【摘要】：目的探討miR-214對Hep G2細胞增殖及細胞周期的影響。方法 Realtime-PCR法檢測肝癌細胞株SMMC-7721、Hep G2、SK-Hep-1、Huh 7、Hep3B及正常肝細胞L-02中miR-214表達量,并利用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染miR-214NC及miR-214 mimics,采用Realtime-PCR法檢測轉(zhuǎn)染效果;采用MTT法、流式細胞術(shù)分別檢測miR-214對肝癌細胞活力、凋亡及細胞周期影響;蛋白印跡(WB)檢測miR-214對肝癌細胞中細胞周期蛋白D1(cyclin D1),細胞周期蛋白依賴性激酶4(CDK4),生存素(survivin)及增值細胞核抗原(PCNA)表達影響。結(jié)果 miR-214在肝癌細胞SMMC-7721、SK-Hep-1、Huh 7、Hep3B、Hep G2中表達量[分別為(1.25±0.10)、(1.43±0.10)、(0.95±0.09)、(0.98±0.01)、(0.82±0.08)]明顯低于正常肝細胞L-02(2.52±0.23),其中Hep G2中miR-214表達量最低。miR-214 mimics組Hep G2細胞中miR-214表達量(2.38±0.23)明顯高于miR-214 NC組(0.83±0.08),miR-214mimics組Hep G2細胞活力(0.37±0.03)明顯低于miR-214 NC組(0.78±0.07);與miR-214 NC組比較,miR-214mimics組Hep G2細胞凋亡率明顯升高,細胞周期阻滯于G1期,cyclin D1、CDK4、survivin及PCNA表達量下調(diào),差異均有統(tǒng)計學意義(P0.01)。結(jié)論上調(diào)miR-214表達可抑制肝癌細胞增殖,其機制可能與調(diào)控細胞周期相關(guān)蛋白表達水平有關(guān)。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of miR-214 on the proliferation and cell cycle of Hep G2 cells. Methods Realtime-PCR assay was used to detect the expression of miR-214 in hepatoma cell line SMMC-7721,Hep G2SK-Hep-1Huh7Hep3B and normal hepatocytes L-02, and the transfection effect was detected by miR-214NC and miR-214 mimics, transfection with liposome, and the viability of hepatocarcinoma cells was detected by MTT assay and flow cytometry, respectively. The effects of miR-214 on the expression of cyclin D1 (cyclin D1), cyclin dependent kinase 4 (CDK4), survivin (survivin) and proliferating cell nuclear antigen (PCNA) were detected by Western blot (WB). Results the expression of miR-214 in hepatoma cell line (1.25 鹵0.10), (1.43 鹵0.10), (0.95 鹵0.09), (0.98 鹵0.01), (0.82 鹵0.08) was significantly lower than that in normal hepatocyte L-02 (2.52 鹵0.23). The expression of miR-214 in miR-214 mimics group was significantly higher than that in miR-214 NC group (2.38 鹵0.23), and the activity of Hep G2 in miR-214mimics group was significantly higher than that in miR-214 NC group. (0.37 鹵0.03) was significantly lower than that in miR-214 NC group (0.78 鹵0.07), and the apoptosis rate of Hep G2 cells in miR-214mimics group was significantly higher than that in miR-214 NC group. The cell cycle was blocked in G1 phase, and the expression of cyclin D1 CDK4 and PCNA was down-regulated (P0.01). Conclusion Up-regulation of miR-214 expression can inhibit the proliferation of hepatoma cells, and its mechanism may be related to the regulation of cell cycle related protein expression level.
【作者單位】： 牡丹江醫(yī)學院第二附屬醫(yī)院肝膽外科;
【分類號】：R735.7

【參考文獻】

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