發(fā)布時間：2018-03-04 01:16

  本文選題：膠質(zhì)瘤干細胞　切入點：CD9　出處：《第三軍醫(yī)大學(xué)》2016年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：膠質(zhì)瘤是中樞神經(jīng)系統(tǒng)最常見的原發(fā)性腫瘤。根據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)對膠質(zhì)瘤的分類標準,按照其惡性程度可分為I-IV級,其中膠質(zhì)母細胞瘤(WHO IV級)惡性程度極高,患者生存期短、復(fù)發(fā)率高、治療困難。膠質(zhì)瘤干細胞是膠質(zhì)瘤中具有干細胞特性的瘤細胞亞群。研究表明,膠質(zhì)瘤干細胞可以驅(qū)動膠質(zhì)瘤成瘤、進行自我更新并分化成異質(zhì)性的瘤細胞群體從而維持腫瘤生長。盡管膠質(zhì)瘤干細胞在腫瘤中含量極微,卻是維持膠質(zhì)瘤增殖、侵襲和促血管生成等惡性生物學(xué)行為的關(guān)鍵。深入研究調(diào)控膠質(zhì)瘤干細胞生物學(xué)特性的分子機制,并研發(fā)靶向膠質(zhì)瘤干細胞的治療策略將為提高膠質(zhì)瘤患者治療效果帶來新的希望。膠質(zhì)瘤干細胞呈現(xiàn)干細胞樣的生物學(xué)特征(以下簡稱“干性”),具體表現(xiàn)為:表達特定干細胞標志物(如SOX2、Olig2、CD133等),具有自我更新、多向分化和體內(nèi)重建腫瘤的能力�！案尚浴笔悄z質(zhì)瘤干細胞群體維持自身存在、擴增的基礎(chǔ),也是其發(fā)揮惡性生物學(xué)作用的關(guān)鍵。近年來研究發(fā)現(xiàn),膠質(zhì)瘤干細胞“干性”維持主要依賴于:1)特定干細胞標記物的表達;2)膠質(zhì)瘤干細胞內(nèi)特有的分子調(diào)控機制(包括基因組學(xué)調(diào)控、表觀遺傳學(xué)調(diào)控、轉(zhuǎn)錄組學(xué)調(diào)控等);3)外界腫瘤微環(huán)境(如腫瘤相關(guān)巨噬細胞、血管細胞及其分泌的生長因子)與膠質(zhì)瘤干細胞的相互作用。本研究通過基因表達譜芯片篩查,發(fā)現(xiàn)膜表面蛋白CD9在膠質(zhì)瘤干細胞中高表達并作為膠質(zhì)瘤干細胞新標記物。在膠質(zhì)瘤干細胞內(nèi)在調(diào)控機制方面,我們發(fā)現(xiàn)CD9、miRNA-663、miRNA-126在膠質(zhì)瘤干細胞“干性”和惡性生物學(xué)行為(細胞增殖、侵襲和血管生成)中發(fā)揮調(diào)控作用。在腫瘤微環(huán)境調(diào)控方面,我們發(fā)現(xiàn)腫瘤相關(guān)巨噬細胞高表達定分泌PTN(Pleiotrophin),后者與膠質(zhì)瘤干細胞中其受體PTPRZ1結(jié)合,維持膠質(zhì)瘤干細胞“干性”并促進腫瘤生長。本研究的主要結(jié)果和意義如下:1.CD9作為膠質(zhì)瘤干細胞新標記物的篩選鑒定及其對膠質(zhì)瘤干細胞“干性”維持和成瘤能力的影響:(1)CD9在膠質(zhì)瘤干細胞中高表達并與膠質(zhì)瘤干細胞標記物SOX2、Olig2和CD133存在共表達。(2)干擾CD9表達抑制膠質(zhì)瘤干細胞自我更新能力和增殖能力。(3)干擾CD9表達抑制膠質(zhì)瘤干細胞成瘤能力。