本文選題：胃癌SGC-細(xì)胞　切入點(diǎn)：微小RNA-a　出處：《中國(guó)病理生理雜志》2017年08期

【摘要】：目的:觀察微小RNA-146a(miR-146a)對(duì)胃癌SGC-7901細(xì)胞凋亡的影響及其可能的分子機(jī)制。方法:將miR-146a mimic(上調(diào)miR-146a表達(dá))和miR-146a inhibitor(下調(diào)miR-146a表達(dá))分別轉(zhuǎn)染至人胃癌SGC-7901細(xì)胞中,同時(shí)設(shè)置miRNA無(wú)義序列轉(zhuǎn)染為陰性對(duì)照組(NC組)。RT-q PCR檢測(cè)轉(zhuǎn)染后胃癌細(xì)胞miR-146a的表達(dá)水平;CCK-8法和流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)miR-146a對(duì)SGC-7901胃癌細(xì)胞生長(zhǎng)活力和凋亡的影響;RT-q PCR和Western blot法檢測(cè)miR-146a上調(diào)或下調(diào)對(duì)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β激活激酶1(TAK1)/核因子κB(NF-κB)通路的影響。結(jié)果:在SGC-7901細(xì)胞中,上調(diào)miR-146a表達(dá)顯著促進(jìn)細(xì)胞凋亡,而下調(diào)miR-146a表達(dá)則顯著抑制細(xì)胞凋亡。與NC組相比,miR-146a mimics轉(zhuǎn)染SGC-7901細(xì)胞后,TAK1的mRNA和蛋白表達(dá)均明顯下降,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性(P0.05),而miR-146a inhibitors轉(zhuǎn)染組TAK1的mRNA和蛋白質(zhì)表達(dá)則顯著增加(P0.05),提示miR-146a負(fù)調(diào)控TAK1表達(dá)。敲低TAK1促進(jìn)SGC-7901細(xì)胞凋亡(P0.01),而TAK1過(guò)表達(dá)TAKI則抑制SGC-7901細(xì)胞凋亡(P0.01)。此外,過(guò)表達(dá)miR-146a和敲低TAK1均能顯著上調(diào)NF-κB抑制蛋白α(IκBα)和下調(diào)B細(xì)胞淋巴瘤-2(Bcl-2)表達(dá)。結(jié)論:本研究結(jié)果表明miR-146a通過(guò)靶向TAK1抑制NF-κB途徑,從而誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞凋亡。
[Abstract]:Aim: to observe the effect of minimal RNA-146a miR-146a on apoptosis of gastric cancer SGC-7901 cells and its possible molecular mechanism. Methods: miR-146a mimicic (up-regulated miR-146a expression) and miR-146a inhibitor (down-regulated miR-146a expression) were transfected into human gastric cancer SGC-7901 cells, respectively. The expression level of miR-146a in gastric cancer cells after transfection was detected by RT-PCR PCR and CCK-8 assay and flow cytometry were used to detect the effect of miR-146a on the growth and apoptosis of SGC-7901 gastric cancer cells. RT-q PCR and Western blot assay were used to detect the effect of miR-146a on the growth and apoptosis of SGC-7901 gastric cancer cells. The effect of up-regulation or down-regulation of miR-146a on the NF-魏 B pathway of transforming growth factor- 尾 -activated kinase (1(TAK1)/) was measured. Results: in SGC-7901 cells, Upregulation of miR-146a expression significantly promoted cell apoptosis, while down-regulation of miR-146a expression significantly inhibited cell apoptosis. Compared with NC group, the expression of mRNA and protein in SGC-7901 cells were significantly decreased after transfection of SGC-7901 cells with pmiR-146a mimics. In miR-146a inhibitors transfection group, the expression of mRNA and protein in TAK1 increased significantly, suggesting that miR-146a negatively regulated TAK1 expression. Knockdown of TAK1 promoted SGC-7901 cell apoptosis (P0.01), while TAK1 overexpression TAKI inhibited SGC-7901 cell apoptosis (P0.01). Both overexpression of miR-146a and knockout of TAK1 could significantly up-regulate the expression of NF- 魏 B inhibitory protein 偽-魏 B 偽 and down-regulate the expression of B-cell lymphoma -2pBcl-2.Conclusion: this study suggests that miR-146a inhibits NF- 魏 B pathway by targeting TAK1 and thus induces apoptosis in gastric cancer cells.
【作者單位】： 溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院肝膽外科;
【基金】：溫州市科技計(jì)劃項(xiàng)目(No.Y20130231)
【分類號(hào)】：R735.2

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本文編號(hào)：1674319