本文關(guān)鍵詞： 胃腫瘤 微載體 MKN45細(xì)胞 動(dòng)物模型　出處：《山東大學(xué)》2017年碩士論文　論文類(lèi)型：學(xué)位論文

【摘要】：研究目的基于新型微載體(microcarrier 6)復(fù)合人胃癌MKN45細(xì)胞接種于具有正常免疫功能的小鼠,以期建立新型人胃癌正常免疫小鼠移植瘤模型,并探討其病理學(xué)特征。研究方法將60只雄性C57BL/6小鼠隨機(jī)分成3組,2D組、對(duì)照組和3D組,每組20只;2D組只接種MKN45細(xì)胞,對(duì)照組只接種微載體,3D組接種細(xì)胞-微載體復(fù)合體。將人胃癌MKN45細(xì)胞與microcarrier 6共培養(yǎng)建立三維腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)體系,采用皮下接種法將細(xì)胞-微載體復(fù)合體接種于C57BL/6小鼠皮下建立小鼠移植瘤模型。觀察記錄小鼠一般狀況及瘤體生長(zhǎng)情況,統(tǒng)計(jì)成瘤時(shí)間及成瘤率,分別于接種第10、20、30天分三批處死荷瘤小鼠并對(duì)瘤組織進(jìn)行病理學(xué)檢查。采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,計(jì)量資料數(shù)據(jù)以x士s表示,采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)進(jìn)行組間比較,以P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。研究結(jié)果1.基于microcarrier6體外建立MKN45細(xì)胞三維培養(yǎng)體系:2D環(huán)境下觀察MKN45細(xì)胞貼壁,呈不規(guī)則形;microcarrier 6鏡下觀察為不規(guī)則團(tuán)狀或長(zhǎng)梭狀,質(zhì)地疏松;MKN45細(xì)胞與microcarrier 6共培養(yǎng)24h后可以看到MKN45細(xì)胞可以很好的貼附在microcarrier6上,接種均勻,達(dá)到飽和。2.動(dòng)物生存及成瘤情況:2D組和對(duì)照組小鼠食欲和活動(dòng)度沒(méi)有明顯變化,第10天開(kāi)始,3D組小鼠活動(dòng)稍減少;各組食欲、毛發(fā)、體質(zhì)量無(wú)明顯差異;實(shí)驗(yàn)過(guò)程中沒(méi)有小鼠死亡。對(duì)照組和2D組小鼠均未成瘤,3D組小鼠在接種后8～10 d即可觸及皮下腫塊,2周左右肉眼可觀察到皮下有隆起包塊,腫塊生長(zhǎng)迅速,3周左右即可達(dá)到0.5～1cm3體積,成瘤率為80%(16/20只)。3.病理學(xué)檢查:HE染色后光鏡下可見(jiàn)大量雜亂排列、大小不一、異形性明顯的細(xì)胞,并向周?chē)尽⒓∪饨M織浸潤(rùn)生長(zhǎng);伴有明顯壞死,主要位于腫瘤中央,以20天處死組最為顯著;10天處死組未被清除的部分microcarrier 6被包繞形成肉芽腫,20天時(shí)仍可見(jiàn)少許microcarrier 6,30天時(shí)microcarrier 6基本被清除干凈;各組移植瘤組織中新生毛細(xì)血管豐富,多位于腫瘤邊緣。免疫組化染色結(jié)果顯示,CA199、CEA、COX-2、CK-7均為陽(yáng)性表達(dá),進(jìn)一步證實(shí)異形性細(xì)胞為人腫瘤細(xì)胞。研究結(jié)論本實(shí)驗(yàn)成功基于microcarrier 6復(fù)合人胃癌MKN45細(xì)胞在正常免疫小鼠中建立了人胃癌小鼠移植瘤模型,且移植瘤的病理學(xué)特征符合人胃癌的特點(diǎn),此模型可以更好的研究和進(jìn)一步闡明胃癌在免疫功能正常機(jī)體中發(fā)生、發(fā)展機(jī)制,同時(shí)也為胃癌的精準(zhǔn)化個(gè)體治療及抗癌藥的研發(fā)提供了較以往更有價(jià)值的新的動(dòng)物模型。
[Abstract]:Objective to establish a xenograft tumor model of a new type of human gastric cancer immunized mice based on a novel microcarrier microcarrier 6 combined with human gastric cancer MKN45 cells inoculated into mice with normal immune function. Methods 60 male C57BL / 6 mice were randomly divided into 3 groups: 2D group, control group and 3D group. 20 mice in each group were inoculated with MKN45 cells only. Human gastric cancer MKN45 cells were co-cultured with microcarrier 6 to establish a three-dimensional tumor cell culture system. C57BL / 6 mice were inoculated subcutaneously with cell-microcarrier complex to establish transplanted tumor model. The general status and tumor growth of mice were observed and recorded, and the tumorigenesis time and tumorigenesis rate were counted. The tumor-bearing mice were killed in three batches on the 30th day of the 10th day of inoculation and the pathological examination