本文選題：β-細辛醚 + 有氧糖酵解�。� 參考：《南京中醫(yī)藥大學》2017年碩士論文

【摘要】：研究目的:觀察β-細辛醚對不同分化程度胃癌細胞株體外化療增敏作用;同時探討β-細辛醚對胃癌PDKs表達的調(diào)控與化療增敏機制的相關(guān)性。研究方法:·1、采用MTT法觀察β-細辛醚、順鉑單獨與聯(lián)合用藥對多種胃癌細胞株的增殖抑制作用,利用中效原理計算合用指數(shù)來判定β-細辛醚和順鉑的協(xié)同增敏作用;使用Real-time PCR方法檢測β-細辛醚、順鉑單獨與聯(lián)合作用人胃癌細胞后對化療藥物相關(guān)基因ERCC1、BRCA1表達的改變。2、使用乳酸脫氫酶檢測試劑盒檢測不同濃度β-細辛醚(120 μg·mnL-1,60μg·mL-1,30μg·mL-1,15μg·ML-1)以及在 Cocl2誘導(200mM24h)的缺氧環(huán)境和 H202(100mM1h)誘導的有氧環(huán)境下對胃癌細胞乳酸脫氫酶生成量的影響,以明確β-細辛醚對PDK1活性的影響。3、運用AnnexinV/PI雙染法研究在Coc12誘導(200mM 24h)的缺氧環(huán)境和H202(1OOmM 1h)誘導的有氧環(huán)境下β-細辛醚對不同分化程度的人胃癌細胞株凋亡的誘導作用;同時利用流式細胞儀檢測對人胃癌細胞株的周期阻滯效應。4、使用RT-PCR檢測β-細辛醚對胃癌細胞有氧糖酵解相關(guān)基因PDK1、PDK4、HIF-1α、c-myc基因的影響。5、運用we3tern blot檢測β-細辛醚對有氧糖酵解相關(guān)蛋白PDK1、0-PDK1、PDK4、HIF-1 α、STAT5、p-STAT5蛋白表達的影響。研究結(jié)果:1、β-細辛醚作用于不同分化水平的胃癌細胞株對化療藥物順鉑均有化療增敏作用,其中對MGC-803細胞株的化療增敏效果最佳;3-細辛醚可以下調(diào)ERCC1、BRCA1基因表達。2、不同濃度的β-細辛醚作用于胃癌細胞MGC-803、SGC-7901、MKN-28后,細胞的乳酸脫氫酶含量受到抑制,且呈濃度相關(guān);不同分化程度胃癌細胞之間沒有相關(guān)性,缺氧條件下,β-細辛醚作用后的胃癌細胞LDH表達量明顯下降,結(jié)果具有統(tǒng)計學意義。3、β-細辛醚在缺氧及有氧條件下均可以誘導胃癌細胞株MGC-803、SGC-7901、MKN-28凋亡,能阻滯胃癌細胞于G2/M期,且β-細辛醚作用后呈現(xiàn)明顯亞二倍體峰,提示其有誘導凋亡的作用。4、β-細辛醚在缺氧條件下調(diào)胃癌細胞株P(guān)DK1、PDK4、HIF-1 α、c-myc基因的表達。5、β-細辛醚在缺氧條件下可以抑制胃癌細胞株P(guān)DK1、p-PDK1、PDK4、HIF-1α、STAT5、p-STAT5蛋白表達的影響。研究結(jié)論:1、β-細辛醚對不同分化水平的胃癌細胞株均有增殖抑制的作用,且呈濃度相關(guān)性;β-細辛醚在一定濃度范圍內(nèi)對順鉑化療有化療增敏的作用,其化療增敏作用可能與抑制ERCC1、BRCA1基因表達有關(guān)。2、β-細辛醚可以降低胃癌細胞乳酸脫氫酶生成量,呈濃度依賴性;β-細辛醚能降低缺氧條件下胃癌細胞株的乳酸脫氫酶含量,作用類似于H2O2組,提示其抑制腫瘤機制可能與抑制腫瘤細胞有氧糖酵解相關(guān)。3、缺氧條件下β-細辛醚可以誘導胃癌細胞株凋亡,將阻滯胃癌細胞于細胞周期的G2/M期,同時實驗表明β-細辛醚作用于不同分化程度胃癌后出現(xiàn)明顯亞二倍體峰,提示其有誘導凋亡的作用。4、β-細辛醚能有誘導胃癌細胞凋亡,其作用可能與抑制PDK1、PDK4、HIF-1 α、c-myc基因的表達,下調(diào)PDK1、p-PDK1、PDK4、HIF-1α、STAT5、p-STAT5蛋白表達有關(guān)。上述基因及蛋白與糖酵解相關(guān),進一步提示β-細辛醚抑制胃癌細胞增殖,與順鉑化療增敏作用可能與其抑制腫瘤生長過程中有氧糖酵解相關(guān)。
[Abstract]:The effects of 尾 - Asarum on the proliferation of gastric cancer cell lines were studied by MTT assay . The effects of 尾 - Asarum on the expression of PDK1 , PDK4 , PDK4 , HIF - 1偽 , STAT5 and p - STAT5 in gastric cancer cells were determined by MTT assay . The expression of PDK1 , PDK4 , PDK4 , HIF - 1偽 , STAT5 , p - STAT5 protein in gastric cancer cell lines could be inhibited by 尾 - Asarum . The results showed that 尾 - asocine could inhibit the expression of PDK1 , PDK4 , PDK4 , HIF - 1偽 , STAT5 and p - STAT5 in gastric cancer cells .
【學位授予單位】：南京中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R735.2

【參考文獻】

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本文編號：2020538