2.CD9對膜表面受體gp130穩(wěn)定性的影響和調(diào)控機制:(1)CD9與gp130在膠質(zhì)瘤干細胞中存在相互作用。(2)干擾CD9明顯抑制gp130蛋白表達。(3)CD9通過防止gp130發(fā)生溶酶體泛素化降解而維持其穩(wěn)定性。3.CD9對gp130下游STAT3信號通路活性的影響:(1)干擾CD9表達明顯抑制gp130下游STAT3信號通路活性。(2)持續(xù)活化型STAT3能夠部分回復(fù)由于干擾CD9表達對膠質(zhì)瘤干細胞“干性”和成瘤能力的抑制作用。4.miRNA-663在膠質(zhì)瘤中的表達水平及其預(yù)后判定價值:(1)相對于正常腦組織,miRNA-663在膠質(zhì)瘤腫瘤組織中顯著低表達,其表達水平與膠質(zhì)瘤級別和惡性程度顯著負相關(guān)。(2)miRNA-663表達是判斷膠質(zhì)瘤,特別是膠質(zhì)母細胞瘤患者預(yù)后的重要評價因子;其表達水平越高,患者預(yù)后越好。5.miRNA-663對膠質(zhì)瘤惡性表型的影響及分子機制:(1)過表達miRNA-663明顯抑制膠質(zhì)母細胞瘤細胞的增殖、侵襲能力,抑制顱內(nèi)原位移植瘤生長。(2)PIK3CD和CXCR4是miRNA-663的靶基因。(3)過表達miRNA-663能夠抑制PIK3CD和CXCR4蛋白表達水平。(4)膠質(zhì)瘤組織中miRNA-663與PIK3CD或CXCR4的表達水平顯著負相關(guān)。(5)miRNA-663抑制PIK3CD和CXCR4下游AKT信號通路活化和CCND1、MMP2、MMP7等增殖、侵襲相關(guān)效應(yīng)分子的表達。(6)過表達PIK3CD和CXCR4能夠部分回復(fù)miRNA-663對腫瘤增殖和侵襲的抑制作用。6.miRNA-663基因治療聯(lián)合CXCR4抑制劑AMD3100的治療效果評價:(1)多西環(huán)素誘導(dǎo)miRNA-663表達聯(lián)合AMD3100,能夠顯著抑制移植瘤生長。(2)過表達miRNA-663聯(lián)合AMD3100能夠抑制CXCR4表達并阻斷其功能,延長荷瘤鼠生存時間。7.miRNA-126在膠質(zhì)瘤干細胞中的表達及生物學(xué)功能:(1)miRNA-126在膠質(zhì)瘤干細胞中顯著低表達,并與膠質(zhì)瘤干細胞“干性”標記物SOX2表達水平負相關(guān)。(2)過表達miRNA-126顯著抑制膠質(zhì)瘤干細胞增殖和自我更新能力。(3)過表達miRNA-126抑制膠質(zhì)瘤干細胞誘導(dǎo)的內(nèi)皮細胞遷移運動能力和小管形成能力。(4)過表達miRNA-126明顯抑制膠質(zhì)瘤干細胞中VEGFA的表達和分泌,并抑制膠質(zhì)瘤干細胞介導(dǎo)的腫瘤血管生成。8.miRNA-126調(diào)控膠質(zhì)瘤干細胞的分子機制:(1)HIP1是miRNA-126的靶基因。(2)過表達miRNA-126能夠抑制HIP1蛋白表達。(3)HIP1促進膠質(zhì)瘤干細胞“干性”維持、成瘤能力和促血管生成能力。(4)HIP1通過穩(wěn)定EGFR表達,促進AKT和STAT3信號通路活性。(5)過表達HIP1部分回復(fù)miRNA-126對膠質(zhì)瘤干細胞增殖、自我更新和促血管生成的抑制作用。(6)過表達HIP1部分回復(fù)miRNA-126對EGFR表達和AKT、STAT3信號通路活性的負向調(diào)控。