【摘要】：目的:探討Hedgehog(Hh)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路Shh及Gli1基因在多發(fā)性骨髓瘤(MM)發(fā)病機制中的可能作用及臨床意義。Hh信號通路異常被認(rèn)為在腫瘤發(fā)生、發(fā)展、浸潤與轉(zhuǎn)移以及藥物治療耐藥等方面具有重要的作用。脊椎動物中有3種Hh基因,分別為Sonic Hedgehog(Shh)、Desert Hedgehog(Dhh)、India Hedgehog(Ihh),分別編碼Shh、Dhh、Ihh蛋白,其中Shh高度保守,是目前Hh基因中研究最為廣泛的基因。Shh主要存在于胚胎期的神經(jīng)系統(tǒng)、骨、皮膚、外生殖器、四肢、造血細(xì)胞及血管內(nèi)皮細(xì)胞等組織,不僅參與神經(jīng)系統(tǒng)中線形成與維持、骨形態(tài)的發(fā)育、誘導(dǎo)造血細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞的形成,而且還參與調(diào)節(jié)不對稱的身體左右的發(fā)育形成,并調(diào)節(jié)許多器官,包括眼睛、外生殖器、毛發(fā)、胰腺、骨、肺、下丘腦、牙齒、脊髓等的形態(tài)發(fā)生。Gli為Hh信號通路核轉(zhuǎn)錄因子,定位在細(xì)胞核及胞漿中,能將轉(zhuǎn)導(dǎo)信號傳送至細(xì)胞核內(nèi)。在人類存在的3種Gli核轉(zhuǎn)錄基因Gli1、Gli2、Gli3,研究表明3種Gli蛋白在羧基末端均發(fā)現(xiàn)有激活轉(zhuǎn)錄的區(qū)域,在Gli2和Gli3的氨基端還發(fā)現(xiàn)抑制轉(zhuǎn)錄區(qū)域,所以Gli1主要起到激活轉(zhuǎn)錄的作用,而Gli2、Gli3既有激活轉(zhuǎn)錄又有抑制轉(zhuǎn)錄的功能。Gli1是Hh信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路轉(zhuǎn)錄激動子,其表達水平增強會導(dǎo)致Hh信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路活化,可直接反映Hh信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的活性狀態(tài),因而Gli1被認(rèn)為是Hh信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的可靠標(biāo)志。本課題采用RT-PCR和Western Blot兩種方法檢測Shh及Gli1在MM患者及正常對照組中的表達情況并探討Shh及Gli1在MM發(fā)病機制中的可能作用,為MM的診療提供新的思路及方法并尋找相關(guān)的理論依據(jù)。方法:1.選擇2012.12-2014.05來皖南醫(yī)學(xué)院弋磯山醫(yī)院血液內(nèi)科就診的30例初診MM患者各2ml骨髓液標(biāo)本用做試驗組(其中Ig G型20例、Ig A型8例、輕鏈型2例;D-S分期:Ⅰ期2例、Ⅱ期3例、Ⅲ期25例;A組23例、B組7例;ISS分期:Ⅰ期1例、Ⅱ期5例、Ⅲ期24例);選擇2012.07-2014.05我院20例初診的非惡性血液病患者(排除腫瘤、感染、免疫系統(tǒng)疾病等影響試驗結(jié)果疾病)骨髓液作為正常對照組。2.抽取骨髓液2ml,EDTA-2K抗凝,利用淋巴細(xì)胞分離液分離出單個核細(xì)胞,制成單個核細(xì)胞懸液,保存于-80℃冰箱待用。3.提取單個核細(xì)胞中的總RNA,用分光光度計A260/A280的比值來分析RNA樣品純度,確保比值在1.8-2.0之間,并逆轉(zhuǎn)錄成c DNA。4.選擇GAPDH為內(nèi)參照基因,Shh及Gli1核酸引物由DNASTAR軟件設(shè)計,由上海生工生物公司合成,用于Shh和Gli1 m RNA的PCR擴增。5.利用1.5%瓊脂糖凝膠電泳和Bio-Image Analysis System分析Shh和Gli1 m RNA的表達和差異。6.采用Western blot檢測Shh和Gli1蛋白表達情況。結(jié)果:Shh m RNA與Gli1 m RNA在初診MM患者中高表達,與對照組相比較差異有顯著性;Shh m RNA與Gli1 m RNA表達量在D-S分期及ISS分期中顯示:Ⅲ期明顯高于Ⅰ期或Ⅱ期,但A組和B組中無明顯差異;且Shh、Gil1與多項臨床指標(biāo)有關(guān)。結(jié)論:Shh及Gli1在MM中高表達,與對照組相比差異有顯著性,且與多項臨床指標(biāo)及分期有關(guān),經(jīng)分析可能與MM的發(fā)生、發(fā)展有一定的關(guān)系,是MM靶向治療的新關(guān)注點。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：皖南醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R733.3

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 林如峰;陸化;;多發(fā)性骨髓瘤移植后微小殘留疾病的維持治療[J];國外醫(yī)學(xué).輸血及血液學(xué)分冊;2005年06期

2 戴艷,黃東平;血管內(nèi)皮生長因子及其受體與多發(fā)性骨髓瘤[J];皖南醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2005年01期