of the tumor tissue was carried out. The data were analyzed by SPSS 13.0 statistical software. The measurement data were expressed as x + s, and the independent sample t test was used to carry out the inter-group comparison. Results 1. The three-dimensional culture system of MKN45 cells based on microcarrier6 was established in vitro to observe the adhesion of MKN45 cells under the environment of 1: 2D. The cells were observed to be irregular clusters or long fusiform cells under the microscope. 2. After co-culture of MKN45 cells with microcarrier6 for 24 hours, it was found that MKN45 cells could be well attached to microcarrier6, inoculated evenly and reached saturation. 2. There was no significant change in appetite and activity of mice in 2: 2D group and control group. On the 10th day, the activity of mice in 3D group decreased slightly, but there was no significant difference in appetite, hair and body mass in each group. No mice died in the experiment. In the control group and 2D group, the mice in the control group and the 2D group could reach the subcutaneous mass about 2 weeks after inoculation. The tumor could reach 0.5 ~ 1 cm ~ 3 volume in 3 weeks, and the tumorigenesis rate was 80 / 16 / 20. Pathological examination showed a large number of irregular cells with different size and obvious heteromorphism, and infiltrated and grew in the surrounding fat and muscle tissue under the light microscope after the pathological examination: 1. There was obvious necrosis, mainly located in the center of the tumor. The most significant part of microcarrier 6 in the death group on the 20th day was that microcarrier 6 was removed basically after 20 days of death, and the part of microcarrier 6 was wrapped around to form granuloma after 20 days of death. At 30 days, a little microcarrier 6 could still be removed. The new capillaries were abundant in the transplanted tumor tissues in each group, and most of them were located at the margin of the tumor. The immunohistochemical staining showed that the expression of CK-7 was positive in CA199CEACOX-2CK-7 cells. Conclusion the xenograft tumor model of human gastric cancer mice was successfully established in normal immunized mice based on microcarrier 6 combined with human gastric cancer MKN45 cells. The pathological characteristics of transplanted tumor accord with the characteristics of human gastric cancer. This model can better study and further elucidate the mechanism of gastric cancer occurrence and development in normal immune system. It also provides a more valuable animal model for the precise individual treatment of gastric cancer and the development of anti-cancer drugs.
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類(lèi)號(hào)】：R735.2;R-332