9.miRNA-126與抗血管生成藥物貝伐單抗(Bevacizumab,Beva)聯(lián)合應(yīng)用對膠質(zhì)瘤干細胞腫瘤生長的治療效果:(1)多西環(huán)素誘導(dǎo)miRNA-126表達,顯著抑制Beva對膠質(zhì)瘤干細胞的富集作用。(2)miRNA-126誘導(dǎo)表達與Beva聯(lián)合應(yīng)用,顯著抑制膠質(zhì)瘤干細胞腫瘤生長。(3)miRNA-126誘導(dǎo)表達與Beva聯(lián)合應(yīng)用,顯著延長荷瘤鼠生存時間。10.膠質(zhì)瘤組織中miRNA-126的表達水平及與腫瘤微血管面積和患者預(yù)后的關(guān)系:(1)相對于正常腦組織,miRNA-126在膠質(zhì)瘤腫瘤組織中顯著低表達,且其表達水平與膠質(zhì)瘤級別顯著負相關(guān)。(2)miRNA-126表達水平與膠質(zhì)瘤腫瘤微血管面積顯著負相關(guān)。(3)miRNA-126是預(yù)測膠質(zhì)瘤患者預(yù)后的標記物。11.腫瘤相關(guān)巨噬細胞源性分泌蛋白PTN的篩選鑒定及其在介導(dǎo)腫瘤相關(guān)巨噬細胞促瘤效應(yīng)中的作用:(1)PTN是腫瘤相關(guān)巨噬細胞高表達和分泌的生長因子;(2)腫瘤相關(guān)巨噬細胞源性的PTN能夠促進膠質(zhì)瘤干細胞始動的腫瘤生長。12.PTPRZ1在膠質(zhì)瘤干細胞中的表達及PTN/PTPRZ1通路對膠質(zhì)瘤干細胞“干性”維持和成瘤能力的影響及其治療意義:(1)PTPRZ1在膠質(zhì)瘤干細胞中高表達。(2)PTN/PTPRZ1通路促進膠質(zhì)瘤干細胞自我更新能力和增殖能力。(3)干擾PTPRZ1表達抑制膠質(zhì)瘤干細胞成瘤能力并延長荷瘤鼠生存期。(4)通過PTPRZ1抗體阻斷PTN與PTPRZ1結(jié)合,能夠抑制膠質(zhì)瘤干細胞始動的腫瘤生長。13.膠質(zhì)瘤干細胞內(nèi)PTN/PTPRZ1下游信號通路篩查與鑒定:(1)PI3K-AKT信號通路是PTN-PTPRZ1發(fā)揮作用的主要下游通路。(2)PTPRZ1與Fyn存在相互作用。(3)PTN/PTPRZ1激活,促進Fyn的磷酸化和下游AKT通路的活化。綜上所述,本研究的主要結(jié)論包括:1.CD9作為膠質(zhì)瘤干細胞膜標記物,其通過防止gp130發(fā)生溶酶體泛素化降解而維持gp130穩(wěn)定性,促進膠質(zhì)瘤干細胞中STAT3信號通路活化并維持膠質(zhì)瘤干細胞“干性”和成瘤能力。2.miRNA-663通過聯(lián)合靶向CXCR4、PIK3CD表達,負向調(diào)控PI3K-AKT通路,進而抑制膠質(zhì)母細胞瘤演進并影響患者的預(yù)后。3.miRNA-126通過靶向HIP1,負向調(diào)控EGFR表達和AKT、STAT3信號通路活性,抑制膠質(zhì)瘤干細胞自我更新及促血管生成作用,進而影響膠質(zhì)瘤腫瘤生長。4.腫瘤相關(guān)巨噬細胞分泌的PTN與膠質(zhì)瘤干細胞中高表達的PTPRZ1結(jié)合,促進膠質(zhì)瘤干細胞中Fyn-AKT信號通路活化,進而維持膠質(zhì)瘤干細胞“干性”及腫瘤生長。上述結(jié)果將為闡明膠質(zhì)瘤細胞“干性”維持和生物學(xué)行為的分子調(diào)控機制、篩選膠質(zhì)瘤干細胞標記物和制定靶向膠質(zhì)瘤干細胞的治療策略提供理論與實驗依據(jù)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R739.41

