【摘要】：目的構(gòu)建靶向作用于小鼠肝前體細(xì)胞的動(dòng)物模型,研究乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)對(duì)肝前體細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)的影響。方法每周2次給予昆明小鼠2 m L/L四氯化碳灌胃,4周后行經(jīng)門(mén)靜脈注射穩(wěn)定表達(dá)HBx的肝前體細(xì)胞和穩(wěn)定表達(dá)空載體的肝前體細(xì)胞同時(shí)切除部分肝臟。術(shù)后繼續(xù)每周2次進(jìn)行灌胃,并分別于術(shù)后3、5、7、14、21、28 d,處死小鼠取肝臟標(biāo)本;實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)小鼠肝組織HBx的mRNA水平、免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)肝組織中外源性細(xì)胞的存活。實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)上皮鈣黏素(E-cadherin)、神經(jīng)鈣黏素(N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)和細(xì)胞角蛋白18(CK18)mRNA水平,Western blot法檢測(cè)E-cadherin、N-cadherin、vimentin、CK18蛋白水平。結(jié)果免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示,術(shù)后肝臟組織明顯有外源性細(xì)胞存活.隨注射時(shí)間延長(zhǎng),肝組織HBx的含量增加,表達(dá)區(qū)域增大;實(shí)時(shí)熒光定量PCR和Western blot結(jié)果均顯示過(guò)表達(dá)HBx能夠使小鼠肝組織中E-cadherin、CK18水平降低,而N-cadherin、vimentin的水平增加。結(jié)論動(dòng)物模型證實(shí)HBx在肝前體細(xì)胞EMT過(guò)程中起著重要的調(diào)控作用。
[Abstract]:Objective to study the effect of hepatitis B virus X protein (HBx) (HBV X protein (HBx) on the epithelial mesenchymal transformation (EMT) of liver precursor cells in mice. Methods Kunming mice were given 2 mL / L carbon tetrachloride intragastrically twice a week. After 4 weeks, liver precursor cells with stable expression of HBx and liver precursor cells with stable empty expression vector were injected through portal vein at the same time. The mice were sacrificed for 28 days after operation, the mRNA level of HBx in liver tissue was measured by real-time quantitative PCR, and the survival of exogenous cells in liver tissue was detected by immunohistochemical staining. E-cadherin (E-cadherin), neuronal cadherin (N-cadherin), vimentin (vimentin) (vimentin) and cytokeratin 18 (CK18) mRNA were detected by real-time fluorescence quantitative PCR. Results Immunohistochemical staining showed that exogenous cells survived obviously in liver tissue after operation. The results of real-time fluorescence quantitative PCR and Western blot showed that overexpression of HBx could decrease the level of E-cadherin CK18 and increase the level of N-cadherin vimentin in liver tissue of mice. Conclusion HBx plays an important regulatory role in the EMT process of liver precursor cells in animal models.
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)病理生理學(xué)教研室;重慶醫(yī)科大學(xué)分子醫(yī)學(xué)與腫瘤研究中心;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金青年項(xiàng)目(81201679)
【分類(lèi)號(hào)】：R735.7

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8 謝尚U，

本文編號(hào)：2344154