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 倪國(guó)漢;低場(chǎng)強(qiáng)MRI在胃癌診斷中的作用[J];放射學(xué)實(shí)踐;2002年02期

2 戴成雨;胃癌20例誤診分析[J];實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志;2002年03期

3 李秋波,陶智慧,胡奎,韓智,馬勇;胃癌術(shù)前區(qū)域動(dòng)脈灌注化療加手術(shù)聯(lián)合治療的療效觀察(附24例)[J];航空航天醫(yī)藥;2003年03期

4 倪海濱,毛振彪,黃介飛,肖明兵,季穎林,張彥亮,冒海蕾;血清可溶性細(xì)胞間粘附分子-1與胃癌臨床意義的研究[J];南通醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2003年01期

5 邢亞莉;姚春霞;唐曉君;劉春梅;;彩超在胃癌診斷中的價(jià)值[J];基層醫(yī)學(xué)論壇;2007年17期

6 ;日本專(zhuān)家用新技術(shù)提高胃癌診斷準(zhǔn)確率[J];生物醫(yī)學(xué)工程與臨床;2009年02期

7 ;新技術(shù)能提高胃癌診斷準(zhǔn)確率[J];中華中醫(yī)藥學(xué)刊;2009年07期

8 高春光;;胃癌患者的臨床治療體會(huì)[J];中國(guó)民族民間醫(yī)藥;2009年14期

9 高瑞鳳;朱曄;劉興姣;;37例進(jìn)展期胃癌的超聲分析[J];中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥;2010年25期

10 姜可偉;;規(guī)范全球第二大致死率疾病的診斷——《胃癌診斷標(biāo)準(zhǔn)》解讀[J];中國(guó)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)管理;2010年04期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 武淑蘭;魏志杰;殷宇明;;胃癌致微血管病性溶血性貧血的診斷[A];第十一屆全國(guó)紅細(xì)胞疾病學(xué)術(shù)會(huì)議暨學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2007年

2 丁濤;;超聲在診斷胃癌中的應(yīng)用[A];中國(guó)超聲醫(yī)學(xué)工程學(xué)會(huì)第三屆全國(guó)肌肉骨骼超聲醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)交流會(huì)論文匯編[C];2011年

3 陳曉康;呂國(guó)榮;蘇若瑟;;應(yīng)用彩色能量多普勒血流顯像對(duì)胃癌的診斷價(jià)值[A];慶祝中國(guó)超聲醫(yī)學(xué)工程學(xué)會(huì)成立20周年——第八屆全國(guó)超聲醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2004年

4 于吉人;;胃癌的術(shù)前系統(tǒng)評(píng)估[A];2004年浙江省外科學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2004年

5 楊軍樂(lè);寧文德;董季平;徐敏;;多層螺旋CT在胃癌診斷中的應(yīng)用研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十三屆全國(guó)放射學(xué)大會(huì)論文匯編（下冊(cè)）[C];2006年

6 張曉鵬;;胃癌磁共振成像研究進(jìn)展[A];第四屆中國(guó)腫瘤學(xué)術(shù)大會(huì)暨第五屆海峽兩岸腫瘤學(xué)術(shù)會(huì)議教育集[C];2006年

7 張麗紅;常維平;黃賢會(huì);;螺旋CT在特殊部位胃癌診斷中的應(yīng)用[A];中國(guó)醫(yī)師協(xié)會(huì)放射醫(yī)師分會(huì)首屆會(huì)員大會(huì)暨第四屆醫(yī)學(xué)影像山東論壇、山東省第16次放射學(xué)會(huì)議暨山東省第14屆醫(yī)學(xué)影像學(xué)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2007年

8 陳靜;;彩色多普勒超聲檢查在胃癌的應(yīng)用[A];中國(guó)超聲醫(yī)學(xué)工程學(xué)會(huì)第七屆全國(guó)腹部超聲學(xué)術(shù)會(huì)議學(xué)術(shù)論文匯編[C];2007年

9 劉池波;梁勇;王海寶;楊林軍;梁津逍;;胃癌患者中血清淀粉樣蛋白A的測(cè)定及臨床意義[A];第二屆中國(guó)醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)暨細(xì)胞生物學(xué)教學(xué)改革會(huì)議論文集[C];2008年

10 吳厚賓;;腹腔鏡在胃癌診治中的應(yīng)用進(jìn)展(綜述)[A];江西省第二屆胃腸外科學(xué)術(shù)會(huì)議暨江西省第十二次中西醫(yī)結(jié)合普通外科學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2012年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 錢(qián)錚;新技術(shù)能提高胃癌診斷準(zhǔn)確率[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2009年

2 記者 陳青;胃癌患者從“存活”邁向“樂(lè)活”[N];文匯報(bào);2010年

3 李楠;胃癌診斷敏感性從不足30%提高到57.4%[N];健康報(bào);2008年

4 通訊員 李楠;胃癌“轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)”研究見(jiàn)成效[N];上海科技報(bào);2008年

