本文選題：肝細(xì)胞癌 + Cripto-1　； 參考：《安徽醫(yī)科大學(xué)》2015年碩士論文

【摘要】：[背景]肝癌是常見的消化系統(tǒng)腫瘤,低手術(shù)切除率和術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移使其成為病死率最高的惡性腫瘤之一,所以對肝癌侵襲轉(zhuǎn)移方面的研究成為當(dāng)前肝癌研究的熱點(diǎn)。Cripto-1基因是一種在胚胎干細(xì)胞中表達(dá)并對其維持自我更新能力至關(guān)重要的調(diào)控基因。最新研究發(fā)現(xiàn)Cripto-1的表達(dá)在多種腫瘤中重新出現(xiàn),并調(diào)控腫瘤的增殖、侵襲、血管生成和EMT (epithelial-mesenchymal transition,內(nèi)皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化)等重要事件。因此,研究Cripto-1對肝癌侵襲轉(zhuǎn)移的影響,對探索肝癌的惡性進(jìn)展機(jī)制以及尋找肝癌治療的新靶點(diǎn)具有重要意義。[目的] (1)分析Cripto-1蛋白和mRNA在不同轉(zhuǎn)移潛能人肝癌細(xì)胞株、肝癌及癌旁組織中的表達(dá)水平,探討Cripto-1與肝癌侵襲轉(zhuǎn)移能力之間的關(guān)系。(2)檢測肝癌組織中Cripto-1蛋白的表達(dá),分析Cripto-1蛋白表達(dá)水平與肝癌臨床病理特征的相關(guān)性,探討Cripto-1在肝癌的惡性進(jìn)展和侵襲轉(zhuǎn)移過程中的作用。(3)檢測Cripto-1過表達(dá)肝癌細(xì)胞株中EMT相關(guān)標(biāo)志物和細(xì)胞運(yùn)動能力的變化,探討Cripto-1促進(jìn)肝癌侵襲轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制。[方法] (1)通過Western Blot、qPCR (Real-time Quantitative PCR,實(shí)時定量PCR)方法,檢測不同轉(zhuǎn)移潛能人肝癌細(xì)胞株、肝癌及癌旁組織中Cripto-1的表達(dá)水平,分別從蛋白和mRNA水平比較其表達(dá)水平與肝癌侵襲轉(zhuǎn)移間的關(guān)系。(2)通過免疫組織化學(xué)染色檢測肝癌患者組織中Cripto-1蛋白的表達(dá)并探討其表達(dá)與肝癌臨床病理特征之間的關(guān)系。(3)通過重組慢病毒轉(zhuǎn)染技術(shù)構(gòu)建Cripto-1過表達(dá)的人肝癌Huh7細(xì)胞株,并通過Transwell遷移和侵襲實(shí)驗檢測Cripto-1過表達(dá)對Huh7細(xì)胞株的運(yùn)動能力的影響。(4)通過qPCR、Westren Blot方法檢測Cripto-1過表達(dá)對Huh7細(xì)胞株EMT標(biāo)志物表達(dá)的影響。[結(jié)果] (1)與癌旁組織相比,肝癌組織中Cripto-1的蛋白和mRNA表達(dá)水平均明顯升高。不同轉(zhuǎn)移潛能的人肝癌細(xì)胞株中Cripto-1表達(dá)量存在明顯差異。低轉(zhuǎn)移潛能的人肝癌細(xì)胞株Cripto-1低表達(dá),高轉(zhuǎn)移潛能人肝癌細(xì)胞株Cripto-1高表達(dá)。(2)免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示：Cripto-1在肝癌組織中的表達(dá)主要定位于胞漿中,Cripto-1在肝癌組織中的高表達(dá)率為64.6%(53/82),明顯高于正常肝組織中的0%(0/10)。Cripto-1在肝癌組織中的高表達(dá)與腫瘤分化程度、血管侵犯和轉(zhuǎn)移狀態(tài)有關(guān)(P0.05),而與患者性別、年齡、血清AFP水平、HBsAg狀態(tài)、肝硬化及腫瘤的大小、數(shù)目、包膜情況和TNM分級等無明顯相關(guān)性(P0.05)。(3) Transwell小室遷移侵襲實(shí)驗結(jié)果顯示：Cripto-1過表達(dá)Huh7細(xì)胞株穿過Transwell小室的細(xì)胞數(shù)目明顯高于空白對照組和空載病毒轉(zhuǎn)染組Huh7細(xì)胞株(p0.05)。(4) Cripto-1過表達(dá)Huh7細(xì)胞株與空載病毒轉(zhuǎn)染組Huh7細(xì)胞株相比EMT標(biāo)志物表達(dá)情況存在明顯差異。Cripto-1過表達(dá)Huh7細(xì)胞株中上皮細(xì)胞標(biāo)志物E-Cadherin表達(dá)量降低,而間質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志物N-Cadherin和Vimentin表達(dá)量升高。[結(jié)論]Cripto-1在肝癌中高表達(dá),并且其表達(dá)量與肝癌的侵襲轉(zhuǎn)移能力呈正相關(guān)。Cripto-1過表達(dá)Huh7細(xì)胞株表現(xiàn)出EMT趨勢,并且獲得了更強(qiáng)的侵襲轉(zhuǎn)移能力,Cripto-1可能通過促進(jìn)肝癌的EMT進(jìn)程使其獲得更強(qiáng)的侵襲轉(zhuǎn)移能力。
[Abstract]:Objective : To investigate the relationship between the expression level of Crispr - 1 protein and its expression level in hepatocellular carcinoma ( HCC ) , and to investigate the relationship between the expression level of Crispr - 1 and the invasion and metastasis of liver cancer . ( 2 ) The expression of Crispr - 1 in HCC tissues was significantly higher than that in normal liver tissues ( P 0.05 ) .
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R735.7

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 李雁,湯釗猷,葉勝龍,劉銀坤,陳潔,薛瓊,黃曉武,陳軍,鮑衛(wèi)華,楊炯,高東梅;體內(nèi)連續(xù)篩選法建立自發(fā)性肺轉(zhuǎn)移人肝癌細(xì)胞系[J];中華醫(yī)學(xué)雜志;2002年09期

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本文編號：1900113