KIT),但仍不足以將占比60%以上的中危核型AML(Intermediate-risk AML,IR-AML)很好地分層,尚需納入新的基因及突變的組合來進一步分層。此外,突變位點往往不止一個,多種基因突變亦常伴隨發(fā)生,單一突變及位點已不足以指導臨床預后�；诖�,傳統的一代測序已無法滿足需求,亟需新的技術手段來深入AML分子機制的研究及協助多突變聯合分析用于臨床。本研究我們借助二代測序(Next Generation Sequencing,NGS)平臺在220例AML中,研究了惡性血液病相關的111個基因的突變情況,并結合臨床分析探討對表型及預后分層的指導意義。首先,通過測序數據分析過濾及驗證,得到中國人特有的AML突變頻率及突變譜。然后,從兩個方面對AML發(fā)生的分子機制及突變與臨床的關系進行研究。一方面通過單突變分析不同突變之間,突變與臨床表型、療效及預后的關系,證實了不同生物學功能突變之間的協作和互斥模式,基因型和臨床表型(年齡、核型、初診白細胞計數、免疫表型等)之間的內在既定關系,以及突變對臨床療效(緩解率和生存期)的影響。另一方面通過整合多突變分析,證實NPM1、FLT3-ITD和DNMT3A突變三者通常共發(fā)生,且與高齡、初診高白細胞數、髓單核細胞形態(tài)、化療未緩解及不良預后相關;而NPM1、IDH1/2突變同時伴FLT3-ITD陰性的AML則與較低的初診白細胞數和特定的免疫表型相關,并對化療敏感。此外,根據3種不同的突變組合:NPM1或bi-CEBPA突變同時不伴有其他突變,FLT3-ITD、DNMT3A、ASXL1、TET2、TP53或PFH6突變同時不伴有CEBPA突變,及其他基因型,將中危AML進一步分為低、中、高危三個不同的預后組,使真正的中危AML患者減少三分之一。在AML的分子發(fā)病機制和生物學特征方面,本研究進行了深入分析,并證實可通過基于NGS的多種突變的不同組合將中危AML進一步預后分層,為將來制定新的危險度分層系統及實現AML的個體化精準治療奠定基礎。
[Abstract]:Acute myeloid leukemia (Acute Myeloid Leukemia,AML) is a class of heterogeneous diseases caused by complex interactions between different carcinogenic factors. Genomics studies have not only led to the discovery of the molecular pathogenesis of AML. Great diversity among subtypes was found. In recent years, several common gene mutations have been added to the NCCN guidelines to guide prognosis (NPM1,CEBPA,FLT3-ITD,TP53,KIT), but still not enough to delaminate the moderately endangered karyotype AML (Intermediate-risk AML,IR-AML), which accounts for more than 60% of the total. A combination of new genes and mutations needs to be incorporated to further delaminate. In addition, more than one mutation site is often associated with multiple gene mutations, and a single mutation or locus is no longer sufficient to guide the clinical prognosis. Therefore, the traditional generation sequencing can no longer meet the demand. It is urgent for new technical means to deepen the study of molecular mechanism of AML and to assist in multi-mutation joint analysis for clinical application. In this study, we used the second generation sequencing (Next Generation Sequencing,NGS) platform to study the mutations of 111 genes associated with malignant hematological diseases in 220 cases of AML, and discussed the guiding significance for phenotypic and prognostic stratification in combination with clinical analysis. Firstly, the Chinese-specific mutation frequency and spectrum of AML were obtained by filtering and validating the sequencing data. Then, the molecular mechanism of AML occurrence and the relationship between mutation and clinic were studied from two aspects. On the one hand, the relationship between mutations and clinical phenotype, efficacy and prognosis was analyzed by single mutation analysis, which confirmed the collaboration and mutual exclusion pattern, genotype and clinical phenotype (age, karyotype, age, karyotype) among different biological function mutations. The relationship between leukocyte count, immunophenotype, etc., as well as the effect of mutation on clinical efficacy (remission rate and survival time). On the other hand, it was confirmed that the mutation of NPM1,FLT3-ITD and DNMT3A were usually co-occurring by integrated mutagenesis analysis, and were associated with advanced age, high white blood cell count, morphology of myelomonocyte, unrelieved chemotherapy and poor prognosis. AML with NPM1,IDH1/2 mutation combined with FLT3-ITD negative was associated with lower number of newly diagnosed leukocytes and specific immunophenotypes and was sensitive to chemotherapy. In addition, according to three different mutation combinations: NPM1 or bi-CEBPA mutation with no other mutation, FLT3-ITD,DNMT3A,ASXL1,TET2,TP53 or PFH6 mutation with no CEBPA mutation, and other genotypes, the medium-risk AML was further classified as low, medium. The high-risk three different pre-treatment groups reduced the number of true moderate-risk AML patients by 1/3. In terms of molecular pathogenesis and biological characteristics of AML, this study has carried out in-depth analysis, and confirmed that the prognosis of intermediate-risk AML can be further stratified by different combinations of NGS-based mutations. It lays a foundation for the development of a new risk stratification system and the realization of individualized and accurate treatment for AML in the future.
【學位授予單位】：清華大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R733.71