5 記者 楚燕　通訊員 那偉 高樹(shù)灼;廈門(mén)胃癌研究達(dá)國(guó)際領(lǐng)先水平[N];廈門(mén)日?qǐng)?bào);2009年

6 胡德榮;新型胃癌分子標(biāo)志物研究獲突破[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2010年

7 本報(bào)記者 周芳;改善飲食習(xí)慣 早發(fā)現(xiàn)早治療[N];吉林日?qǐng)?bào);2006年

8 中南大學(xué)湘雅二醫(yī)院 楊燕貽;胃癌防治有哪些錯(cuò)誤觀念[N];大眾衛(wèi)生報(bào);2005年

9 特約記者 程守勤;胃癌診斷又有新方法[N];家庭醫(yī)生報(bào);2003年

10 重慶萬(wàn)州 黃瓊;胃癌的手術(shù)治療[N];上海中醫(yī)藥報(bào);2013年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 孫大志;基于microRNA 21的調(diào)控作用探討從痰論治胃癌的作用機(jī)制[D];中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2012年

2 陳悅之;TNFAIP8在胃癌中的表達(dá)和對(duì)調(diào)節(jié)胃癌細(xì)胞增殖，影響侵襲及遷移中的作用研究[D];山東大學(xué);2015年

3 殷繼鵬;腫瘤血管靶向肽GX1用于胃癌的分子影像研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2015年

4 蔡習(xí)強(qiáng);TFEB介導(dǎo)的自噬在胃癌耐藥中的作用及其機(jī)制研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2015年

5 趙曉迪;microRNA-7調(diào)控胃癌惡性生物學(xué)行為的功能與分子機(jī)制研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2015年

6 尚華;MicroRNA-125a在胃癌中表達(dá)水平的研究及其臨床意義[D];山東大學(xué);2015年

7 關(guān)中正;TGF-β在胃癌免疫逃逸中作用及機(jī)制研究[D];山東大學(xué);2015年

8 黃勇;AEG-1/MT qDH、NF-κB、MMP-9在胃癌中的表達(dá)及相關(guān)性的研究[D];山東大學(xué);2015年

9 謝黎明;胃癌中miR-124表達(dá)的意義及作用機(jī)制研究[D];南華大學(xué);2015年

10 劉佳寧;SOX9和CEACAM1在胃癌組織中表達(dá)及其對(duì)胃癌細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)移的影響[D];山東大學(xué);2015年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 徐海蓉;胃癌危險(xiǎn)因素的流行病學(xué)研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2002年

2 張軍利;p27、PTEN與VEGF蛋白在胃癌組織中的表達(dá)及其意義[D];泰山醫(yī)學(xué)院;2014年

3 馬春婷;胃癌與幽門(mén)螺桿菌的相關(guān)性研究[D];石河子大學(xué);2015年

4 王士杰;腹腔鏡手術(shù)治療進(jìn)展期遠(yuǎn)端胃癌的臨床療效及患者術(shù)后隨訪生存質(zhì)量研究[D];中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2015年

5 李浩;胃癌血清蛋白標(biāo)記物的篩選與鑒定[D];鄭州大學(xué);2015年

6 王巍;胃癌患者血液樣品的光譜分析[D];鄭州大學(xué);2015年

7 李玉博;高場(chǎng)磁共振在胃癌術(shù)前T分期與分級(jí)的價(jià)值[D];鄭州大學(xué);2015年

8 張?zhí)K鈺;SOX4和P53蛋白在胃癌組織中的表達(dá)及貞芪扶正膠囊對(duì)胃癌術(shù)后輔助治療作用的觀察[D];蘭州大學(xué);2015年

9 馬來(lái)陽(yáng);能譜CT成像在胃癌術(shù)前分期及分化程度評(píng)價(jià)中的應(yīng)用研究[D];蘭州大學(xué);2015年

10 侯向紅;HORMAD2在胃癌中的表達(dá)及對(duì)胃癌細(xì)胞增殖和凋亡的影響[D];蘭州大學(xué);2015年

，

本文編號(hào)：1527348