發(fā)布時間：2018-04-27 11:23

  本文選題：鋅指結(jié)構(gòu)蛋白 + 可變剪接體��； 參考：《中國腫瘤生物治療雜志》2017年12期

【摘要】：目的:探討鋅指結(jié)構(gòu)蛋白148(zinc finger protein 148,ZNF 148)基因的兩種可變剪接體對結(jié)腸癌細胞侵襲轉(zhuǎn)移能力的影響及相關(guān)作用機制。方法:RT-PCR檢測人結(jié)腸癌SW480細胞中的ZNF148兩種剪接體的表達,構(gòu)建ZNF148干擾載體和過表達載體,將構(gòu)建成功的ZNF148干擾載體及過表達載體轉(zhuǎn)染至人結(jié)腸癌SW480細胞中,分為ZNF148~(FL)-siRNA組、ZNF148~(FL)-Over express組、ZNF148~(ΔN)-siRNA組、ZNF148~(ΔN)-Over express組、Control siRNA組、Control Over express組以及Normal control組。RTPCR檢測各組細胞m RNA表達水平,MTT、Transwell、劃痕實驗和流式細胞術(shù)檢測人結(jié)腸癌SW480細胞的增殖、體外細胞侵襲、遷移和凋亡情況。結(jié)果:RT-PCR擴增獲得全長分別為2 385 bp以及2 004 bp的ZNF148~(FL)與ZNF148~(ΔN)兩種不同剪接體產(chǎn)物。ZNF148~(FL)-siRNA組ZNF148~(FL)的表達量明顯下降,但ZNF148~(ΔN)的表達水平上升;ZNF148~(FL)-Over express組ZNF148~(FL)的表達量明顯上升,而ZNF148~(ΔN)的表達水平下降(均P0.05)。ZNF148~(ΔN)-siRNA組的ZNF148~(ΔN)表達水平明顯下降,但ZNF148~(FL)的表達水平上升;ZNF148~(ΔN)-Over express組ZNF148~(ΔN)表達水平升高,而ZNF148~(FL)的表達水平下降(均P0.05)。ZNF148~(FL)-Over express組及ZNF148~(ΔN)-siRNA組SW480細胞增殖能力增強,而ZNF148~(FL)-siRNA組和ZNF148~(ΔN)-Over express組SW480細胞增殖能力下降(均P0.05)。ZNF148~(FL)-siRNA組和ZNF148~(ΔN)-Over express組穿膜SW480細胞數(shù)量及遷移活性顯著下降,而凋亡率顯著上調(diào);ZNF148~(FL)-Over express組和ZNF148~(ΔN)-siRNA組穿膜細胞數(shù)及遷移活性顯著上調(diào),而凋亡率顯著下調(diào)(均P0.05)。結(jié)論:ZNF148~(FL)表現(xiàn)為增加結(jié)直腸癌細胞的增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移活力,而ZNF~(ΔN)作用與之相反,ZNF148的ZNF148~(FL)與ZNF~(ΔN)兩種剪接體對于結(jié)直腸癌的惡性生物活性可能表現(xiàn)出了互相拮抗作用。
[Abstract]:Aim: to investigate the effect of two variable splicing bodies of zinc finger structural protein 148(zinc finger protein 148on the invasion and metastasis of colon cancer cells and its related mechanism. Methods the ZNF148 interference vector and overexpression vector were constructed by detecting the expression of ZNF148 splicing in human colon cancer SW480 cell line by using 1: RT-PCR, and the successfully constructed ZNF148 interference vector and overexpression vector were transfected into human colon cancer SW480 cell line. ZNF148~(FL)-siRNA group was divided into two groups: ZNF148FL-Over express group (螖 N)-siRNA group) control siRNA group (螖 N)-Over express group) control Over express group and Normal control group .RT-PCR was used to detect the expression of m RNA in the cells of each group. The proliferation, invasion, migration and apoptosis of SW480 cells in human colon cancer were detected by scratch test and flow cytometry. Results the results showed that the expression of ZNF148Fl (2 385 BP and 2 004 BP) and ZNF1488 (螖 N) splicing products. The expression of ZNF148FL-siRNA group was significantly decreased, but the expression level of ZNF148FL-Over express group was increased significantly (P < 0.05), but the expression of ZNF148FL-siRNA group was significantly increased than that of ZNF148FL-Over express group (P < 0.05), but the expression level of ZNF148mRNA was significantly increased in ZNF148FL-siRNA group, but the expression level of ZNF148FL-Over express group was significantly higher than that of ZNF148FL-Over express group. However, the expression level of ZNF148T (螖 N) decreased significantly (P0.05N. ZNF148T (螖 N) in 螖 N)-siRNA group, but ZNF148FL increased in 螖 N)-Over express group (螖 N)-Over express group), but the expression level of ZNF148Fl decreased (both P0.05).ZNF148~(FL)-Over express group and ZNF148FL group (螖 N)-siRNA group) increased the proliferative ability of SW480 cells in both P0.05).ZNF148~(FL)-Over express group and ZNF148T group (螖 N)-siRNA group), the expression level of ZNF148T (螖 N) decreased significantly (P < 0.05), but the expression of ZNF148T (螖 N) increased significantly (P < 0.05). However, the proliferative ability of SW480 cells in ZNF148~(FL)-siRNA group and ZNF148 (螖 N)-Over express group) decreased significantly (both P0.05).ZNF148~(FL)-siRNA group and ZNF148 group (螖 N)-Over express group) decreased the number and migration activity of SW480 cells, while the apoptosis rate upregulated significantly the number and migration activity of SW480 cells in express group and 螖 N)-siRNA group. The apoptotic rate was significantly decreased (all P 0.05). Conclusion the cell proliferation, invasion and metastasis activity of colorectal cancer cells were increased by: 1. ZNFN (螖 N) and ZNF148 (螖 N) splicing may antagonize the malignant biological activity of colorectal cancer.
【作者單位】： 南昌大學(xué)第三附屬醫(yī)院普外科;上海長海醫(yī)院急診科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項目(No.81572332)~~
【分類號】：R735.34

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本文編號：1810537