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 宋紅蕾,陳鈺,于汀,李軍民,沈志祥;成人急性髓系白血病治療后的轉型[J];江蘇醫(yī)藥;2000年10期

2 王前;骨髓增生異常綜合征轉化為急性髓系白血病1例[J];白血病.淋巴瘤;2001年06期

3 溫莉娟,孟昭彥,劉利明,侯美仙,陳麗燕;染色體t(8;21)伴急性髓系白血病六例[J];中華醫(yī)學遺傳學雜志;2004年04期

4 徐升,李麗,朱子玲,張日;血管內皮生長因子在急性髓系白血病中的表達[J];中國血液流變學雜志;2004年03期

5 上海市中美白血病合作課題組;微分化急性髓系白血病四例報告[J];中華血液學雜志;2005年06期

6 夏云金,萬楚成,郭仁慈;不同病期急性髓系白血病患者紅細胞免疫功能檢測及臨床意義[J];微循環(huán)學雜志;2005年02期

7 李玉芹;戴瓊;龔武清;楊曉秋;;微分化急性髓系白血病1例[J];淮海醫(yī)藥;2007年04期

8 劉凱奇;秘營昌;李大鵬;白潔;井麗萍;卞壽庚;王建祥;;急性髓系白血病合并慢性淋巴細胞白血病一例報道及文獻復習[J];繼續(xù)醫(yī)學教育;2007年04期

9 謝曉恬;;兒童急性髓系白血病的診斷與治療[J];實用兒科臨床雜志;2011年15期

10 ;探尋白血病線索[J];世界科學;2013年08期

相關會議論文 前10條

1 李達;葛志紅;吳順杰;梁冰;;白血康為主治療難治性復發(fā)急性髓系白血病12例臨床分析[A];第六屆全國中西醫(yī)結合血液病學術會議論文匯編[C];2002年

2 范洵楠;邵曉雁;楊永公;陳兵;許景艷;孫雪梅;歐陽建;;預激療法治療難治性或復發(fā)性急性髓系白血病的療效分析[A];2005年華東六省一市血液病學學術會議暨浙江省血液病學學術年會論文匯編[C];2005年

3 華佳葉;龐纓;蔡曉東;葉絮;馮瑩;;急性髓系白血病自體造血干細胞移植后的維持化療[A];第11次中國實驗血液學會議論文匯編[C];2007年

4 王建祥;;急性髓系白血病的合理治療[A];2011年浙江省血液病學術年會暨浙江省醫(yī)學會血液病學分會成立50周年慶典論文匯編[C];2011年

5 楊文華;;急性髓系白血病中西醫(yī)結合治療策略[A];2009年浙江省中醫(yī)藥學會血液病學術年會、浙江省中西醫(yī)結合學會血液病學術年會暨國家級中西醫(yī)結合血液病新進展繼續(xù)教育學習班論文匯編[C];2009年

6 顧龍君;帖利軍;陳靜;潘慈;董璐;陳靜;葉輝;薛惠良;湯靜燕;王耀平;鄒佳音;;兒童急性髓系白血病預后因素分析[A];中華醫(yī)學會第八次全國血液學學術會議論文匯編[C];2004年