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 徐俊杰;于洪泉;國巍;趙偉;金宏;溫娜;齊玲;;西蘭花多肽對大鼠C6膠質(zhì)瘤細胞生長的影響[J];中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志;2012年11期

2 徐俊杰;于洪泉;趙偉;金宏;溫娜;齊玲;劉興吉;;西蘭花多肽對C6膠質(zhì)瘤細胞的誘導(dǎo)凋亡作用[J];吉林大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2013年01期

3 仝海波,江澄川,唐鎮(zhèn)生,金一尊;膠質(zhì)瘤細胞化學(xué)增敏作用實驗研究[J];山西臨床醫(yī)藥;2000年07期

4 李嗍,王楓,繆珊,駱文靜;過量鋅對鼠膠質(zhì)瘤細胞體外生長的影響[J];解放軍預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志;2001年04期

5 梁一鳴,郭國慶,鄭少俊,沈偉哉;膠質(zhì)瘤血管內(nèi)皮生長因子表達的調(diào)節(jié)[J];臨床與實驗病理學(xué)雜志;2001年02期

6 曲元明,韓韜,李桂林,王成偉;血管內(nèi)皮細胞生長因子抗體對膠質(zhì)瘤生長的影響[J];山東醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2001年02期

7 黃強,董軍;膠質(zhì)瘤的分子外科治療[J];中國微侵襲神經(jīng)外科雜志;2001年04期

8 葉明,周岱,周幽心,王瑋,傅建新,黃煜倫;血管內(nèi)皮生長因子在膠質(zhì)瘤中的表達[J];腫瘤;2002年06期

9 顧宇翔,陳銜城,王宇倩;膠質(zhì)瘤對親細胞非均質(zhì)分子脂質(zhì)和幾種藥物敏感性的比較[J];復(fù)旦學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2003年02期

10 王成偉 ,劉福生 ,曲元明 ,李桂林;血管內(nèi)皮生長因子抗體抑制膠質(zhì)瘤生長的實驗研究[J];中華神經(jīng)外科雜志;2003年01期

相關(guān)會議論文 前10條

1 李飛;李梅;盧佳友;朱剛;林江凱;孟輝;吳南;陳志;馮華;;脂質(zhì)微區(qū)干擾劑甲基-β-環(huán)糊精影響C6膠質(zhì)瘤細胞侵襲和遷移的體外實驗研究[A];中國醫(yī)師協(xié)會神經(jīng)外科醫(yī)師分會第四屆全國代表大會論文匯編[C];2009年

2 吳安華;王運杰;Ohlfest JR;Wei Chen;Low WC;;膠質(zhì)瘤的生物治療-從實驗室到臨床[A];中華醫(yī)學(xué)會神經(jīng)外科學(xué)分會第九次學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2010年

3 徐宏;韓楊云;孫中書;李新軍;;與膠質(zhì)瘤代謝通路相關(guān)的候選基因篩選[A];中華醫(yī)學(xué)會神經(jīng)外科學(xué)分會第九次學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2010年

4 潘冬生;;多基因修飾膠質(zhì)瘤細胞疫苗的抗腫瘤免疫反應(yīng)[A];中國醫(yī)師協(xié)會神經(jīng)外科醫(yī)師分會第六屆全國代表大會論文匯編[C];2011年

5 俞文華;車志豪;張祖勇;許培源;陸鏞民;傅林;朱強;陳鋒;杜權(quán);;骨橋蛋白在膠質(zhì)瘤細胞中的表達及其信號傳導(dǎo)途徑[A];2005年浙江省神經(jīng)外科學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2005年

6 張震;徐克;;低強度超聲誘導(dǎo)C6膠質(zhì)瘤細胞凋亡的體外實驗研究[A];中華醫(yī)學(xué)會第十三次全國超聲醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2013年

7 蔣偉峰;高方友;尹浩;;白細胞介素-17及其受體在膠質(zhì)瘤中的表達及臨床意義[A];2013年貴州省神經(jīng)外科年會論文集[C];2013年

8 徐慶生;張小兵;周永慶;;膠質(zhì)瘤干細胞及其放療敏感性[A];2011年浙江省神經(jīng)外科學(xué)學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2011年

