發(fā)布時間：2018-05-11 05:28

  本文選題：TK肽 + 納米載體　； 參考：《微生物學通報》2017年10期

【摘要】：【目的】獲得具有結腸靶向的納米載體�！痉椒ā坎捎肧OE-PCR方法將具有結腸靶向的TK肽序列插入到豬細小病毒(PPV)結構蛋白VP2的環(huán)2和環(huán)4區(qū)域得到TK-vp2(?vp2)基因,在Bac-to-Bac?桿狀病毒表達系統(tǒng)中構建、表達和自組裝。【結果】通過SOE-PCR方法擴增獲得?vp2基因,在Bac-to-Bac?桿狀病毒表達系統(tǒng)中構建得到Bacmid-?vp2,經(jīng)脂質(zhì)體轉染至Sf9昆蟲細胞得到重組桿狀病毒。直接免疫熒光試驗、SDS-PAGE和Western blot檢測結果表明?VP2蛋白在Bac-to-Bac?桿狀病毒表達系統(tǒng)中獲得融合表達,目的蛋白約70 k D;透射電子顯微鏡結果顯示?VP2能自組裝形成病毒樣顆粒(TK-VLPs),直徑范圍在22 nm-30 nm。【結論】獲得納米載體TK-VLPs,為進一步研究其作為結腸靶向的納米載體奠定物質(zhì)基礎。
[Abstract]:[objective] to obtain colon-targeting nanocarriers. [methods] the colon-targeted TK peptide sequence was inserted into the ring 2 and ring 4 region of porcine parvovirus (PPV) structural protein VP2 by SOE-PCR method, and the TK-vp2 / VP2) gene was obtained in Bac-to-Bac. The baculovirus expression system was constructed, expressed and self-assembled. [results] VP2 gene was amplified by SOE-PCR. Bacmid-VP2 was constructed from baculovirus expression system and transfected into Sf9 insect cells by liposome to obtain recombinant baculovirus. The results of SDS-PAGE and Western blot showed that VP2 protein was detected in Bac-to-Bac. Fusion expression was obtained in baculovirus expression system. The results of transmission electron microscopy (TEM) showed that VP2 could self-assemble into virus-like particles TK-VLPsN with a diameter range of 22 nm-30 nm. [conclusion] Nano-carrier TK-VLPswas obtained, which laid a solid foundation for further study of its role as colon-targeted nano-carrier.
【作者單位】： 黑龍江八一農(nóng)墾大學;哈爾濱醫(yī)科大學;
【基金】：黑龍江八一農(nóng)墾大學研究生創(chuàng)新科研資助項目(No.YJSCX2016-Y22) 黑龍江省自然基金-青年項目(No.QC2013C029) 哈爾濱醫(yī)科大學伍連德基金(No.WLD-QN1111)~~
【分類號】：Q78;R73-36

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本文編號：1872590