本文關鍵詞：人乳腺腫瘤干細胞的分離培養(yǎng)鑒定及低氧對乳腺腫瘤干細胞特性影響的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《寧夏醫(yī)科大學》 2013年

人乳腺腫瘤干細胞的分離培養(yǎng)鑒定及低氧對乳腺腫瘤干細胞特性影響的研究

何亞琴  

【摘要】：乳腺癌是一種常見的惡性腫瘤，屬高發(fā)病、高死亡率疾病。腫瘤術后出現(xiàn)較高的復發(fā)率和轉移率，同時伴有對放化療的抗藥性是其高死亡率的原因之一。近年來腫瘤干細胞理論的提出突破了以往對腫瘤發(fā)生發(fā)展的認識，認為腫瘤的發(fā)生以及對放化療的抗藥性源于腫瘤組織中的腫瘤干細胞。這一腫瘤發(fā)生的模型很好的解釋了腫瘤治療失敗的原因，也從細胞學的角度提出了腫瘤研究和治療的靶點，為臨床根治腫瘤提供了理論依據(jù)。 為此本研究擬從原代培養(yǎng)的腫瘤細胞中獲得能持續(xù)傳代的腫瘤干細胞克隆，體外培養(yǎng)鑒定其自我更新能力，明確其表面標志物。觀察該細胞對低氧微環(huán)境的敏感性，并對乳腺腫瘤干細胞的低氧微環(huán)境進行初步的探索。希望為臨床乳腺腫瘤的治療提供實驗依據(jù)，為乳腺腫瘤的診斷和治療提供新的思路。 第一章人乳腺腫瘤干細胞的分離培養(yǎng)及鑒定目的：體外分離、培養(yǎng)乳腺腫瘤干細胞，并鑒定其生物學特性。方法：收集臨床術后乳腺癌患者的腫瘤組織，經機械剪切聯(lián)合酶消化法獲得腫瘤細胞并培養(yǎng)，流式細胞儀鑒定細胞表面抗原，MTT比色法檢測細胞生長曲線，實時定量PCR（qPCR）鑒定細胞Sox2、Nanog等基因表達，免疫熒光檢測細胞特異性蛋白Bcl-2、孕激素受體(PR)、VEGF、KI-67、E-cadherin的表達。結果：所獲得的細胞呈克隆球樣形態(tài)生長，鑒定結果發(fā)現(xiàn)其具有CD44~+/CD24~-表型，該細胞高表達Sox2、Nanog基因，且Bcl-2、PR、VEGF、KI-67、E-cadherin蛋白均陽性表達；結論：人乳腺腫瘤組織中存在具有自我更新和增殖能力、表達CD44~+/CD24~-的乳腺腫瘤干細胞，，并能在體外長期培養(yǎng)。 第二章低氧與常氧培養(yǎng)條件下腫瘤干細胞特性影響比較實驗目的：對第一部分實驗鑒定獲得的乳腺腫瘤干細胞在低氧條件環(huán)境培養(yǎng)及正常條件環(huán)境培養(yǎng)觀察兩種條件下乳腺腫瘤干細胞特性表達差異研究。方法：在不同的培養(yǎng)箱條件下培養(yǎng)細胞，流式細胞術鑒定不同條件下乳腺腫瘤干細胞表面抗原表達，MTT比色法檢測不同條件下細胞生長曲線，實時定量PCR（qPCR）鑒定不同條件下細胞Sox2、Nanog、HIF等基因表達。結果：所培養(yǎng)的乳腺腫瘤干細胞在不同條件培養(yǎng)下細胞的表達差異明顯，低氧條件下培養(yǎng)的乳腺腫瘤干細胞在細胞培養(yǎng)及基因表達上明顯高于正常條件下乳腺腫瘤干細胞。結論：低氧環(huán)境條件可以促進乳腺腫瘤干細胞增殖。

【關鍵詞】：
【學位授予單位】：寧夏醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R737.9
【目錄】：

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5 衣曉峰;[N];中國醫(yī)藥報;2010年

6 呂斌;[N];醫(yī)藥導報(中藥報);2004年

7 香港麥迪信醫(yī)學出版有限公司供稿;[N];醫(yī)藥經濟報;2003年

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