9 楊孔賓;趙世光;劉炳學(xué);陳曉豐;戴欽舜;;K~+通道阻斷劑四乙胺對大鼠膠質(zhì)瘤細胞的增殖和凋亡影響[A];中國醫(yī)師協(xié)會神經(jīng)外科醫(yī)師分會第四屆全國代表大會論文匯編[C];2009年

10 黃強;;膠質(zhì)瘤生成細胞研究[A];第三屆中國腫瘤學(xué)術(shù)大會教育論文集[C];2004年

相關(guān)重要報紙文章 前5條

1 衣曉峰　馮宇曦;中藥三氧化二砷有望成為治療膠質(zhì)瘤新藥[N];中國醫(yī)藥報;2011年

2 記者 匡遠深;讓膠質(zhì)瘤干細胞不再“繁殖”[N];健康報;2011年

3 張獻懷　張文;瘤區(qū)埋雷 持續(xù)殺傷[N];健康報;2007年

4 白毅;人腦膠質(zhì)瘤基礎(chǔ)與應(yīng)用研究喜結(jié)“九大碩果”[N];中國醫(yī)藥報;2006年

5 王德江；劉藏；王貴懷；曹勇；王新生；肖新如;交流最新進展 提高診治水平[N];中國醫(yī)藥報;2005年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 董軍;CUL4B在神經(jīng)膠質(zhì)細胞瘤中的作用研究[D];山東大學(xué);2015年

2 張睿;循環(huán)miR-221/222在膠質(zhì)瘤診斷與預(yù)后中的價值與基于CED的中樞神經(jīng)系統(tǒng)給藥新方法的研究[D];山東大學(xué);2015年

3 許森林;ALDH1A1在膠質(zhì)瘤侵襲和結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移中的作用和機制[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

4 王嘯;靶向嵌段共聚物膠束在膠質(zhì)瘤磁共振成像、藥物輸送及治療的應(yīng)用[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

5 廖紅展;鋅指轉(zhuǎn)錄因子SNAI2在miR-203的影響下通過上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化參與膠質(zhì)瘤耐藥機制的調(diào)節(jié)[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

6 潘俊;IRG1促進膠質(zhì)瘤增殖的作用機制及臨床意義[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

7 鄭傳宜;膠質(zhì)瘤中GLUT3基因異常表達的意義及其相關(guān)調(diào)控機制[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

8 徐紅超;氬氦冷凍消融聯(lián)合GM-CSF治療膠質(zhì)瘤小鼠的療效及其對小鼠脾臟樹突狀細胞免疫功能影響[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

9 黃素寧;TNFRSF6B在膠質(zhì)瘤中的表達及對膠質(zhì)瘤細胞增殖及凋亡的作用研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

10 熊偉;GBE1在人腦膠質(zhì)細胞瘤中的表達及干預(yù)實驗研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2015年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 張大慶;單核細胞趨化蛋白-1在骨髓間充質(zhì)干細胞向膠質(zhì)瘤細胞趨化中的作用研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2012年

2 黃俊龍;ADC值與膠質(zhì)瘤Ki-67、MGMT的相關(guān)性研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

3 李明聰;下調(diào)Pygo2對U251及U251起源的膠質(zhì)瘤干細胞生物學(xué)特性的影響[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

4 徐云峰;膠質(zhì)瘤干細胞的3D培養(yǎng)及其核酸適體篩選的探索[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

5 張靜文;T細胞過繼免疫治療小鼠腦膠質(zhì)瘤原位模型的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

6 洪宇;膠質(zhì)瘤瘤周水腫、病理級別、Ki-67表達三者相關(guān)性研究[D];石河子大學(xué);2015年

7 姬云翔;磷酸化Cx43蛋白在人膠質(zhì)瘤細胞中表達及其與腫瘤細胞增殖相關(guān)性研究[D];石河子大學(xué);2015年

8 朱峰;OPN的異常表達與膠質(zhì)瘤的相關(guān)性研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

9 劉兵;SENP1表達水平對人腦膠質(zhì)瘤發(fā)生發(fā)展的作用機制及其相關(guān)性[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

10 李文華;Slit2/Robo1在人腦膠質(zhì)瘤中的表達及臨床意義[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

，

本文編號：1563510