【摘要】：研究目的檢測VEGF-C、VEGF-D和STAT3在胃癌組織及其相應癌旁正常組織中的表達情況及差異;檢測AGS、SUN-1、KATO-III、BGC-823、MGC-803、SGC-7901和HGC-27各胃癌細胞系及GES-1正常細胞系中STAT3和VEGF-D的表達情況及差異。探討VEGF-C和VEGF-D在STAT3作用下促進淋巴管生成機制的研究。研究方法收集我院2005年1月分到2006年12月分期間行胃癌根治手術(shù),經(jīng)病理學證實為腺癌并且具有完整隨訪資料的107例患者的癌組織和相應癌旁正常組織標本。酶免疫組織化學染色檢測VEGF-C、VEGF-D和STAT3的表達情況并分析其與胃癌臨床病理特征及預后之間的關(guān)系。RT-PCR法檢測胃癌組織和相應癌旁正常組織中VEGF-C、VEGF-D和STAT3基因水平上的差異;Western Blot檢測AGS、SUN-1、KATO-III、BGC-823、MGC-803、SGC-7901和HGC-27各胃癌細胞系及GES-1正常細胞系中VEGF-C、VEGF-D和STAT3的蛋白表達及差異。STAT3在siRNA轉(zhuǎn)染之后,基因微陣列檢測VEGF-C和VEGF-D mRNA變化情況。研究結(jié)果1、在107例胃癌組織標本中,VEGF-C的陽性表達率為38.3%(41/107),明顯高于相應癌旁正常組織20.6%(22/107);VEGF-D的陽性表達率為43.9%(47/107),明顯高于相應癌旁正常組織14.0%(15/107)。STAT3的陽性表達率高達62.6%(67/107),而癌旁相應正常組織陽性表達率僅僅為8.4%(9/107)。P-STAT3的陽性表達率為38.3%(41/107),明顯癌旁高于相應正常組織1.9%(2/107)。VEGF-C、VEGF-D、STAT3及p-STAT3在胃癌組織中的表達均明顯高于癌旁正常組織,差異具有統(tǒng)計學意義(pVEGF-C=0.009,pVEGF-D=0.031,p STAT3=0.035,p p-STAT-3=0.014)。2、對107例胃癌患者進行生存分析顯示:性別、N分期,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移范圍、VEGF-C、VEGF-D、STAT-3和磷酸化STAT3陽性表達與本組胃癌患者的預后密切相關(guān),差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)。Kaplan-Meier法多生存分析顯示p-STAT3陽性表達(HR=0.431,p0.001)和N分期(HR=1.570,p0.001)是本組胃癌患者預后的獨立危險因素(p0.05)。3、在107例胃癌中,vegf-c、vegf-d和stat3基因mrna的相對表達量均明顯高于相應癌旁正常組織,差異具有統(tǒng)計學意義(2.26±0.83vs0.40±0.12,pvegf-c=0.007;1.26±0.55vs0.75±0.29,pvegf-d=0.041;3.15±1.32vs1.13±0.64,pstat3=0.004)。4、stat3基因mrna的相對表達量在ags、sun-1、kato-iii、bgc-823、mgc-803、sgc-7901和hgc-27胃癌細胞系中均明顯高于ges-1正常細胞系,差異有統(tǒng)計學意義(pags=0.014,psun=0.020,pkato-iii=0.026,pbgc-823=0.023,pmgc-803=0.019,psgc-7901=0.018,phgc-27=0.014)。在ags、sun-1、kato-iii、bgc-823、mgc-803、sgc-7901和hgc-27胃癌細胞系中,vegf-d基因mrna的相對表達量亦均明顯高于ges-1正常細胞系,差異有統(tǒng)計學意義(pags=0.012,psun=0.025,pkato-iii=0.017,pbgc-823=0.015,pmgc-803=0.009,psgc-7901=0.014,phgc-27=0.007)。而vegf-d基因mrna在各胃癌細胞系中的相對表達量未見明顯高于ges-1正常細胞系,差異無統(tǒng)計學意義(pags=0.064,psun=0.435,pkato-iii=0.108,pbgc-823=0.058,pmgc-803=0.235,psgc-7901=0.083,phgc-27=0.072)。5、相關(guān)性分析顯示胃癌轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)個數(shù)與vegf-c、vegf-d、stat3、p-stat3的表達顯著相關(guān)(pvegf-c=0.062、pvegf-d=0.034、pstat3=0.021、pp-stat3=0.004)。其中stat3的表達與vegf-c(p=0.106)、vegf-d(p=0.025)的表達顯著相關(guān);而p-stat3的表達只與vegf-d的表達相關(guān)。在107胃癌患者mrna相對表達量的相關(guān)分析中,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)目與stat3mrna(p=0.018),vegf-cmrna(p=0.045)和vegf-dmrna(p=0.037)的相對表達量均顯著相關(guān)。進一步分析發(fā)現(xiàn)stat3mrna的相對表達量與vegf-dmrna的相對表達量亦顯著相關(guān)(p=0.003)。6、sirna干擾stat3的表達后,vegf-c和vegf-d在hgc-27胃癌細胞中的蛋白表達量相對于對照組分別減少20%-30%和70%-80%。經(jīng)rna微陣列證實,在sirna干擾stat3基因表達的hgc-27胃癌細胞中,5295基因的表達顯著減少,vegf-c和vegf-d的表達也顯著下降。在sirna干擾后的hgc-27胃癌細胞vegf-c的rna下降量為對照組的1.036倍,而vegf-d的下降量則為對照組的5.568倍。實驗結(jié)論1、VEGF-C、VEGF-D和STAT3在胃癌組織和各胃癌細胞系中的表達均明顯高于相應癌旁正常組織。2、性別、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移個數(shù)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移范圍、VEGF-C蛋白表達、VEGF-D蛋白表達、STAT3蛋白表達和p-STAT3蛋白陽性表達對本研究中胃癌患者的預后有影響。p-STAT3蛋白表達和N分期是本組胃癌患者預后的獨立危險因素。3、在AGS、SUN-1、KATO-III、BGC-823、MGC-803、SGC-7901和HGC-27胃癌細胞系中,VEGF-C、VEGF-D和STAT3在蛋白水平和mRNA水平的表達均明顯高于GES-1胃正常細胞系。4、胃癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移個數(shù)與VEGF-C、VEGF-D、STAT3、p-STAT3在蛋白水平和mRNA表達水平上均顯著相關(guān)。VEGF-C、VEGF-D在蛋白及mRNA表達水平上與STAT3的表達亦均顯著相關(guān)。5、干擾STAT3的表達后,VEGF-C、VEGF-D在蛋白及mRNA表達水平上均下調(diào),尤以VEGF-D下調(diào)最顯著。STAT3是通過上調(diào)VEGF-D的表達來促進淋巴管的生成進而導致淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移。
[Abstract]:......
【學位授予單位】：天津醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R735.2

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 ;STAT-3 correlates with lymph node metastasis and cell survival in gastric cancer[J];World Journal of Gastroenterology;2010年42期

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本文編號：2387486