表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)對胃癌細(xì)胞侵襲能力的影響研究
發(fā)布時間:2018-05-02 13:23
本文選題:EGCG + 胃癌; 參考:《蘭州大學(xué)》2015年碩士論文
【摘要】:目的:通過本課題的研究明確EGCG對胃癌細(xì)胞侵襲性及MMP-2、MMP-9、 VEGF表達(dá)的影響從而為進(jìn)一步明確胃癌侵襲機(jī)制奠定基礎(chǔ)同時也為早期控制胃癌侵襲尋求潛在的治療靶點(diǎn)。方法:以正常不加:EGCG的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)的MKN-45、SGC-7901胃癌細(xì)胞作為對照組。以含有不同濃度EGCG的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)的胃癌細(xì)胞作為實(shí)驗組。首先實(shí)驗組以含有不同濃度(0、3.13、6.25、12.5、25、50、100、200μM) EGCG的完全培養(yǎng)基在37℃下培養(yǎng)MKN-45、SGC-7901胃癌細(xì)胞24h,采用CCK-8法分別測定兩株胃癌細(xì)胞在不同濃度EGCG作用下的抑制率。然后計算出兩種胃癌細(xì)胞的半數(shù)抑制濃度,并把半數(shù)抑制濃度作為我們后續(xù)實(shí)驗的工作濃度。用Transwell侵襲實(shí)驗測定在37℃環(huán)境中胃癌細(xì)胞在選定的工作濃度EGCG作用24h后的侵襲能力。用qRT-PCR測定上述細(xì)胞的MMP-9, MMP-2及VEGF的mRNA表達(dá)水平。結(jié)果:1、采用CCK-8法分別測定兩種胃癌細(xì)胞在不同濃度EGCG作用下的抑制率。MKN-45細(xì)胞在EGCG濃度分別為0、3.13、6.25、12.5、25、50、100、200μM時相對應(yīng)的抑制率分別為:0.0%、11.1%、15.2%、21.1%、36.4%、48.4%、59.4%、63.2%。SGC-7901細(xì)胞在EGCG濃度分別為0、3.13、6.25、12.5、25、50、100、200μM時相對應(yīng)的抑制率分別為:0.0%、7.3%、12.5%、19.2%、29.6%、35.7%、52.9%、59.4%。進(jìn)而計算兩種胃癌細(xì)胞在EGCG作用下的IC50值。采用SPSS19.0進(jìn)行數(shù)據(jù)分析得:SGC-7901 IC50=100.94μM, MKN-45 IC50=67.03μM。2、用Transwell侵襲實(shí)驗測定與工作濃度EGCG,37℃環(huán)境中共培養(yǎng)24h的胃癌細(xì)胞侵襲能力。實(shí)驗組MKN-45細(xì)胞與對照組MKN-45細(xì)胞相比侵襲能力明顯減弱(40.24±5.78%vs 100.00±12.34%,P0.05)。實(shí)驗組SGC-7901細(xì)胞與對照組SGC-7901細(xì)胞相比侵襲能力明顯減弱(50.56±8.13% vs 100.00±19.47%,P0.05)。3、用qRT-PCR測定與工作濃度EGCG,37℃環(huán)境中共培養(yǎng)24h的胃癌細(xì)胞的MMP-9、MMP-2及VEGF的mRNA水平的變化。實(shí)驗組MKN-45細(xì)胞MMP-9、MMP-2、VEGF mRNA相對對照組的表達(dá)量分別是:0.45±0.04,0.31±0.02,0.39±0.02。對照組MMP-9、MMP-2、VEGF的表達(dá)量為1.00±0.03,1.00±0.05,1.00±0.07。實(shí)驗組相對對照組表達(dá)量明顯降低,P0.05。實(shí)驗組SGC-7901細(xì)胞MMP-9、MMP-2、VEGF mRNA相對對照組的表達(dá)量分別是:0.42±0.03,0.30±0.07,0.25±0.06。對照組MMP-9、MMP-2、VEGF mRNA表達(dá)量為1.00±0.05,1.00±0.08,1.00±0.07。實(shí)驗組相對對照組表達(dá)量明顯降低,P0.05。結(jié)論:EGCG可抑制胃癌細(xì)胞的侵襲能力,其機(jī)制可能與MMP-9、MMP-2及VEGF的表達(dá)下降有關(guān)。
[Abstract]:Objective: to investigate the effect of EGCG on the invasion of gastric cancer cells and the expression of MMP-2 MMP-9, VEGF in gastric cancer cells, so as to lay a foundation for further understanding the invasion mechanism of gastric cancer and to seek a potential therapeutic target for early control of gastric cancer invasion. Methods: MKN-45 SGC-7901 gastric cancer cells were cultured in normal normal medium without EGCG as control group. Gastric cancer cells were cultured on complete culture medium containing different concentrations of EGCG as experimental group. MKN-45 SGC-7901 gastric cancer cells were cultured at 37 鈩,
本文編號:1834101
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