3 劉愛軍,李利紅,陳文明;多發(fā)性骨髓瘤伴不明原因發(fā)熱(兩例報道)[J];中國癌癥雜志;2005年01期

4 包殿芝;22例多發(fā)性骨髓瘤誤診原因分析及對策[J];中國社區(qū)醫(yī)師;2005年05期

5 徐榮香,楊建民;多發(fā)性骨髓瘤的臨床分析[J];中國血液流變學(xué)雜志;2005年01期

6 陳石;;多發(fā)性骨髓瘤的實驗室結(jié)果分析[J];現(xiàn)代檢驗醫(yī)學(xué)雜志;2006年01期

7 李梅茹;耿清峰;;貌似腎臟病 實為骨髓瘤——1例多發(fā)性骨髓瘤患者的誤診經(jīng)過[J];新醫(yī)學(xué);2006年02期

8 趙應(yīng)斌;呂桂樺;丁燕玲;劉綱毅;黎華蓮;;35例多發(fā)性骨髓瘤首發(fā)癥狀觀察[J];華夏醫(yī)學(xué);2006年02期

9 張建華;傅晉翔;;胰島素樣生長因子-I在多發(fā)性骨髓瘤中的作用[J];國際輸血及血液學(xué)雜志;2006年01期

10 劉樹美;梁立莉;熊春;;多發(fā)性骨髓瘤11例誤診分析[J];廣西醫(yī)學(xué);2006年03期

相關(guān)會議論文 前10條

1 陸化;劉增艷;楊詩梅;陸世豐;李建勇;;多發(fā)性骨髓瘤患者高凝狀態(tài)的實驗研究[A];第12屆全國實驗血液學(xué)會議論文摘要[C];2009年

2 何雪峰;張日;張旭輝;;多發(fā)性骨髓瘤伴發(fā)急性粒-單核細(xì)胞性白血病一例報告——附文獻復(fù)習(xí)[A];第12屆全國實驗血液學(xué)會議論文摘要[C];2009年

3 魯云;段繼慧;李倩;于珍;王亞非;邱錄貴;;多發(fā)性骨髓瘤常見免疫球蛋白易位相關(guān)基因的表達及臨床意義研究[A];第12屆全國實驗血液學(xué)會議論文摘要[C];2009年

4 魏來;管永靖;陳科敏;;磁共振全身彌散成像對多發(fā)性骨髓瘤的輔助診斷價值初探[A];中華醫(yī)學(xué)會第16次全國放射學(xué)學(xué)術(shù)大會論文匯編[C];2009年

5 蔡真;;多發(fā)性骨髓瘤的發(fā)病與治療進展[A];2009年浙江省血液病學(xué)學(xué)術(shù)年會論文集[C];2009年

6 劉汐瑩;續(xù)薇;王欣;王軍;姚迪;;實驗室檢測在多發(fā)性骨髓瘤臨床診斷中的應(yīng)用價值[A];中華醫(yī)學(xué)會第八次全國檢驗醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議暨中華醫(yī)學(xué)會檢驗分會成立30周年慶典大會資料匯編[C];2009年

7 魏來;管永靖;陳克敏;;磁共振全身彌散成像對多發(fā)性骨髓瘤的輔助診斷價值初探[A];第十次全國中西醫(yī)結(jié)合影像學(xué)術(shù)研討會暨全國中西醫(yī)結(jié)合影像學(xué)研究與診斷學(xué)習(xí)班資料匯編[C];2009年

8 錢申賢;;多發(fā)性骨髓瘤的診治進展[A];2009年浙江省中醫(yī)藥學(xué)會血液病學(xué)術(shù)年會、浙江省中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會血液病學(xué)術(shù)年會暨國家級中西醫(yī)結(jié)合血液病新進展繼續(xù)教育學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2009年

9 張蕾;麻增林;王麗;唐華;李楠;郝磐石;趙鴻雁;張建強;;多發(fā)性骨髓瘤胸部彩色多普勒超聲及X線的對比研究[A];第十一次全國中西醫(yī)結(jié)合影像學(xué)術(shù)研討會暨全國中西醫(yī)結(jié)合影像學(xué)研究進展學(xué)習(xí)班資料匯編[C];2010年

10 ;多發(fā)性骨髓瘤的中醫(yī)臨床治療[A];全國中西醫(yī)結(jié)合血液學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2010年

相關(guān)重要報紙文章 前10條

1 李穎;我國發(fā)布首個多發(fā)性骨髓瘤診治指南[N];科技日報;2008年

2 王建新;對多發(fā)性骨髓瘤治療要有信心[N];中國消費者報;2008年

3 河南省腫瘤研究所 程心超;識別多發(fā)性骨髓瘤[N];健康報;2010年

4 天津市腫瘤醫(yī)院血液科主任 張翼澾　李運紅 胡顏 整理;多發(fā)性骨髓瘤 發(fā)病靜悄悄[N];健康報;2011年

5 北京朝陽醫(yī)院京西院區(qū)血液與腫瘤科主任醫(yī)師 黃仲夏;多發(fā)性骨髓瘤易誤診[N];健康報;2013年

6 馬飛;抗多發(fā)性骨髓瘤新藥研發(fā)踏上新征途[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2013年

7 記者 馮衛(wèi)東;多發(fā)性骨髓瘤復(fù)發(fā)機理揭開[N];科技日報;2013年

8 陳文明邋馮靜;多發(fā)性骨髓瘤 把握治療時機[N];健康報;2007年

9 李穎;萬珂為多發(fā)性骨髓瘤帶來希望[N];科技日報;2007年

10 徐述湘;多發(fā)性骨髓瘤治療進入新階段[N];中國醫(yī)藥報;2007年

，

本文編號：2463251