7 張曉燕;李軍民;;急性髓系白血病染色體異常與療效關系[A];中華醫(yī)學會第八次全國血液學學術會議論文匯編[C];2004年

8 陳賽娟;王月英;王蘭;周光飚;梁洋;焦波;武傳鳳;陳竺;;T(8；21)急性髓系白血病多步驟發(fā)病機制和靶向治療研究[A];第11次中國實驗血液學會議論文匯編[C];2007年

9 金潔;;急性髓系白血病的治療進展[A];2007年浙江省血液病學術年會論文匯編[C];2007年

10 金潔;;急性髓系白血病的治療進展[A];第七屆全國血液免疫學學術大會暨2008年浙江省血液病學術年會論文匯編[C];2008年

相關重要報紙文章 前3條

1 中國醫(yī)學科學院血液學研究所 王迎 王建祥;急性髓系白血病未解難題仍很多[N];健康報;2013年

2 記者 馮衛(wèi)東;加找到急性髓系白血病復發(fā)根源[N];科技日報;2014年

3 通訊員 章巍 記者 程守勤;漢黃芩苷或可治療急性髓系白血病[N];健康報;2013年

相關博士學位論文 前10條

1 丁超;核心結合因子相關急性髓系白血病的細胞和分子遺傳學異常[D];蘇州大學;2015年

2 尹甲偉;BCL11A在中國急性髓系白血病病人中的表達水平及其調控機制研究[D];蘇州大學;2015年

3 王凌波;聚二磷酸腺苷核糖聚合酶1在急性髓系白血病中的作用及機制研究[D];山東大學;2016年

4 許華;SIRT2在急性髓系白血病多藥耐藥中的作用研究[D];北京協和醫(yī)學院;2016年

5 余國攀;AML1/ETO陽性急性髓系白血病的分子生物學特征與分層診斷體系的建立[D];南方醫(yī)科大學;2016年

6 陳曉平;地塞米松抑制t(8;21)急性髓系白血病細胞增殖的研究[D];中國人民解放軍醫(yī)學院;2016年

7 王利軍;Chidamide對急性髓系白血病作用及相關機制的研究[D];中國人民解放軍醫(yī)學院;2016年

8 胡超;miR-550-1在急性髓系白血病中的抑癌作用及其機制研究[D];浙江大學;2016年

9 高娜;急性髓系白血病Galectin-3表達及其意義[D];山東大學;2016年

10 余夢霞;miR-320c在急性髓系白血病中的臨床意義及其機制研究[D];浙江大學;2017年

相關碩士學位論文 前10條

1 肖世極;EVI1基因在成人急性髓系白血病的預后分析[D];福建醫(yī)科大學;2015年

2 郝其姍;1.t(1;9)(p22;q34)形成DEK/NUP214的急性髓系白血病一例報告并文獻復習 2.急性髓系白血病IGF2BPs和Nek2的表達及預后研究[D];北京協和醫(yī)學院;2015年

3 矯麗麗;IA方案在急性髓系白血病療效及副反應的臨床研究[D];泰山醫(yī)學院;2014年

4 耿麗;MTT法體外藥敏試驗在優(yōu)化急性髓系白血病治療方案中的應用[D];河北醫(yī)科大學;2015年

5 朱穎超;FLT3-ITD基因突變急性髓系白血病的臨床及實驗室特征分析[D];鄭州大學;2015年

6 謝惠敏;t(8;21)急性髓系白血病患者FLT3基因高表達的臨床意義及機制研究[D];中國人民解放軍醫(yī)學院;2015年

7 鄭慧菲;DNA甲基化在急性髓系白血病和骨髓增生異常綜合征中的應用[D];蘇州大學;2015年

8 丁莎莎;FLT3-ITD突變數量、長度及水平對急性髓系白血病患者預后的影響[D];蘇州大學;2015年

9 馬金鳳;Tim-3在急性髓系白血病NK細胞上表達特征及臨床意義[D];蘇州大學;2015年

10 汪生;異基因造血干細胞移植治療AML1-ETO陽性急性髓系白血病M2亞型的療效分析[D];安徽醫(yī)科大學;2015年

，

本文編號：2469986